本文關鍵詞：大鼠2型糖尿病后抑郁對海馬細胞凋亡和Bad、Bcl-xL的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 探索2型糖尿病伴發(fā)抑郁的可能機制,為臨床上2型糖尿病合并抑郁的預防和治療提供借鑒和幫助。通過分子水平干預糖尿病后抑郁的發(fā)生,提高糖尿病患者的生活質(zhì)量。本研究采用高脂高糖飲食結合鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射法制作2型糖尿病模型,采用慢性不可預見溫和應激方法制作抑郁模型,采用高脂高糖飲食結合鏈脲佐菌素(STz)腹腔注射法和慢性不可預見溫和應激方法制作2型糖尿病后抑郁模型。觀察糖尿病大鼠、抑郁大鼠及糖尿病合并抑郁大鼠的行為學改變,海馬細胞凋亡相關因子Bad, Bcl-xL表達以及海馬細胞凋亡形態(tài)學的改變,探探討2型糖尿病合并抑郁可能的發(fā)病機制。 方法： 將50只成年健康雄性sD大鼠隨機分成實驗對照組(10只)、2型糖尿病組(15只)、單純抑郁組(10只)、2型糖尿病合并抑郁組(15只),以高脂高糖飲食加腹腔注射鏈尿佐菌素復制2型糖尿病大鼠模型,慢性不可預見溫和應激方法制作抑郁模型,兩者結合建立2型糖尿病后抑郁模型,觀察其體重、二便、飲食、血糖等一般情況,行曠場實驗及強迫游泳實驗對其進行行為學檢測,通過HE染色觀察實驗各組大鼠腦海馬細胞形態(tài)學改變,用免疫組化法檢測各組大鼠海馬細胞Bad, Bcl-xL的表達,用TUNEL法檢測各組大腦海馬細胞凋亡情況,最后采用配對t檢驗；單因素方差分析,配對樣本t檢驗等統(tǒng)計學方法進行數(shù)據(jù)分析以及觀察腦組織的病理變化。 結果： 1.高脂高糖飲食喂養(yǎng)期間,實驗各組動物體重穩(wěn)定增長,注射STZ制作糖尿病模型后,慢性不可預見溫和應激方法制作抑郁模型期間,糖尿病組、單純抑郁組、合并抑郁組大鼠體重均有下降,糖尿病組大鼠飲水及攝食量顯著增多,血糖明顯升高(P0.01,P0.05),尿量增多,曠場實驗水平得分明顯下降(P0.01,P0.05),。單純抑郁組大鼠體重下降明顯(P0.01,P0.05),曠場實驗水平得分和垂直得分均明顯下降(P0.01,P0.05),強迫游泳實驗測定其游泳時間明顯減少(P0.01,P0.05),靜止不動時間明顯增加(P0.01,P0.05)。合并抑郁組大鼠體重較其余各組顯著下降,尿量顯著增加,血糖顯著升高(P0.01,P0.05),曠場實驗測定水平得分和垂直得分顯著下降(P0.01,P0.05),強迫游泳實驗測定其游泳時間明顯較其余各組減少(P0.01,P0.05),靜止不動時間比其余各組增加顯著(P0.01,P0.05)。 2.通過HE染色觀察實驗各組大鼠腦海馬細胞形態(tài)學改變：合并抑郁組大鼠海馬神經(jīng)元細胞明顯減少,細胞層次紊亂,部分細胞壞死。 3.通過免疫組化法檢測實驗各組大鼠腦海馬Bad, Bcl-xL的表達：糖尿病組大鼠腦海馬細胞表達Bad水平較對照組明顯增高(P0.01,P0.05),表達Bcl-xL水平與對照組無明顯差異。單純抑郁組大鼠腦海馬細胞表達Bad較對照組明顯增高(P0.01,P0.05),表達Bcl-xL水平較對照組明顯下降(P0.01,P0.05),合并抑郁組大鼠腦海馬中Bad表達水平較其余各組明顯增高,Bcl-xL表達水平明顯下降(P0.01,P0.05)。 4.通過TUNEL法檢測實驗各組大鼠腦海馬細胞凋亡情況：糖尿病組大鼠海馬細胞凋亡數(shù)較對照組顯著增加(P0.01,P0.05),單純抑郁組大鼠海馬細胞凋亡數(shù)與對照組無明顯差異,合并抑郁組大鼠腦海馬中細胞凋亡數(shù)較其余各實驗組顯著增加(P0.01,P0.05) 結論： 1.合并抑郁組大鼠體重下降明顯,血糖顯著增高,說明2型糖尿病合并抑郁癥加重糖代謝紊亂。 2.合并抑郁組大鼠行為學測試,曠場實驗水平得分及垂直得分顯著下降,強迫游泳實驗靜止時間顯著增加,游泳時間顯著減少,說明2型糖尿病合并抑郁癥能使行為活動程度減少,探究能力下降,絕望程度增加。 3.2型糖尿病合并抑郁組腦海馬細胞Bad陽性細胞計數(shù)結果較其余各實驗組相應部位的結果明顯增加,Bcl-xL陽性細胞計數(shù)結果較其余各實驗組相應部位的結果明顯減少。腦海馬神經(jīng)細胞凋亡數(shù)較其余各實驗組顯著增加,提示2型糖尿病合并抑郁癥可以促進細胞凋亡相關蛋白Bad促凋亡蛋白表達的上調(diào),Bcl-xL抑制細胞凋亡蛋白表達的下降,促進神經(jīng)元凋亡的發(fā)生,從而證實神經(jīng)元凋亡可能是2型糖尿病合并抑郁癥發(fā)病的一種機制。
