阿爾茲海默氏癥（Alzheimer’s disease,AD）是老年癡呆癥的最主要發(fā)病形式,而β-淀粉樣蛋白（amyloidβprotein,Aβ）的錯(cuò)誤折疊和聚集是AD的重要誘因。因此,抑制Aβ聚集是一種有臨床應(yīng)用前景的阻止AD發(fā)生和治療AD的策略。實(shí)驗(yàn)室在前期研究中,基于對(duì)Aβ全長(zhǎng)序列氨基酸的分析,在Aβ17-21片段的基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)了一種七肽抑制劑LVFFARK（LK7）。但是,雖然LK7在抑制Aβ的聚集上表現(xiàn)出一定的效果,但其易于自聚集,并且聚集體具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性,從而阻礙了其進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和應(yīng)用。因此,本研究針對(duì)LK的上述缺陷,提出將LK7通過(guò)首尾環(huán)化改造,設(shè)計(jì)得到環(huán)肽LK7（cLK7）,通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究詳細(xì)考察了其理化性質(zhì)和對(duì)Aβ40聚集的抑制作用。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),cLK7展現(xiàn)出明顯不同于LK7的自聚集特性。LK7容易自聚集成細(xì)長(zhǎng)的致密的纖維狀聚集體,而cLK7則聚集成分散的小的球狀顆粒。當(dāng)利用SH-SY5Y和PC-12細(xì)胞株考察其對(duì)細(xì)胞的毒性上發(fā)現(xiàn),cLK7幾乎沒(méi)有細(xì)胞毒性;同時(shí),在抵御酶的降解方面,cLK7也比LK7展現(xiàn)了更高的穩(wěn)定性。另外,結(jié)合作用熱力學(xué)研究表明,在LK7和cL... 

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【部分圖文】：

AD致病基因出現(xiàn)的頻率以及它們引發(fā)AD的風(fēng)險(xiǎn)高低圖

圖 1-2APP 的酶解過(guò)程圖[44]Figure 1-2 Proteolytic processing of APP. (a) In an non-amyloidogenic pathwaycleavage occurs when α-secretase acts on APP to liberate APPsa and α-CTF, the latterbeing cleaved by γ-secretase to generate P3 and intracellular C-terminal fragment(AICD) (left). Amyloidogenic cleavage by β-secretase liberates APPsβ and theresidual peptide (β-CTF) is cleaved by γ-secretase to produce Aβ and AICD (right). (b)The schematic structure of APP is shown with the Aβ domain shaded in red andenlarged. The major sites of cleavage by α, β and γ-secretase are indicated along withAβ numbered from the N-terminal.在 Aβ 片段中，Aβ40 的含量最為豐富，約占總量的 90%-95%，其余的大部分為 Aβ42[45]。盡管 Aβ42 含量稍少，但其擁有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性，并且相比于 Aβ40聚集更為迅速，在 AD 的發(fā)病過(guò)程中扮演著重要的角色[46]。在正常人的腦脊液（CSF）中，Aβ 的濃度大約為 1~2 nM。Mehta 等人使用 ELISA 分析，測(cè)定 Aβ40在 AD 患者腦脊液（CSF）中的濃度為 30 nM，Aβ42 為 8 pM，而 Ida 等人采用

第 1 章 文獻(xiàn)綜述地解釋了 Cu2+更容易促進(jìn) Aβ42 聚集這一現(xiàn)象[55, 57]。Aβ 在從單體聚集成寡聚體然后到纖維的過(guò)程往往螯合金屬離子（圖 1-4），金屬離子的螯合過(guò)程可能會(huì)穩(wěn)定寡聚體狀態(tài)，并且產(chǎn)生活性氧物質(zhì)（reactiveoxygen species，ROS），給細(xì)胞帶來(lái)氧化壓力[58, 59]。Aβ 在與金屬離子結(jié)合時(shí)，能夠通過(guò)將兩個(gè)電子傳遞給 O2來(lái)還原 Cu2+和 Fe3+，產(chǎn)生 H2O2，這一反應(yīng)對(duì)于 Aβ-誘導(dǎo)的氧化壓力以及細(xì)胞毒性至關(guān)重要[59, 60]，Met35 以及 Tyr10 能夠部分調(diào)節(jié)此反應(yīng)[61]。此外，在生物還原劑作為電子供體的存在下，Cu2+和 Fe3+結(jié)合到 Aβ 上能進(jìn)一步催化 H2O2生成。最可能的電子供體是膽固醇和長(zhǎng)鏈脂肪酸，這與 Aβ能夠依附在細(xì)胞膜上，隨后產(chǎn)生有毒的脂質(zhì)氧化物質(zhì)（羥固醇和 4-羥基壬烯酸[HNE]）相一致[62]。

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]多肽抑制劑的設(shè)計(jì)及其功能化的納米粒子對(duì)淀粉樣β蛋白聚集的抑制作用[D]. 熊能.天津大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3595103