阿爾茨海默�。ˋlzheimer’s disease;AD）是一種以進(jìn)行性的認(rèn)知障礙和記憶障礙為特點(diǎn)的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。目前研究認(rèn)為β-淀粉樣蛋白（Aβ）是導(dǎo)致阿爾茨海默病的關(guān)鍵因素。在阿爾茨海默病患者腦中,Aβ的生成和清除出現(xiàn)了嚴(yán)重的異常,導(dǎo)致Aβ水平升高,然后出現(xiàn)異常的沉積和神經(jīng)毒性。顆粒蛋白前體（progranulin）是一種分泌性的糖基化蛋白質(zhì),在多種組織和器官中都有表達(dá)。在腦中,顆粒蛋白前體主要由小膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元表達(dá)分泌,起著調(diào)控神經(jīng)生存和神經(jīng)炎癥等方面的重要作用。顆粒蛋白前體基因突變會增加阿爾茨海默病的患病風(fēng)險(xiǎn),已有研究指出顆粒蛋白前體敲除會加重阿爾茨海默病模型小鼠的相關(guān)病理,顆粒蛋白前體過表達(dá)可以減輕相關(guān)病理。但是利用顆粒蛋白前體蛋白直接給藥是否能夠改善阿爾茨海默病病理,還有顆粒蛋白前體對阿爾茨海默病病理的改善機(jī)制依然不清楚。為了回答相關(guān)問題,我們利用5xFAD模型小鼠和體外培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)探究。我們發(fā)現(xiàn)相對于WT小鼠,3月齡的5xFAD小鼠腦內(nèi)顆粒蛋白前體的含量增加,而6月齡和10月齡的小鼠腦內(nèi)的含量減少。之后通過體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與阿爾茨海默病相關(guān)的突變基因（APP-... 

【文章來源】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省211工程院校985工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 阿爾茨海默病
        1.1.1 阿爾茨海默病介紹
        1.1.2 阿爾茨海默病與Aβ假說
        1.1.3 阿爾茨海默病與β-分泌酶
        1.1.4 阿爾茨海默病與炎癥
        1.1.5 阿爾茨海默病與細(xì)胞凋亡
        1.1.6 阿爾茨海默病與小膠質(zhì)細(xì)胞
    1.2 顆粒蛋白前體
        1.2.1 顆粒蛋白前體介紹
        1.2.2 顆粒蛋白前體與神經(jīng)退行性疾病
        1.2.3 顆粒蛋白前體與炎癥
        1.2.4 顆粒蛋白前體與神經(jīng)保護(hù)
        1.2.5 顆粒蛋白前體與小膠質(zhì)細(xì)胞
    1.3 顆粒蛋白前體的研究對阿爾茨海默病的意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)動物
    2.2 實(shí)驗(yàn)器材、試劑及配方
        2.2.1 小鼠基因型鑒定實(shí)驗(yàn)器材、試劑和配方
        2.2.2 腦立體定位注射實(shí)驗(yàn)器材和試劑
        2.2.3 免疫熒光實(shí)驗(yàn)器材、試劑和配方
        2.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)器材、試劑和配方
        2.2.5 Western blot實(shí)驗(yàn)試劑和配方
        2.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)器材和試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 5xFAD小鼠基因型鑒定
        2.3.2 小鼠腦立體定位注射
        2.3.3 小鼠腦片免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        2.3.4 細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        2.3.5 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
        2.3.6 Western blot實(shí)驗(yàn)
        2.3.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)實(shí)驗(yàn)
        2.3.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 Aβ病理相關(guān)因素對顆粒蛋白前體的影響
        3.1.1 5xFAD小鼠腦內(nèi)Aβ沉積隨著年齡增長而增多
        3.1.2 5xFAD鼠腦顆粒蛋白前體含量在Aβ病理早期增加后期降低
        3.1.3 過表達(dá)APP (swe)基因降低細(xì)胞內(nèi)顆粒蛋白前體的含量
        3.1.4 Aβ_(42)寡聚體處理降低細(xì)胞內(nèi)顆粒蛋白前體的含量
    3.2 顆粒蛋白前體對Aβ病理的影響
        3.2.1 顆粒蛋白前體給藥降低5xFAD小鼠腦海馬內(nèi)Aβ斑塊的沉積
        3.2.2 顆粒蛋白前體給藥降低5xFAD小鼠腦海馬內(nèi)BACE1水平
        3.2.3 顆粒蛋白前體體外處理降低細(xì)胞BACE1表達(dá)水平
        3.2.4 顆粒蛋白前體處理降低細(xì)胞內(nèi)APP-C末端(C99)水平
        3.2.5 顆粒蛋白前體處理未對細(xì)胞NF-κB信號通路產(chǎn)生明顯影響
        3.2.6 顆粒蛋白前體處理未對細(xì)胞caspase-3通路產(chǎn)生明顯影響
        3.2.7 顆粒蛋白前體腦內(nèi)給藥增強(qiáng)小膠質(zhì)細(xì)胞對Aβ的吞噬能力
        3.2.8 顆粒蛋白前體增強(qiáng)原代培養(yǎng)小膠質(zhì)細(xì)胞的吞噬能力
第四章 總結(jié)和討論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Why microglia kill neurons after neural disorders? The friendly fire hypothesis[J]. Walace Gomes-Leal.  Neural Regeneration Research. 2019(09)
[2]Neurotrophic factors in Alzheimer’s and Parkinson’s diseases: implications for pathogenesis and therapy[J]. Tuane Bazanella Sampaio,Anne Suely Savall,Maria Eduarda Ziani Gutierrez,Simone Pinton.  Neural Regeneration Research. 2017(04)



本文編號：3639736