獎(jiǎng)賞與厭惡的相關(guān)記憶可以影響我們行為上的選擇。成癮性藥物往往會(huì)作用于腦中學(xué)習(xí)記憶相關(guān)的通路,將攝入藥物帶來(lái)的快感或是藥物戒斷產(chǎn)生的負(fù)面情緒與當(dāng)下所處的環(huán)境因素聯(lián)系起來(lái),形成特定的藥物成癮的關(guān)聯(lián)記憶。這些記憶會(huì)使藥物戒斷患者在身處相同環(huán)境的情況下有著更高的復(fù)吸風(fēng)險(xiǎn)。多巴胺在記憶的形成與表達(dá)中有著重要的貢獻(xiàn)。在哺乳動(dòng)物中,中腦核團(tuán)腹側(cè)被蓋區(qū)(VTA)的多巴胺神經(jīng)元在獎(jiǎng)賞相關(guān)的學(xué)習(xí)與記憶形成中起到必不可少的作用。同樣在藥物成癮,例如嗎啡成癮中,VTA處的多巴胺神經(jīng)元介導(dǎo)了嗎啡起始的對(duì)動(dòng)物行為的強(qiáng)化反應(yīng)以及嗎啡相關(guān)的獎(jiǎng)賞記憶的形成。腦中諸多結(jié)構(gòu),如中央杏仁核,伏隔核和腦室周?chē)那鹉X區(qū)域都被報(bào)道參與了正常生理?xiàng)l件和嗎啡成癮狀態(tài)下關(guān)聯(lián)記憶的表達(dá)。雖然這些結(jié)構(gòu)都接受大量的多巴胺能輸入,但是多巴胺系統(tǒng)在關(guān)聯(lián)記憶的表達(dá),特別是嗎啡成癮記憶表達(dá)中的確切作用和具體的神經(jīng)環(huán)路機(jī)制仍不清楚。本文中,我們?cè)谛∈笾锌p背核(DRN)發(fā)現(xiàn)了一群特異的多巴胺神經(jīng)元。利用光纖記錄系統(tǒng)和基于腺病毒相關(guān)病毒特異表達(dá)的鈣離子濃度指示蛋白,我們發(fā)現(xiàn)這群神經(jīng)元可以被獎(jiǎng)賞刺激,如蔗糖水,高脂食物和社交隔離后的社交行為所激活。它們對(duì)不同大小的蔗糖水的反應(yīng)隨著獎(jiǎng)賞變大而變大,對(duì)同樣質(zhì)量的高脂食物可根據(jù)自身狀態(tài)的不同做出不同的反應(yīng),并且對(duì)暗示蔗糖水的聲音有學(xué)習(xí)效果。除了獎(jiǎng)賞,DRN多巴胺神經(jīng)元也可被電擊所興奮,并且同樣表現(xiàn)出了對(duì)暗示電擊的聲音的學(xué)習(xí)能力。利用光遺傳學(xué)與條件位置偏好行為范式,我們發(fā)現(xiàn)這群神經(jīng)元在高脂食物關(guān)聯(lián)記憶的表達(dá)階段,而非記憶的形成階段至關(guān)重要。利用聽(tīng)覺(jué)暗示的條件恐懼測(cè)試,我們發(fā)現(xiàn)DRN多巴胺神經(jīng)元在恐懼記憶的形成與表達(dá)中均起到作用。這些結(jié)果說(shuō)明了 DRN多巴胺神經(jīng)元在生理?xiàng)l件下對(duì)小鼠獎(jiǎng)賞與厭惡相關(guān)記憶的表達(dá)必不可少。之后,我們檢測(cè)了這群神經(jīng)元是否在嗎啡成癮的獎(jiǎng)賞關(guān)聯(lián)記憶與戒斷的厭惡關(guān)聯(lián)記憶中起到了與生理?xiàng)l件下類(lèi)此的效果。通過(guò)c-Fos免疫染色和光纖記錄實(shí)驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)DRN多巴胺神經(jīng)元在嗎啡引起的條件位置偏好實(shí)驗(yàn)(CPP)的測(cè)試階段嗎啡關(guān)聯(lián)箱體中被特異性激活;在測(cè)試階段,而非訓(xùn)練階段抑制這群神經(jīng)元的發(fā)放可以阻斷嗎啡位置偏好的形成。利用相同的方法,我們觀察到DRN多巴胺神經(jīng)元在自發(fā)性嗎啡戒斷反應(yīng)引起的條件位置厭惡實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練階段的第4天和測(cè)試階段均被興奮;在這兩個(gè)階段抑制神經(jīng)元活性均可導(dǎo)致條件位置厭惡程度的降低。并且,損毀這群神經(jīng)元對(duì)嗎啡戒斷的生理癥狀并無(wú)影響。這些結(jié)果說(shuō)明DRN多巴胺神經(jīng)元在正常生理?xiàng)l件和嗎啡成癮中對(duì)獎(jiǎng)賞與厭惡相關(guān)記憶的表達(dá)都至關(guān)重要。最后,利用狂犬病毒單突觸逆向追蹤篩選的方法,我們找到了在嗎啡成癮狀態(tài)下DRN多巴胺神經(jīng)元特異性變化的上游核團(tuán)——側(cè)臂旁核(LPB)。通過(guò)體外電生理記錄和條件位置偏好的行為實(shí)驗(yàn),我們闡明了 LPB神經(jīng)元到DRN多巴胺神經(jīng)元的谷氨酸能通路在生理和嗎啡成癮狀態(tài)下對(duì)獎(jiǎng)賞信息的傳遞十分重要。綜上所述,我們的結(jié)果表明DRN多巴胺神經(jīng)元在記憶表達(dá)的調(diào)控中的重要作用,為干預(yù)嗎啡成癮提供潛在靶點(diǎn)。
【學(xué)位單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：R749.61
【部分圖文】：

