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新型殼聚糖-Trolox納米顆粒對于過氧化氫誘導(dǎo)SH-SY5Y細胞氧化應(yīng)激損傷的保護作用與機制研究

發(fā)布時間:2021-07-09 01:22
  阿爾茲海默癥(Alzheimer Diseases,AD)是最普遍的神經(jīng)退行性疾病,病理學(xué)特點主要是細胞外由β-淀粉樣蛋白(Aβ)寡聚物沉積斑及Tau蛋白神經(jīng)纖維纏結(jié)以及記憶衰退。雖然導(dǎo)致AD神經(jīng)元死亡的基本生化和分子機制尚未明確,但是氧化應(yīng)激與AD的發(fā)病機制密切相關(guān)。納米材料作為新型載體材料,具有無毒、粒徑小、無免疫原性等優(yōu)勢,可以負載小分子藥物突破血腦屏障治療AD等神經(jīng)損傷疾病。鑒于此,我們以安全無毒的殼聚糖為原料,將其負載水溶性維生素E類似物Trolox形成殼聚糖-Trolox納米顆粒(CS-Trolox NPs)。我們以H2O2誘導(dǎo)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人早老素突變體APPsw質(zhì)粒的SH-SY5Y細胞株建立AD細胞模型,探討上述CS-Trolox NPs對神經(jīng)細胞氧化應(yīng)激損傷的保護效果及相關(guān)機制,具體結(jié)果如下:1.CS-Trolox NPs的制備、表征和生物相容性利用H2O2及機械超聲的方法,將大分子CS氧化降解為小分子量CS,加入環(huán)氧乙烷對其進行羥乙基化修飾,通過自組裝得到水溶性殼聚糖納米顆粒,并通過疏... 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 自由基生物醫(yī)學(xué)與抗氧化劑研究進展
        1.1.1 活性氧
        1.1.2 活性氧的產(chǎn)生來源
        1.1.3 活性氧對機體產(chǎn)生的損傷
        1.1.4 活性氧的清除機制
        1.1.5 抗氧化劑及其作用機理
    1.2 阿爾茲海默癥的研究進展
        1.2.1 阿爾茲海默癥概述
        1.2.2 APP蛋白與Aβ
        1.2.3 AD的發(fā)病機制
    1.3 納米顆粒作為藥物載體的研究進展
        1.3.1 納米技術(shù)概述
        1.3.2 殼聚糖概述
        1.3.3 殼聚糖納米顆粒的制備方法
        1.3.4 殼聚糖的生物降解性
        1.3.5 殼聚糖的毒性
        1.3.6 殼聚糖納米顆粒作為藥物載體的研究
第2章 研究內(nèi)容
    2.1 引言
    2.2 實驗材料、試劑與儀器
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗試劑
        2.2.3 實驗儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 CS-Trolox NPs的制備
        2.3.2 細胞培養(yǎng)和氧化應(yīng)激模型的建立
        2.3.3 細胞存活率的測定方法
        2.3.4 細胞對CS-Trolox NPs攝取的測定方法
        2.3.5 細胞內(nèi)ROS水平的測定方法
        2.3.6 細胞分泌Aβ_(1-40)的測定方法
        2.3.7 細胞凋亡的測定方法
        2.3.8 細胞相關(guān)蛋白表達的測定方法
        2.3.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 CS-Trolox NPs的化學(xué)表征
        3.1.1 CS-Trolox NPs的制備流程
        3.1.2 CS NPs的透射電鏡(TEM)照片
        3.1.3 CS-Trolox NPs的動態(tài)光散射檢測
        3.1.4 CS-Trolox NPs的紫外表征
    3.2 CS納米載體的細胞毒性
    3.3 神經(jīng)細胞氧化應(yīng)激損傷模型的建立
        3.3.1 實驗細胞的確定
        3.3.2 H_2O_2濃度的選擇
        3.3.3 氧化應(yīng)激損傷后細胞的自行修復(fù)
    3.4 CS-Trolox NPs對H_2O_2誘導(dǎo)損傷細胞存活率的影響
    3.5 細胞對CS-Trolox NPs的攝取效果
    3.6 CS-Trolox NPs對H_2O_2誘導(dǎo)損傷細胞內(nèi)ROS水平的影響
    3.7 CS-Trolox NPs對H_2O_2誘導(dǎo)損傷細胞分泌Aβ1-40的影響
    3.8 CS-Trolox NPs對H_2O_2誘導(dǎo)損傷細胞凋亡的影響
        3.8.1 形態(tài)學(xué)觀察
        3.8.2 CS-Trolox NPs對H_2O_2誘導(dǎo)損傷細胞線粒體膜電位的影響
    3.9 CS-Trolox NPs對H_2O_2誘導(dǎo)損傷細胞凋亡通路的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號:3272720

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