目的通過給予BDNF特異性受體TrkB激動劑（7,8-DHF）、TRPC3激動劑（O AG）及抑制劑（Pyr3）來研究BDNF和TRPC3對AD小鼠的神經(jīng)保護作用以及BDNF與TRPC3之間的相互關系。方法1.雄性ICR小鼠,5周齡,20-24g,將其隨機分為對照組、AD組、AD+OAG組、AD+7,8-DHF組和AD+7,8-DHF+Pyr3組。2.適應性喂養(yǎng)5天后,第六天分別給予對照組和實驗組小鼠生理鹽水和Aβ1-42,進行側腦室注射,建立動物模型。3.實驗組分別給予7,8-DHF、OAG、Pyr3進行腹腔注射,每天給藥一次,連續(xù)給藥21天后取小鼠的海馬組織及全腦。4.應用DigBehv Morris水迷宮行為學檢測系統(tǒng)（定位航行實驗和空間探索實驗）,檢測小鼠的學習記憶能力。5.Western blot和免疫組化檢測小鼠海馬區(qū)的TRPC3和突觸相關蛋白syn apsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α的表達和定位情況。6.ELISA測定各組小鼠海馬中Aβ濃度;剛果紅染色檢測小鼠海馬區(qū)Aβ沉積情況。結果1.Morris水迷宮行為學檢測結果顯示,連續(xù)5天每組小鼠的游泳速度穩(wěn)定。相較于對照組,AD組... 

【文章來源】：沈陽醫(yī)學院遼寧省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Morris水迷宮實驗中五組大鼠行為學比較

23圖2Westernblotting檢測各組小鼠海馬區(qū)CaMKⅡ-α、synapsin-Ⅰ和TRPC3蛋白表達A,C,E:分別表示每組小鼠TRPC3、synapsin-Ⅰ和CaMKⅡ-α蛋白的表達情況;B:每組小鼠TRPC3蛋白表達情況;D:每組小鼠synapsin-Ⅰ蛋白表達情況;F:每組小鼠CaMKⅡ-α蛋白表達情況;**P<0.01，***P<0.001與對照組相比;++P<0.01,+++P<0.001與AD組相比;#P<0.05,##P<0.01與AD+7,8-DHF組相比.n=5.（四）突觸相關蛋白synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α蛋白在小鼠海馬CA1區(qū)的表達情況免疫組織化學顯示，在小鼠腦組織的海馬CA1區(qū)，synapsin-Ⅰ主要表達于神經(jīng)突觸中，呈現(xiàn)棕黃色絲狀排列；CaMKⅡ-α主要位于錐體細胞胞質(zhì)中，呈現(xiàn)棕黃色核周表達，染色強度與顏色深淺呈正相關。與對照組相比，AD組小鼠海馬CA1區(qū)的synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α染色強度降低，與AD組相比，AD+7,8-DHF組和AD+OAG組的synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α染色強度增強，與

25AD+7,8-DHF組AD+7,8-DHF+Pyr3組圖3免疫組織化學檢測synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α蛋白在各組小鼠海馬CA1區(qū)表達及定位注:A,B,C,D,E分別為對照組,AD組、AD+OAG組、AD+7,8-DHF組、AD+7,8-DHF+Pyr3組小鼠海馬CA1區(qū)synapsin-Ⅰ蛋白表達及定位情況（×200）;F,G,H,I,J分別為對照組,AD組、AD+OAG組、AD+7,8-DHF組、AD+7,8-DHF+Pyr3組小鼠海馬CA1區(qū)CaMKⅡ-α蛋白表達及定位情況（×200）.n=4.表2各組小鼠海馬CA1區(qū)synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α蛋白的表達對照組AD組AD+OAG組AD+7,8-DHF組AD+7,8-DHF+Pyr3組synapsin-Ⅰ0.075±0.0100.037±0.012*0.070±0.005+0.081±0.003+0.057±0.002###CaMKⅡ-α0.050±0.0050.023±0.001**0.044±0.003++0.046±0.005++0.032±0.002#注：*P<0.05,**P<0.01與對照組相比；+P<0.05，++P<0.01與AD組相比，###P<0.001與AD+7,8-DHF組相比.n=4.

【參考文獻】：
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本文編號：3331822