第一部分雌性G蛋白偶聯(lián)受體激酶5缺陷小鼠出現(xiàn)惡化的阿爾茨海默病樣病理改變背景:現(xiàn)已知道性別在阿爾茨海默病（AD）的發(fā)病中是一不容忽視的危險(xiǎn)因素,許多研究表明,AD的患病率女性顯著高于男性;與男性相比,女性AD患者腦內(nèi)呈現(xiàn)出更為嚴(yán)重的病理變化。最近研究揭示G蛋白偶聯(lián)受體（GPCRs）激酶（5GRK5）缺陷引起的相關(guān)GPCRs脫敏障礙在早期AD的病理發(fā)生機(jī)制中具有重要作用,而且GRK5敲除/缺陷（GRK5KO）小鼠表現(xiàn)出早期AD病理特征和短時(shí)期記憶功能損害。但是這種病理變化在不同性別間有沒有差異,目前不得而知。目的:研究GRK5KO小鼠出現(xiàn)的AD樣病理變化是否存在性別差異,并探討其分子機(jī)制。方法:用Campbell-Switzer銀染和免疫熒光染色來觀察老化的GRK5KO小鼠海馬內(nèi)腫脹軸突的病理變化;Western blotting檢測(cè)海馬內(nèi)突觸蛋白水平的變化;同時(shí)對(duì)上述改變?cè)诓煌詣e間進(jìn)行深入比較。此外,用免疫酶聯(lián)吸附試驗(yàn)檢測(cè)黃體生成素（LH）誘導(dǎo)的環(huán)磷酸腺苷的聚積量。結(jié)果:雌性GRK5KO小鼠海馬內(nèi)呈簇狀分布的腫脹軸突數(shù)目比雄性小鼠高出2.5倍;而且雌性GRK5KO小鼠海馬內(nèi)數(shù)個(gè)突觸蛋... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

GRK5KO小鼠子代尾部DNAPCR結(jié)果

Fig. 2. Increased accumulation of SACs in hippocampus of aged femaleGRK5KO mice.圖2A&B，老化的雄性（A）和雌性（B）GRK5KO小鼠海馬內(nèi)SACs的銀染代表圖。圖A所示的標(biāo)尺為200 μm，適用于圖A&B。C，為代表性的SACs高倍放大圖，標(biāo)尺為10μm。圖A,B&C箭頭所指部分為SACs。D, E &F，顯示海馬內(nèi)SACs的免疫熒光染色圖，圖D為抗KHC染色，圖E為抗LC3染色

華 中 科 技 大 學(xué) 博 士 學(xué) 位 論 文圖3 老化的雌性GRK5KO小鼠海馬內(nèi)突觸蛋白水平減低Fig.3. Decreased synaptic proteins in hippocampus of aged female GRK5KO mice.圖3A, 老化GRK5KO小鼠海馬內(nèi)突出功能蛋白synaptophysin, SNAP-25和GAP-43水平的變化（Western blots檢測(cè)）�！癕”代表雄性；“F”代表雌性。B, C & D, 分別為synaptophysin, SNAP-25和GAP-43的Western blots半定量結(jié)果分析。雙因素方差分析顯示遺傳性GRK5缺陷和性別雙因素對(duì)synaptophysin和SNAP25的影響均有顯著協(xié)同效應(yīng)（兩者均#P<0.05），但對(duì)GAP-43的影響卻無顯著性差異。多重比較顯示，雌性KO小鼠synaptophysin水平比雌性WT或雄性KO小鼠明顯低下（圖3B，均*P<0.05），但雄性KO小鼠synaptophysin水平與對(duì)應(yīng)的WT小鼠卻無變化。就SNAP25而言，不論是雄性還是雌性KO小鼠與其對(duì)應(yīng)的WT小鼠相比都有顯著性降低（圖3 C, 雄性：*P<0.05, 雌性：**P<0.01）。而且，雌性KO小鼠SNAP25水平也比雄性KO小鼠顯著減低（$P<0.01）。但就GAP-43而言，沒有發(fā)現(xiàn)性別差異變化，盡管也觀察到GAP-43在KO小鼠雌性或雄性病例中分別比其對(duì)應(yīng)的WT小鼠降低（圖3 D


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