使其能迅速地在有激發(fā)光的條件下產(chǎn)生強(qiáng)烈的綠色熒光。利用ＧＣａＭＰ鈣??離子指示劑與光纖記錄系統(tǒng)，我們可以實(shí)時(shí)在體觀察中縫背核多巴胺神經(jīng)元對(duì)糖水??獎(jiǎng)勵(lì)的反應(yīng)（圖３ａ）。我們?cè)冢冢停颍茫颍遛D(zhuǎn)基因小鼠的中縫背核注射了重組酶Ｃｒｅ依賴(lài)??的用于表達(dá)鈣離子濃度指示劑的腺病毒相關(guān)病毒ＡＡＶ－ＤＩ０－ＧＣａＭＰ６ｍ，并在相同位置??植入事先制作好的光纖陶瓷插芯。通過(guò)對(duì)酪氨酸羥化酶（ＴＨ，多巴胺神經(jīng)元標(biāo)志蛋??白）和綠色熒光蛋白（用于指示ＧＣａＭＰ６ｍ所在位置）的免疫熒光染色，大多數(shù)紅??色的ＴＨ陽(yáng)性細(xì)胞均和綠色的表達(dá)ＧＣａＭＰ６ｍ蛋白的細(xì)胞重合，呈現(xiàn)黃色的熒光信??號(hào)（圖３ｂ），說(shuō)明利用Ｄ／＾－Ｃｒｅ轉(zhuǎn)基因小鼠與Ｃｒｅ依賴(lài)的ＧＣａＭＰ６ｍ病毒的確可以高??效而特異地標(biāo)記多巴胺神經(jīng)元。為了更好地控制每次蔗糖水的攝入量，方便之后分??析中縫背核多巴胺神經(jīng)元對(duì)暗示獎(jiǎng)賞的聲音的學(xué)習(xí)效果，我們對(duì)表達(dá)了?ＧＣａＭＰ６ｍ??蛋白并頭部固定光纖陶瓷插芯的小鼠進(jìn)行了口腔埋管的手術(shù)。通過(guò)軟件控制恒流泵

有任何意義的聲音激活的關(guān)聯(lián)學(xué)習(xí)能力呢？為了探宄這個(gè)問(wèn)題，我們將一個(gè)聲音同??２０?ｕＬ的蔗糖水聯(lián)系起來(lái)，每天訓(xùn)練小鼠５０次，連續(xù)訓(xùn)練５天，分析比較中縫背核??多巴胺祌經(jīng)元對(duì)聲音和糖水反應(yīng)的變化（圖４）。從第一天鈣信號(hào)記錄的熱圖可以清??楚看到，一開(kāi)始的訓(xùn)練回合，聲音所對(duì)應(yīng)的位置（０－２?ｓ）熱圖的顏色為藍(lán)色，表示??中縫背核多巴胺神經(jīng)元對(duì)其完全沒(méi)有反應(yīng)，相對(duì)的，糖水對(duì)應(yīng)的位置（４－５?ｓ）則是??表明強(qiáng)烈激活的亮黃色。但是隨著訓(xùn)練回合的增多，聲音對(duì)應(yīng)的熱圖顏色逐漸由藍(lán)??轉(zhuǎn)黃。通過(guò)５只小鼠平均結(jié)果的Ｚｓｃｏｒｅ統(tǒng)計(jì)圖也可以看出，第一天訓(xùn)練結(jié)束后，小??鼠中縫背核多巴胺神經(jīng)元對(duì)聲音己經(jīng)有了一定的興奮反應(yīng)。??拋＿■■匾??２０?Ｉ?２０ｉ?２０｝?２０?｜?２０?Ｉ??１５?八?１５?１５?１５?１５??＿５２?０?２?４?６?５－２?０?２?４?６?＇＾２?０?２?４?６?＇５－２?０?２?４?６?＇５－２?０?２?４?６??Ｔｉｍｅ?（ｓ）?Ｔｉｍｅ?（ｓ）?Ｔｉｍｅ?（ｓ）?Ｔｔｆｎｅ（ｓ）?Ｔｖｎｅ（ｓ）??圖４連續(xù)５天蔗糖水訓(xùn)練的鈣信號(hào)變化。上側(cè)為一只小鼠鈣信號(hào)結(jié)果的熱圖示意圖，??下側(cè)為５只小鼠鈣信號(hào)反應(yīng)平均的Ｚｓｃｏｒｅ統(tǒng)計(jì)圖。??如果統(tǒng)計(jì)比較聲音對(duì)應(yīng)的０－２ｓ和起始對(duì)照－２－Ｏｓ時(shí)段Ｚ?ｓｃｏｒｅ統(tǒng)計(jì)圖的曲線(xiàn)下面??積，第一天聲音對(duì)應(yīng)的曲線(xiàn)下面積顯著性高于起始對(duì)照相對(duì)應(yīng)的值（圖５ｂ），說(shuō)明??經(jīng)過(guò)一天的學(xué)習(xí)

