發(fā)布時(shí)間：2021-08-04 21:42

　　目的以APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠為對(duì)象，研究Rab9及自噬在阿爾茨海默病神經(jīng)元變性過程中的作用。方法1.采用PCR技術(shù)對(duì)小鼠基因型進(jìn)行鑒定。2.通過曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)和新穎物體探索實(shí)驗(yàn)分別對(duì)6月齡和12月齡Tg APPswe/PS1dE9轉(zhuǎn)基因小鼠和同齡同性別野生型小鼠進(jìn)行自主探索活動(dòng)和情感變化的檢測(cè)。3.采用免疫組化和免疫熒光技術(shù)分別對(duì)12月齡Tg APPswe/PS1dE9轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型兩組小鼠腦組織中Aβ116、LC3B、Rab9和Vimentin的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。4.采用免疫熒光技術(shù)對(duì)12月齡的Tg APPswe/PS1dE9轉(zhuǎn)基因小鼠腦組織進(jìn)行vimentin和硫磺素S雙重標(biāo)記以顯示老年斑與vimentin陽性細(xì)胞的空間位置關(guān)系。5.采用Western Blot技術(shù)分別對(duì)12月齡Tg APPswe/PS1dE9轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠腦組織中LC3B Ⅰ、LC3B Ⅱ、Rab9和Vimentin蛋白進(jìn)行定量檢測(cè)。結(jié)果1．在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中，6月齡Tg APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠的探索活性與對(duì)照組野生型小鼠相比無明顯變化，且不存在焦慮傾向；12月齡時(shí)，Tg APPswe... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同年齡、性別的轉(zhuǎn)基因小鼠和對(duì)照小鼠在曠場(chǎng)中的移動(dòng)探索活性

A.不同年齡及性別總的運(yùn)動(dòng)距離；B.6 月齡雄鼠不同時(shí)間段的運(yùn)動(dòng)距離；C.6 月齡雌鼠不同時(shí)間的運(yùn)動(dòng)距離；D.12 月齡雄鼠不同時(shí)間段的運(yùn)動(dòng)距離。P<0.05 有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，數(shù)據(jù)均以均數(shù)±S表示。2.2小鼠的焦慮程度小鼠對(duì)中心區(qū)域的探索情況（在中心區(qū)域的運(yùn)動(dòng)距離、進(jìn)入中心區(qū)域的頻率、心區(qū)域的探索時(shí)間）可反映小鼠的焦慮程度，即在中心區(qū)域活動(dòng)越多，表明小鼠越有冒險(xiǎn)性，趨避性和焦慮程度越低[17]。6 月齡的 Tg 小鼠對(duì)中心區(qū)域的探索情況與照組無明顯差異（圖 3A，3B，P>0.05）；12 月齡時(shí)，雄性 Tg 小鼠在中心區(qū)域的運(yùn)距離和進(jìn)入中心區(qū)域的頻率明顯少于對(duì)照組（圖 3A，P＝0.0285；圖 3B，P=0.024但對(duì)中心區(qū)域的探索時(shí)間與對(duì)照組無顯著差異（圖 3C，P>0.05），12 月齡雄性 Tg鼠可能存在焦慮傾向。圖 3：

×200 ×200示 12 月齡 Tg APPswe/PS1dE9 小鼠及與同窩同齡野生型小鼠腦內(nèi)老年斑分布及形態(tài)。同基因型小鼠 6E10 的免疫熒光染色（×40，×400）；（B）示不同基因型小鼠皮層 6E1染色（×200）12月齡不同基因型小鼠 LC3B 染色結(jié)果細(xì)胞內(nèi) LC3B 主要分布在自噬小體膜的表面，成為自噬小體特異性的標(biāo)記物


本文編號(hào)：3322459