阿爾茨海默癥（Alzheimer’s disease,AD）是一種年齡相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病,其特征是認(rèn)知和記憶功能逐漸喪失。環(huán)狀RNA在調(diào)節(jié)基因表達(dá)中發(fā)揮重要作用,它們?cè)谥袠猩窠?jīng)系統(tǒng)中高度富集。ciRS-7作為一種環(huán)狀RNA,有報(bào)導(dǎo)它在AD病人腦中顯著性下降,但其對(duì)AD的作用和機(jī)制目前尚不清楚。本研究采用qPCR技術(shù)檢測(cè)了ciRs-7在AD模型細(xì)胞系N2a-sw和HEK293/tau、原代培養(yǎng)的神經(jīng)元和12月齡三轉(zhuǎn)基因AD模型小鼠（3×Tg-AD）中的表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)與其非AD的對(duì)照組相比較,AD組中ciRs-7的表達(dá)水平均降低。在3×Tg-AD模型小鼠腦中ciRs-7的表達(dá)量隨著月齡的增加先增后降,說明ciRS-7與小鼠生長(zhǎng)及AD形成過程有密切的聯(lián)系。在N2a-sw細(xì)胞中過表達(dá)ciRS-7后,利用Western blot檢測(cè)了?-淀粉樣蛋白（A?）級(jí)聯(lián)通路中關(guān)鍵蛋白APP、BACE1、Aβ_1-42等的蛋白表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)它們均下調(diào),說明在AD模型細(xì)胞中ciRS-7的上調(diào)可以抑制A?級(jí)聯(lián)通路。為了進(jìn)一步研究ciRS-7在N2a-sw細(xì)胞中的作用通路,將其過表達(dá)后進(jìn)... 

【文章來源】：深圳大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

環(huán)狀RNA形成過程

序）獲得短序列[63]。目前，微陣列和 RNA 測(cè)序（RNA-seq）兩種方法已經(jīng)成為當(dāng)代轉(zhuǎn)錄組學(xué)的微陣列測(cè)量熒光標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄物（mRNA）與珠芯片上的核苷酸探針雜交，RN每個(gè)轉(zhuǎn)錄物的測(cè)序，隨后與參考基因組比對(duì)。盡管成本更低和勞動(dòng)力密集程度陣列現(xiàn)在已被 RNA-seq 大部分所取代。 選題意義與研究框架AD 是一種老年病，其發(fā)病率會(huì)隨著年齡增加而增加，該病晚期時(shí)，病人會(huì)出記憶衰退，生活基本不能自理，甚至?xí)䦟?dǎo)致死亡，給個(gè)人、家庭和社會(huì)造成嚴(yán)和社會(huì)問題。當(dāng)前中國(guó)正快速步入老年化，老年人的數(shù)目大幅增加，AD 是我面對(duì)的問題。環(huán)狀 RNA 是最近幾年的研究熱點(diǎn)，其在神經(jīng)組織中富集；并且iRS-7 在 AD 病人腦中低表達(dá)，但其功能和作用機(jī)制仍不太清楚。本研究的目的iRS-7 在 AD 中的作用以及是否可作為藥物靶點(diǎn)。

第二章 材料與方法2.1 實(shí)驗(yàn)材料2.1.1 細(xì)胞模型和動(dòng)物模型小鼠神經(jīng)瘤母細(xì)胞 N2a 和人源胚胎腎細(xì)胞 HEK293 均購自中科院上海細(xì)胞-sw 細(xì)胞是穩(wěn)轉(zhuǎn) APP695swedish 突變基因的 Neuro-2a 細(xì)胞，HEK293/tau 是穩(wěn)41 的人胚腎 293 細(xì)胞，兩種 AD 模型細(xì)胞系均為本實(shí)驗(yàn)室儲(chǔ)存。實(shí)驗(yàn)所用的 3×TgAD 小鼠及野生型小鼠均購于美國(guó) Jax 實(shí)驗(yàn)室。2.1.2 實(shí)驗(yàn)質(zhì)粒pcDNA3.1(+) ZKSCAN1 MCS-ciRS-7 Exon 和 pcDNA3.1(+) ZKSCAN1 MCStor 的穿刺菌均購自于 addgene。


本文編號(hào)：3010536