阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease, AD),是老年人中最常見(jiàn)的神經(jīng)退行性疾病,多發(fā)于65歲及以上的老年人。其臨床特點(diǎn)為隱襲起病,逐漸出現(xiàn)記憶力減退、認(rèn)知功能障礙、行為異常和社會(huì)障礙。隨著我國(guó)人口老齡化的日益嚴(yán)重,老年性癡呆越來(lái)越成為一個(gè)嚴(yán)重的社會(huì)問(wèn)題。據(jù)統(tǒng)計(jì),目前我國(guó)已有1.29億人口超過(guò)60歲,老年人占總?cè)丝诘谋壤堰_(dá)到10.15 %,從而使我國(guó)提前成為老年型人口的國(guó)家。值得注意的是,老年性癡呆患病率約占60歲人口的10%左右,其中阿爾茨海默病(AD)占5%左右,在我國(guó)估計(jì)已有約645萬(wàn)病人。而且年齡每增加5歲,AD的患病率將增加兩倍,在80-85歲的病人中有20%的老年人患有老年癡呆。是繼心臟病、腫瘤和腦卒中之后的第四位死因,給患者家庭、社會(huì)造成了很大的負(fù)擔(dān)及壓力。因此,AD研究已成為當(dāng)今神經(jīng)科學(xué)的一個(gè)迫切課題。 AD的主要病理特征改變有以下三個(gè)方面(1)老年斑(Senile Plaque, SP)的形成,主要是細(xì)胞外Aβ蛋白的沉積所制。(2)胞內(nèi)神經(jīng)纖維纏結(jié)(Neurofibrilary tangles,NFT)的形成,多與Tau蛋白的異常磷酸化有關(guān)。(3)神經(jīng)元的凋亡及丟失,以基底前腦膽堿能神經(jīng)元的丟失最為嚴(yán)重,同時(shí)伴有γ-氨基丁酸(GABA)能、去甲腎上腺素能和5-羥色胺能(5-HT)能神經(jīng)元丟失。 AD的動(dòng)物模型作為AD病因、發(fā)病機(jī)制及治療研究的基礎(chǔ),一直以來(lái)都缺乏理想的動(dòng)物模型。目前常用的AD模型構(gòu)建方法有以下幾種:1:外力損傷模型,如海馬穹窿傘切割模型2:Aβ淀粉樣蛋白片段腦內(nèi)注射模型3:興奮性藥物損傷基底前腦膽堿能神經(jīng)元的模型4:復(fù)合動(dòng)物模型5:轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型。各種動(dòng)物模型都能在一定程度上模擬AD的行為學(xué)的損害及部分病理特征,但是仍然沒(méi)有一種動(dòng)物模型能夠較全面的模擬AD的所有病理特征,嚴(yán)重阻礙了AD研究的進(jìn)展。本實(shí)驗(yàn)主要研究神經(jīng)免疫毒素192-IgG-saporin及Aβ(1-40)片段致阿爾茨海默病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的構(gòu)建。 實(shí)驗(yàn)部分 1材料與方法 SD雄性大鼠32只,重250-300g,隨機(jī)分成4組,每組8只,分別為:正常組、Aβ(1-40)組(Aβ組)、神經(jīng)免疫毒素192-IgG-saporin組(192組)、神經(jīng)免疫毒素192-IgG-saporin及Aβ1-40聯(lián)合組(聯(lián)合組)。Aβ組單側(cè)海馬內(nèi)注射Aβ(1-40)片段10μl(1μg/μl),192-IgG-saporin組單側(cè)側(cè)腦室注射192-IgG-saporin 5μl(2.5μg/μl)。聯(lián)合組為單側(cè)腦室以及海馬內(nèi)分別注射192-IgG-saporin 5μl(2.5μg/μl)和Aβ1-40 10μ(l1μg/μl),坐標(biāo)分別為,側(cè)腦室:前囟后0.8 mm,左側(cè)旁開(kāi)1.5 mm,進(jìn)針深5.5 mm。海馬:前囟后3.4 mm,左側(cè)旁開(kāi)2.5 mm,進(jìn)針深4.5 mm。2周后行Y迷宮以測(cè)試,測(cè)試結(jié)束后經(jīng)灌注,固定,去腦,蔗糖脫水,冰凍切片�；浊澳X切片行ChAT免疫組化染色,對(duì)內(nèi)側(cè)隔核(MS),斜角帶垂直支(VDB)的ChAT陽(yáng)性神經(jīng)元進(jìn)行計(jì)數(shù),海馬切片行膽堿能纖維(AChE)、星型膠質(zhì)細(xì)胞(GFAP)免疫組化染色、尼氏染色、剛果紅染色及硫磺素T熒光染色,對(duì)海馬AChE陽(yáng)性纖維、錐體細(xì)胞和GFAP陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)。