發(fā)布時間：2021-08-04 21:42

　　目的以APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠為對象，研究Rab9及自噬在阿爾茨海默病神經(jīng)元變性過程中的作用。方法1.采用PCR技術(shù)對小鼠基因型進行鑒定。2.通過曠場實驗和新穎物體探索實驗分別對6月齡和12月齡Tg APPswe/PS1dE9轉(zhuǎn)基因小鼠和同齡同性別野生型小鼠進行自主探索活動和情感變化的檢測。3.采用免疫組化和免疫熒光技術(shù)分別對12月齡Tg APPswe/PS1dE9轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型兩組小鼠腦組織中Aβ116、LC3B、Rab9和Vimentin的表達進行檢測。4.采用免疫熒光技術(shù)對12月齡的Tg APPswe/PS1dE9轉(zhuǎn)基因小鼠腦組織進行vimentin和硫磺素S雙重標記以顯示老年斑與vimentin陽性細胞的空間位置關(guān)系。5.采用Western Blot技術(shù)分別對12月齡Tg APPswe/PS1dE9轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠腦組織中LC3B Ⅰ、LC3B Ⅱ、Rab9和Vimentin蛋白進行定量檢測。結(jié)果1．在曠場實驗中，6月齡Tg APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠的探索活性與對照組野生型小鼠相比無明顯變化，且不存在焦慮傾向；12月齡時，Tg APPswe... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同年齡、性別的轉(zhuǎn)基因小鼠和對照小鼠在曠場中的移動探索活性

A.不同年齡及性別總的運動距離；B.6 月齡雄鼠不同時間段的運動距離；C.6 月齡雌鼠不同時間的運動距離；D.12 月齡雄鼠不同時間段的運動距離。P<0.05 有統(tǒng)計學(xué)差異，數(shù)據(jù)均以均數(shù)±S表示。2.2小鼠的焦慮程度小鼠對中心區(qū)域的探索情況（在中心區(qū)域的運動距離、進入中心區(qū)域的頻率、心區(qū)域的探索時間）可反映小鼠的焦慮程度，即在中心區(qū)域活動越多，表明小鼠越有冒險性，趨避性和焦慮程度越低[17]。6 月齡的 Tg 小鼠對中心區(qū)域的探索情況與照組無明顯差異（圖 3A，3B，P>0.05）；12 月齡時，雄性 Tg 小鼠在中心區(qū)域的運距離和進入中心區(qū)域的頻率明顯少于對照組（圖 3A，P＝0.0285；圖 3B，P=0.024但對中心區(qū)域的探索時間與對照組無顯著差異（圖 3C，P>0.05），12 月齡雄性 Tg鼠可能存在焦慮傾向。圖 3：

×200 ×200示 12 月齡 Tg APPswe/PS1dE9 小鼠及與同窩同齡野生型小鼠腦內(nèi)老年斑分布及形態(tài)。同基因型小鼠 6E10 的免疫熒光染色（×40，×400）；（B）示不同基因型小鼠皮層 6E1染色（×200）12月齡不同基因型小鼠 LC3B 染色結(jié)果細胞內(nèi) LC3B 主要分布在自噬小體膜的表面，成為自噬小體特異性的標記物


本文編號：3322459