阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease，AD），俗稱老年性癡呆（senile dementia），是一種和老化相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病。隨著我國(guó)人口在上世紀(jì)末提前進(jìn)入老齡化，老年性癡呆已經(jīng)繼心臟病、腫瘤和腦卒中之后成為第四位的死亡原因。目前，對(duì)該病的診斷和治療沒有理想的藥物。 本研究利用Fmoc法合成的老年性癡呆的致病抗原-β淀粉樣蛋白之一Aβ40多肽及其氨基端第一到第十六個(gè)氨基酸殘基片段Aβ16作為抗原，從一個(gè)來自于人類抗體可變區(qū)基因構(gòu)建的單鏈抗體噬菌體展示的表達(dá)文庫(kù)中篩選老年性癡呆抗體。經(jīng)過5輪的擴(kuò)增-吸附-洗脫，分別對(duì)Aβ16、Aβ40特異的噬菌體抗體進(jìn)行了富集。從隨機(jī)挑選的53和55個(gè)克隆中發(fā)現(xiàn)了8個(gè)和33個(gè)侯選克隆。其中，針對(duì)Aβ40的10個(gè)侯選克隆經(jīng)過對(duì)抗原Aβ40的競(jìng)爭(zhēng)性ELISA測(cè)試，發(fā)現(xiàn)抗原Aβ40對(duì)它們的抑制率達(dá)到50％以上，確定為陽(yáng)性克隆。另外，Aβ16能對(duì)其中5個(gè)陽(yáng)性克隆的抗原結(jié)合活力的抑制率達(dá)到50％以上，確認(rèn)抗體對(duì)抗原的結(jié)合位于氨基端第一到第十六個(gè)氨基酸殘基表位上。 通過設(shè)計(jì)特異的引物，應(yīng)用PCR方法，將其中4個(gè)陽(yáng)性克隆的單鏈抗體基因從... 

【文章頁(yè)數(shù)】：92 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
實(shí)驗(yàn)第一部分：β淀粉樣蛋白的單鏈抗體的篩選和鑒定
實(shí)驗(yàn)第二部分：β淀粉樣蛋白的單鏈抗體基因測(cè)序和氨基酸序列確定
實(shí)驗(yàn)第三部分：β淀粉樣蛋白單鏈抗體在原核生物大腸桿菌中的表達(dá)
實(shí)驗(yàn)第四部分：β淀粉樣蛋白單鏈抗體的純化
實(shí)驗(yàn)第五部分：β淀粉樣蛋白單鏈抗體在真核生物酵母中的表達(dá)
實(shí)驗(yàn)第六部分：β淀粉樣蛋白人單克隆抗體在昆蟲細(xì)胞的表達(dá)
論文參考文獻(xiàn)
綜述
附錄
致謝



本文編號(hào)：3662303