HIV-1BED-CEIA在強(qiáng)戒吸毒人員中應(yīng)用的流行病學(xué)研究
【學(xué)位單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2008
【中圖分類】:R446.6;R749.64
【部分圖文】:
圖 1 HIV-1 感染后抗體特性變化圖血清陽(yáng)轉(zhuǎn)后新近感染者是能夠測(cè)得到 HIV-1 抗體的產(chǎn)生,但是新近感染者的陽(yáng)轉(zhuǎn)血清抗體反應(yīng)在抗體滴度、所占比例、特異性、類別以及親和力等方面都與長(zhǎng)期感染所產(chǎn)生的 HIV-1 抗體不同,這就是實(shí)驗(yàn)室方法獲得 HIV 發(fā)病率依據(jù)。目前我們所采用的方法主要三種方法:第一種 Vironostika-LS EIA(也就是通常所說(shuō)的用于檢測(cè)新近 HIV 血清陽(yáng)轉(zhuǎn)的血清學(xué)規(guī)程 Serologic Testing Algorithm for RecentHIV Seroconversion,STARHS),是以新近感染和長(zhǎng)期感染所產(chǎn)生的 HIV 抗體滴度不同為基礎(chǔ)建立起來(lái)的。這種試驗(yàn)方法在美國(guó)得到了成功的應(yīng)用[15]。然而該方法是以HIV-1 B 亞型為檢測(cè)對(duì)象,因而它僅對(duì) B 亞型的 HIV-1 感染人群較為適用,該實(shí)驗(yàn)方法采用 ELISA 方法,在實(shí)驗(yàn)中要把樣品稀釋度從 1:76 提高到 1:20,000,但溫育時(shí)間從 100 分鐘縮短為 30 分鐘,操作過(guò)程中,由于需要稀釋很大的倍數(shù)(1/20000),在移液過(guò)程中,一個(gè)極細(xì)小的差錯(cuò)就會(huì)導(dǎo)致極大的稀釋錯(cuò)誤,孵育的時(shí)間和溫度也要極其準(zhǔn)確,操作繁瑣,結(jié)果的變異性很大,并且需要配備專用的設(shè)備。第二種則是 HIV-1 感染者血清陽(yáng)轉(zhuǎn)后抗體親和力會(huì)逐漸增加,新近感染時(shí)抗體
3.1.1.1 標(biāo)本來(lái)源 同上,且按照 BED-CEIA 新近感染檢測(cè)樣品的納入及排除標(biāo)準(zhǔn)操作[30]。3.1.1.2 主要試劑 美國(guó) Calypte 公司 HIV-1 BED Incidence CEIA 新近感染檢測(cè)試3.1.1.3 主要儀器 美國(guó) Bio-Rad 恒溫孵箱(37℃及 25℃);Labsystems、Gilson 加器(5~20μl, 50~300μl、1~20μl);3.1.1.4 主要生物軟件 美國(guó) Calypte 公司提供 HIV-1 BED Incidence CEIA 實(shí)驗(yàn)件;美國(guó)疾病預(yù)防控制中心(CDC)提供數(shù)據(jù)處理軟件3.1.1.5 樣品采集和處理 同上3.1.2 HIV-1 陽(yáng)性樣品的 BED-EIA 檢測(cè)原理[16]:傳統(tǒng)的 HIV-1 診斷學(xué)方法是應(yīng)用 EIA 初篩陽(yáng)性后通過(guò) WB 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn),但是不能識(shí)別出的血清陽(yáng)轉(zhuǎn)人群包括新近感染與長(zhǎng)期感染兩種人群。美國(guó) CDC 研發(fā)BED-CEIA 實(shí)驗(yàn)利用血清陽(yáng)轉(zhuǎn)后 HIV-IgG 占總 IgG 的比例在感染早期隨時(shí)間增長(zhǎng)升高的特性,檢測(cè)已確認(rèn)為血清陽(yáng)性的樣品,來(lái)判斷該血清陽(yáng)性樣品是否為新近染。檢測(cè)流程和原理如下圖 2 所示,通過(guò)對(duì) EIA 和 WB 實(shí)驗(yàn)確認(rèn)為 HIV-1 陽(yáng)性的樣品包括新近感染與長(zhǎng)期感染兩種人群,經(jīng)過(guò) BED-CEIA 實(shí)驗(yàn)判別出新近感染人群。
HIV病毒感染后血液中抗原、抗體(IgG與IgM)、RNA或P24變化
【參考文獻(xiàn)】
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