目的:嗎啡是一種強(qiáng)效鎮(zhèn)痛藥,在臨床上應(yīng)用廣泛。嗎啡戒斷是長期使用嗎啡產(chǎn)生依賴后驟然停藥產(chǎn)生的不良反應(yīng)。嗎啡戒斷產(chǎn)生的機(jī)制是復(fù)雜多樣的,機(jī)體中許多反應(yīng)與之相關(guān)。小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的免疫細(xì)胞,NLRP3(NLR family pyrin domain containing 3)炎性小體(inflammasome)是產(chǎn)生炎癥因子的關(guān)鍵分子。小膠質(zhì)細(xì)胞參與嗎啡的藥理學(xué)作用,因此本文旨在闡明NLRP3炎性小體在嗎啡戒斷中的作用。通過體內(nèi)、外嗎啡戒斷模型,采取行為學(xué)、藥理學(xué)和分子生物學(xué)等手段,探究NLRP3炎性小體介導(dǎo)嗎啡戒斷的分子機(jī)制,為臨床上減輕嗎啡戒斷癥狀提供新的治療靶點。方法:1.選用BV2小膠質(zhì)細(xì)胞,嗎啡孵育24 h后,進(jìn)行q-PCR實驗,檢測NLRP3炎性小體相關(guān)因子的m RNA水平變化。選另一批BV2小膠質(zhì)細(xì)胞,進(jìn)行嗎啡戒斷處理,給予NLRP3抑制劑MCC950(1μM)后,進(jìn)行Western blot實驗,檢測NLRP3炎性小體相關(guān)因子的蛋白表達(dá)水平變化。2.成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為四組,對照組、嗎啡依賴組、嗎啡戒斷組、嗎啡戒斷+抑制劑組。進(jìn)行嗎啡戒斷造模,戒斷給藥組分別注射...

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.NLRP3炎性小體的經(jīng)典激活通路[40]

NLRP3炎性小體在嗎啡戒斷中的作用及機(jī)制前言3NLRP1、NLRP3、NLRC4、IFI16和Pyrin參與組成的炎性小體，非經(jīng)典炎性小體是由Caspase-4（小鼠中是Caspase-11）組成的炎性小體[30,31]，它們?nèi)坑赡Ｊ阶R別受體（PRRs）參與組裝。NLRP3炎....

圖2.BV2小膠質(zhì)細(xì)胞給予嗎啡后mRNA水平變化

結(jié)果NLRP3炎性小體在嗎啡戒斷中的作用及機(jī)制22第3章結(jié)果3.1嗎啡不影響B(tài)V2小膠質(zhì)細(xì)胞炎性小體相關(guān)蛋白的mRNA水平我們將BV2小膠質(zhì)細(xì)胞濃度培養(yǎng)至70%，隨機(jī)分成六組：對照組，嗎啡10μM組，嗎啡30μM組，嗎啡100μM組，嗎啡200μM組，LPS組（0.1μM，陽性對....

圖3.BV2小膠質(zhì)細(xì)胞嗎啡戒斷后炎性相關(guān)蛋白表達(dá)水平變化

NLRP3炎性小體在嗎啡戒斷中的作用及機(jī)制結(jié)果23啡戒斷+抑制劑組：孵育嗎啡（10μM）23.5h，加入MCC950（1μM）孵育30min，再加入納洛酮（10μM）孵育30min后提取蛋白質(zhì)，進(jìn)行Westernblot實驗。結(jié)果顯示，BV2小膠質(zhì)細(xì)胞孵育嗎啡24h后，pro-C....

圖4.皮下注射NLRP3炎性小體抑制劑β-HB減輕大鼠嗎啡戒斷行為

結(jié)果NLRP3炎性小體在嗎啡戒斷中的作用及機(jī)制24嗎啡戒斷模型，選用NLRP3炎性小體的抑制劑β-HB，在嗎啡給藥前30min皮下注射β-HB。每天給藥兩次，連續(xù)給藥五天，第五天時，觀察嗎啡戒斷行為變化。嗎啡戒斷行為學(xué)測試評分結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大鼠在嗎啡戒斷后，戒斷行為評分顯著升高（t=....

本文編號：3905109