【關鍵詞】：2型糖尿病 抑郁障礙 行為學 Bad蛋白 Bcl-xL蛋白 細胞凋亡 細胞信號轉(zhuǎn)導
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R587.1;R749.4
【目錄】：

• 中文摘要8-11
• Abstract11-14
• 引言(Introduction)14-17
• 材料與方法(Subjects and methods)17-25
• 1 材料17-19
• 1.1 實驗動物及其喂養(yǎng)17
• 1.1.1 實驗動物17
• 1.1.2 實驗動物生活條件17
• 1.1.3 實驗動物喂養(yǎng)飼料17
• 1.2 主要實驗儀器17-18
• 1.3 主要實驗試劑18-19
• 2 實驗方法19-24
• 2.1 動物分組19
• 2.2 動物模型的建立19-20
• 2.2.1 2型糖尿病模型的建立19
• 2.2.1.1 2型糖尿病判斷標準19
• 2.2.2 抑郁模型的建立19-20
• 2.3 行為學觀察的指標及其方法20-21
• 2.3.1 為證實2型糖尿病鼠模型成功與否檢測下列項目20-21
• 2.3.1.1 實驗動物成模率及死亡率20
• 2.3.1.2 一般狀況20
• 2.3.1.3 血糖的測定20
• 2.3.1.4 曠場實驗測定20-21
• 2.3.1.4.2 曠場實驗的方法與步驟21
• 2.3.1.4.3 曠場實驗的觀察指標21
• 2.3.1.5 強迫游泳實驗測定21
• 2.4 動物取材HE染色檢測海馬形態(tài)學改變21-22
• 2.4.1 動物取材21-22
• 2.4.2 HE染色22
• 2.5 動物取材免疫組化染色,檢測海馬中Bad及Bcl-xL陽性細胞數(shù)22-24
• 2.5.1 測定原理22
• 2.5.2 實驗步驟22-23
• 2.5.3 細胞凋亡檢測23-24
• 2.5.4 圖像分析24
• 3 統(tǒng)計學處理24-25
• 結果(Results)25-48
• 1 實驗動物成模率及死亡率25
• 2 一般狀況25-26
• 附表26-48
• 討論(Discussion)48-61
• 1 動物模型的建立48-52
• 1.1 實驗動物的選擇48
• 1.2 2型糖尿病模型的選擇48-49
• 1.2.1 2型糖尿病模型建立成功的鑒定49
• 1.2.2 2型糖尿病模型制作注意事項49
• 1.3 抑郁模型的選擇49-51
• 1.4 抑郁癥行為學評價51-52
• 1.4.1 體重測量51
• 1.4.2 曠場實驗評價及注意事項51
• 1.4.3 強迫游泳實驗評價及注意事項51-52
• 2 免疫組化注意事項52-53
• 3 TUNEL注意事項53
• 4 2型糖尿病后抑郁癥53-56
• 4.1 2型糖尿病后抑郁的研究狀況53-54
• 4.3 2型糖尿病后抑郁的發(fā)病機制54-56
• 4.3.1 神經(jīng)內(nèi)分泌因素54-55
• 4.3.2 血管因素55
• 4.3.3 社會心理因素55-56
• 5 2型糖尿病后抑郁對大鼠Bad含量變化影響及可能機制56-57
• 5.1 Bad參與細胞凋亡的機制56-57
• 5.1.1 Bad的磷酸化與去磷酸化56
• 5.1.2 Bad的結構變化56
• 5.1.3 Bad與Bax56-57
• 6 2型糖尿病后抑郁對大鼠Bcl-xL含量變化影響及可能機制57-58
• 6.1 Bcl-xL參與細胞凋亡的機制57-58
• 7 2型糖尿病后抑郁與細胞凋亡信號轉(zhuǎn)導58-59
• 8 Bcl-2家族與細胞凋亡59-60
• 9 展望60-61
• 參考文獻(References)61-64
• 綜述(review)64-72
• 參考文獻70-72
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況72-73
• 致謝73

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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  本文關鍵詞：大鼠2型糖尿病后抑郁對海馬細胞凋亡和Bad、Bcl-xL的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：331233