數(shù)據(jù)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 2結(jié)果 Y迷宮測(cè)試大鼠學(xué)習(xí)記憶能力,結(jié)果顯示各損傷組學(xué)習(xí)記憶能力與正常組比較均有下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各損傷組之間無(wú)明顯變化,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。剛果紅以及硫磺素T染色結(jié)果表明,Aβ(1-40)組及聯(lián)合組海馬區(qū)內(nèi)有聚集的Aβ沉積.且能造成海馬區(qū)明顯的錐體細(xì)胞丟失,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),192-IgG-saporin組海馬區(qū)錐體細(xì)胞無(wú)明顯變化(P0.05)。Aβ1-40組及聯(lián)合組海馬區(qū)星型膠質(zhì)細(xì)胞增生(P0.05),192-IgG-saporin組未見(jiàn)明顯增生(P0.05). 192-IgG-saporin組以及聯(lián)合組膽堿能纖維數(shù)量明顯減少(P0.01),Aβ1-40組膽堿能纖維數(shù)量未見(jiàn)明顯變化(P0.05)。192-IgG-saporin組及聯(lián)合組基底前腦ChAT陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯減少(P=0.01),Aβ組基底前腦ChAT陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)未見(jiàn)明顯變化(P0.05). 3小結(jié) Aβ以及神經(jīng)免疫毒素聯(lián)合作用動(dòng)物模型,學(xué)習(xí)記憶能力明顯下降.基底前腦膽堿能神經(jīng)元數(shù)量顯著減少。海馬區(qū)椎體細(xì)胞數(shù)目減少,星形膠質(zhì)細(xì)胞增生,膽堿能神經(jīng)纖維數(shù)量明顯減少。 總之:Aβ(1-40)和神經(jīng)免疫毒素的聯(lián)合作用比單獨(dú)作用能更加全面的模擬AD病理特征,是比較理想的AD動(dòng)物模型。
【學(xué)位單位】：廣州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2010
【中圖分類】：R749.16
【文章目錄】：
中英文對(duì)照表
中文摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附圖
學(xué)習(xí)期間論文發(fā)表情況
致謝

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相關(guān)期刊論文 前7條

1 潘學(xué)兵;龍大宏;羅秀梅;楊丹迪;涂臘根;宣愛(ài)國(guó);;神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)192-IgG-saporin老年性癡呆模型鼠的學(xué)習(xí)記憶及海馬膽堿能纖維的影響[J];解剖學(xué)研究;2007年04期

2 宣愛(ài)國(guó);龍大宏;楊丹迪;曾凡表;;神經(jīng)干細(xì)胞和腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子聯(lián)用對(duì)癡呆模型鼠基底前腦p75表達(dá)及其學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J];解剖學(xué)雜志;2007年01期

3 董洪濤,房繄恭;多因素AD動(dòng)物模型的建立及針刺對(duì)其學(xué)習(xí)記憶功能的影響[J];上海中醫(yī)藥雜志;2002年05期

4 郭德玉;葉翠飛;王鉅;李林;敖平;李斌;;基底前腦膽堿能神經(jīng)元損毀:一種老年性癡呆方法學(xué)動(dòng)物模型的復(fù)制及應(yīng)用要點(diǎn)[J];實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理;2006年04期

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本文編號(hào)：2869245