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海藻糖抑制淀粉質(zhì)β多肽聚集的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-04 23:03
  伴隨著全球人口老齡化步伐的加快,阿爾滋海默癥(AD)的發(fā)病人數(shù)逐年劇增,已經(jīng)僅次于癌癥和心臟病。目前,阿爾茲海默癥成為危害人類健康和生活質(zhì)量的第三大殺手。由于AD的發(fā)病是淀粉質(zhì)多肽(Aβ)聚集的后果,而Aβ16-22又是Aβ聚集的重要疏水性核心,因此具有重要研究?jī)r(jià)值。為了觀察Aβ在聚集過程中各種聚集體和寡聚體的形成特點(diǎn)和海藻糖對(duì)聚集的抑制作用,本文以Aβ16-22作為模型多肽,利用毛細(xì)管電泳法分別考察在水溶液和海藻糖溶液的Aβ16-22聚集過程及聚集過程中寡聚體的形成特點(diǎn);并利用質(zhì)譜和超濾方法對(duì)不同時(shí)間的培養(yǎng)產(chǎn)物進(jìn)行了鑒定;同時(shí)利用透射電鏡對(duì)海藻糖抑制聚集的作用及對(duì)聚集過程的影響進(jìn)行了表觀形貌的觀察,得到以下結(jié)果。首先,利用毛細(xì)管電泳考察了Aβ16-22的性質(zhì)。發(fā)現(xiàn)其具有很強(qiáng)的疏水性和較高的等電點(diǎn)(pI=10-11),由此特點(diǎn)要求毛細(xì)管電泳需在較低的pH值條件下(pH 2.3的40 mM的磷酸緩沖液)進(jìn)行,以實(shí)現(xiàn)樣品的完全分離。第二,分析Aβ16-22不同培養(yǎng)時(shí)間產(chǎn)物的毛細(xì)管電泳結(jié)果發(fā)現(xiàn),在合適的條件下,應(yīng)用毛細(xì)管電泳能使多肽的不同寡聚體分開,甚至得到基線分離。用質(zhì)譜和超濾的方法對(duì)多肽... 

【文章來源】:天津大學(xué)天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

海藻糖抑制淀粉質(zhì)β多肽聚集的實(shí)驗(yàn)研究


Aβ產(chǎn)生示意圖

示意圖,聚集過程,示意圖,寡聚體


第一章 文獻(xiàn)綜述觸丟失等)與病人體內(nèi)的寡聚體濃度密切相關(guān),而不是大腦中出現(xiàn)的不溶性斑塊濃度[7-11],并且 Aβ 寡聚體在大腦中的形成和增加都先于 AD 癥狀的發(fā)展[12,13]。最近也有實(shí)驗(yàn)證實(shí),從細(xì)胞培養(yǎng)和小鼠大腦中分離出來的寡聚體具有毒性[14],也有證據(jù)表明細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的 Aβ 寡聚體對(duì)人體的毒性要遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過那些體外 Aβ 不溶物的毒性[15]。

海藻糖,質(zhì)譜圖,單體


51圖 3-10 Aβ16-22 在未加海藻糖時(shí)培養(yǎng) 0 天和 3 天的質(zhì)譜圖A: 0 day;B: 3 dayFigure 3-10 The MS spectum of Aβ16-22 incubation 0 and 3 days in wβ16-22 在 1 mM 海藻糖中培養(yǎng)的情況(圖 3-11)與未加海藻糖的荷比為 894 左右出現(xiàn)一個(gè)單體峰;在荷質(zhì)比 1800 左右,還有很質(zhì)荷比在 1788.4 處出現(xiàn)一個(gè)小峰,為 Aβ16-22 四聚體表現(xiàn)出的質(zhì)譜分析中可以得出,無論加入海藻糖還是未加入海藻糖,在培了分子量為 894 的 Aβ16-22 單體和分子量為 3755 的四聚體。


本文編號(hào):2898390

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