連續(xù)統(tǒng)計(jì)５天聲音對(duì)應(yīng)的Ｚ?ｓｃｏｒｅ統(tǒng)計(jì)圖的曲線(xiàn)下面積以及每一天鈣信號(hào)反應(yīng)在??聲音時(shí)段的最大值，我們可以看到不管是曲線(xiàn)下面積還是反應(yīng)峰值，中縫背核多巴??胺神經(jīng)元的反應(yīng)均呈現(xiàn)顯著的上升趨勢(shì)（圖６ａ），說(shuō)明這群神經(jīng)元具備一定的學(xué)習(xí)??能力。中縫背核多巴胺神經(jīng)元對(duì)蔗糖水的反應(yīng)的曲線(xiàn)下面積與峰值均有隨著天數(shù)增??加而降低的趨勢(shì)，但是并沒(méi)有達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)的顯著性（圖６ｂ）。??ａ?ｂ?ｃ?ｄ??Ｐ＝?０．０２７６?１５?Ｐ＝?０．０２１２?３〇．?Ｐ＝?０．２９９３?３〇?Ｐ＝?０．１３１７??｜?．?＞?９?？??〇，Ｃ＂?？?＋?Ｖ?？１０?？?？?２０－?＿５＿?？?？?“?？?２０－?？?？??｜〇．Ｔ?．?ＮＳ?．．荽于于?Ｔｌ１。，?？了?Ｔ?．ｆ?ｆ?奮?ｆ??＾?－５－—．?．?．?．?，—?Ｏ＇—？?ｉ?．?ｉ??—友?０＇?ｒ?，?．?ｉ—?０■—．?．?１?．?■—??１?２?３?４?５?１?２?３?４?５?１?２?３?４?５?１?２?３?４?５??Ｄａｉｌｙ?ｓｅｓｓｉｏｎ?Ｄａｉｌｙ?ｓｅｓｓｉｏｎ?Ｄａｉｌｙ?ｓｅｓｓｉｏｎ?Ｄａｉｌｙ?ｓｅｓｓｉｏｎ??圖６中縫背核多巴胺神經(jīng)元對(duì)蔗糖水訓(xùn)練的鈣信號(hào)反應(yīng)統(tǒng)計(jì)。（ａ）對(duì)暗示糖水的聲??音的鈣信號(hào)Ｚｓｃｏｒｅ統(tǒng)計(jì)圖的曲線(xiàn)下面積大小比較。（ｂ）對(duì)暗示糖水的聲音的鈣信號(hào)??峰值大小比較。（ｃ）對(duì)蔗糖水的鈣信號(hào)Ｚｓｃｏｒｅ統(tǒng)計(jì)圖的曲線(xiàn)下面積大小比較。（ｄ）??對(duì)蔗糖水的鈣信號(hào)峰值大小比較。實(shí)驗(yàn)小鼠只數(shù)為５只：使用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法為單因??素方差分析（ｏｎｅ－ｗａｙ?ＡＮ０ＶＡ）
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9 ;氧化石墨烯可調(diào)節(jié)多巴胺神經(jīng)元分化[J];分析測(cè)試學(xué)報(bào);2014年06期

10 尹蔚蘭;何劍琴;張愷芳;歐陽(yáng)新平;;硫化氫對(duì)帕金森病模型大鼠多巴胺神經(jīng)元的保護(hù)作用[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2011年01期

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7 薛偉寧;大鼠黑質(zhì)致密部多巴胺神經(jīng)元的膜共振現(xiàn)象及其機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

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9 高慧明;腦內(nèi)炎癥介導(dǎo)的帕金森�。翰∫蚝桶l(fā)病機(jī)制研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2003年

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5 張振濤;多巴胺神經(jīng)元毒素重啟細(xì)胞周期作用的研究[D];華中科技大學(xué);2007年

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本文編號(hào)：2885763