發(fā)布時(shí)間：2021-05-24 18:53

　　β淀粉樣蛋白（Amyloidβ，Aβ）是比較公認(rèn)的阿爾茨海默�。ˋlzheimer’s Disease，AD）的原發(fā)性致病因子，Aβ在腦內(nèi)的異常聚合和沉積是AD發(fā)病機(jī)制的中心環(huán)節(jié)。靶向Aβ的被動免疫治療已在AD模型動物上取得顯著效果，但抗體的鼠源性限制了其在人體的應(yīng)用。研制合適的人源化抗體是開展人體Aβ免疫療法的首要條件。利用噬菌體抗體庫技術(shù)獲得的單鏈抗體為全人源性，更適用于人體。本課題組之前已經(jīng)以Aβ_1-40為靶標(biāo)，篩選噬菌體單鏈抗體庫獲得了抗Aβ_1-40單鏈抗體E3（single chain variable fragment E3，E3 scfv）的基因片段，并對單鏈抗體E3初步進(jìn)行了體外實(shí)驗(yàn)。本研究在固定誘導(dǎo)表達(dá)時(shí)間和誘導(dǎo)表達(dá)溫度的條件下，采用不同終濃度的IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)，通過SDS-PAGE分析全菌目的蛋白質(zhì)E3 scfv的表達(dá)水平，確定了E3 scfv在20℃誘導(dǎo)表達(dá)18 h時(shí)，所需誘導(dǎo)劑IPTG的最佳濃度為0.1 mM；純化時(shí)，對樣品依次用含咪唑10 mM、20 mM、30 mM、40 mM、50 mM、60 mM、70 m... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
第一章 引言
第二章 材料和方法
第三章 結(jié)果
第四章 分析和討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
綜述



本文編號：3204686