發(fā)布時(shí)間：2021-08-09 09:32

　　目的通過(guò)給予BDNF特異性受體TrkB激動(dòng)劑（7,8-DHF）、TRPC3激動(dòng)劑（O AG）及抑制劑（Pyr3）來(lái)研究BDNF和TRPC3對(duì)AD小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用以及BDNF與TRPC3之間的相互關(guān)系。方法1.雄性ICR小鼠,5周齡,20-24g,將其隨機(jī)分為對(duì)照組、AD組、AD+OAG組、AD+7,8-DHF組和AD+7,8-DHF+Pyr3組。2.適應(yīng)性喂養(yǎng)5天后,第六天分別給予對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組小鼠生理鹽水和Aβ1-42,進(jìn)行側(cè)腦室注射,建立動(dòng)物模型。3.實(shí)驗(yàn)組分別給予7,8-DHF、OAG、Pyr3進(jìn)行腹腔注射,每天給藥一次,連續(xù)給藥21天后取小鼠的海馬組織及全腦。4.應(yīng)用DigBehv Morris水迷宮行為學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)（定位航行實(shí)驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)）,檢測(cè)小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。5.Western blot和免疫組化檢測(cè)小鼠海馬區(qū)的TRPC3和突觸相關(guān)蛋白syn apsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α的表達(dá)和定位情況。6.ELISA測(cè)定各組小鼠海馬中Aβ濃度;剛果紅染色檢測(cè)小鼠海馬區(qū)Aβ沉積情況。結(jié)果1.Morris水迷宮行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示,連續(xù)5天每組小鼠的游泳速度穩(wěn)定。相較于對(duì)照組,AD組... 

【文章來(lái)源】：沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中五組大鼠行為學(xué)比較

23圖2Westernblotting檢測(cè)各組小鼠海馬區(qū)CaMKⅡ-α、synapsin-Ⅰ和TRPC3蛋白表達(dá)A,C,E:分別表示每組小鼠TRPC3、synapsin-Ⅰ和CaMKⅡ-α蛋白的表達(dá)情況;B:每組小鼠TRPC3蛋白表達(dá)情況;D:每組小鼠synapsin-Ⅰ蛋白表達(dá)情況;F:每組小鼠CaMKⅡ-α蛋白表達(dá)情況;**P<0.01，***P<0.001與對(duì)照組相比;++P<0.01,+++P<0.001與AD組相比;#P<0.05,##P<0.01與AD+7,8-DHF組相比.n=5.（四）突觸相關(guān)蛋白synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α蛋白在小鼠海馬CA1區(qū)的表達(dá)情況免疫組織化學(xué)顯示，在小鼠腦組織的海馬CA1區(qū)，synapsin-Ⅰ主要表達(dá)于神經(jīng)突觸中，呈現(xiàn)棕黃色絲狀排列；CaMKⅡ-α主要位于錐體細(xì)胞胞質(zhì)中，呈現(xiàn)棕黃色核周表達(dá)，染色強(qiáng)度與顏色深淺呈正相關(guān)。與對(duì)照組相比，AD組小鼠海馬CA1區(qū)的synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α染色強(qiáng)度降低，與AD組相比，AD+7,8-DHF組和AD+OAG組的synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α染色強(qiáng)度增強(qiáng)，與

25AD+7,8-DHF組AD+7,8-DHF+Pyr3組圖3免疫組織化學(xué)檢測(cè)synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α蛋白在各組小鼠海馬CA1區(qū)表達(dá)及定位注:A,B,C,D,E分別為對(duì)照組,AD組、AD+OAG組、AD+7,8-DHF組、AD+7,8-DHF+Pyr3組小鼠海馬CA1區(qū)synapsin-Ⅰ蛋白表達(dá)及定位情況（×200）;F,G,H,I,J分別為對(duì)照組,AD組、AD+OAG組、AD+7,8-DHF組、AD+7,8-DHF+Pyr3組小鼠海馬CA1區(qū)CaMKⅡ-α蛋白表達(dá)及定位情況（×200）.n=4.表2各組小鼠海馬CA1區(qū)synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α蛋白的表達(dá)對(duì)照組AD組AD+OAG組AD+7,8-DHF組AD+7,8-DHF+Pyr3組synapsin-Ⅰ0.075±0.0100.037±0.012*0.070±0.005+0.081±0.003+0.057±0.002###CaMKⅡ-α0.050±0.0050.023±0.001**0.044±0.003++0.046±0.005++0.032±0.002#注：*P<0.05,**P<0.01與對(duì)照組相比；+P<0.05，++P<0.01與AD組相比，###P<0.001與AD+7,8-DHF組相比.n=4.

【參考文獻(xiàn)】：
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