背景與目的: 哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central neural system,CNS)受損后的修復(fù)是有限的,受損的神經(jīng)元幾乎不能再生。目前,越來(lái)越多的研究將精力集中在細(xì)胞移植治療腦和脊髓病變方面。胚胎干細(xì)胞移植是治療CNS疾病最有希望的手段之一,但其廣泛應(yīng)用受到組織來(lái)源、免疫排斥及倫理學(xué)等諸方面的限制。骨髓干細(xì)胞在體外經(jīng)過(guò)一定條件培養(yǎng)可以表達(dá)nestin抗原并可以分化為神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞。骨髓干細(xì)胞已經(jīng)在CNS疾病如腦缺血及外傷等治療方面得到了應(yīng)用。將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)移植到受損動(dòng)物的CNS可以生長(zhǎng)成為神經(jīng)元。與骨髓及外周血相比,臍血具有免疫原性弱、淋巴細(xì)胞不成熟、來(lái)源豐富、易于采集及保存、無(wú)腫瘤細(xì)胞污染等優(yōu)點(diǎn)。臍血較骨髓含有更多的干細(xì)胞,而且這些干細(xì)胞更原始,提示臍血源性干細(xì)胞比骨髓源性干細(xì)胞更有治療應(yīng)用價(jià)值。目前也有報(bào)道將人臍血細(xì)胞(human umbilical cord blood cells,HUCBCs)移植到CNS受損(如腦缺血或脊髓損傷)的動(dòng)物模型中,從組織學(xué)及行為學(xué)改善方面證實(shí)了其有效性。血管性癡呆(vascular dementia,VaD)是指由于腦血管疾病引起的腦組織梗塞、低灌注或出血所致的認(rèn)知功能損害綜合征。目前,VaD成為老年期癡呆的第二大病因,僅次于阿爾茨海默病(Alzheimer disease,AD)。隨著人口老齡化和腦血管疾病發(fā)病率的上升,VaD的發(fā)病率也逐年上升。但對(duì)于VaD尚無(wú)特效治療方法。為此,本實(shí)驗(yàn)擬初步觀察HUCBCs靜脈輸注對(duì)VaD大鼠行為和認(rèn)知功能的改善以及對(duì)腦組織保護(hù)及修復(fù)方面的作用。 方法: 1.臍血的采集和分離 選取健康無(wú)感染性疾病產(chǎn)婦,正常分娩的健康嬰兒做為臍血采集對(duì)象。采取健康成人外周血作為對(duì)照組。臍血與外周血均采集10份。以淋巴細(xì)胞密度梯度分離法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分離。 2.細(xì)胞鑒定 采集臍血,分離HUCBCs,對(duì)其進(jìn)行nestin陽(yáng)性細(xì)胞鑒定。以成人外周血細(xì)胞(Human peripheral blood cells,HUPBCs)作為對(duì)照組。以免疫細(xì)胞化學(xué)的方法對(duì)HUCBCs中nestin陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行定性檢測(cè)。采用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)臍血細(xì)胞中
【學(xué)位單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2005
【中圖分類(lèi)】：R749.16
【部分圖文】：

免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)，HUCBCs組可見(jiàn)nestin陽(yáng)性染色細(xì)胞(見(jiàn)照片5)，H陽(yáng)性染色細(xì)胞。流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示人臍血nestin陽(yáng)性細(xì)胞占HUCBCs%士0.66%，HUPBCs未檢測(cè)出陽(yáng)性細(xì)胞。流式細(xì)胞儀(Multieyele軟件)對(duì)析顯示HUCBCs處于S期(分裂期)的細(xì)胞數(shù)明顯高于HUPBCs;而HGoll期(靜止期)的細(xì)胞明顯少于HUPBCs，兩組數(shù)據(jù)均有顯著差異(P<.BCs處于GZ艦期的細(xì)胞高于HUPBCs，但無(wú)顯著差異(尸>0.05)。表1臍血、外周血各期細(xì)胞比率n(二10)(%)Table1TheratioofHUCBCs’andHUPBCs’eelleyele(n=10)(%)G110HUCBCS0士33士3HUPBCs94.8士2.33.8士1.71.3士1.2*p<0.01，ComParedwithHUPBCs

CF的陰性對(duì)照FigZ:FCMnaalysesofHUCBCs:negativeeonrto圖3:FCM檢測(cè)HUCBCs中nestin細(xì)胞含量的陽(yáng)性結(jié)果:nestin陽(yáng)性細(xì)胞占4.8%Fig3:FCMnaaylsesofHUCBCs:TheeellsePxersswasabout4.8%.圖4:FCM檢測(cè)的HUPBCs的細(xì)胞周期:圖5:FcM檢測(cè)的HUCBCs的細(xì)胞周期:

CF的陰性對(duì)照FigZ:FCMnaalysesofHUCBCs:negativeeonrto圖3:FCM檢測(cè)HUCBCs中nestin細(xì)胞含量的陽(yáng)性結(jié)果:nestin陽(yáng)性細(xì)胞占4.8%Fig3:FCMnaaylsesofHUCBCs:TheeellsePxersswasabout4.8%.圖4:FCM檢測(cè)的HUPBCs的細(xì)胞周期:圖5:FcM檢測(cè)的HUCBCs的細(xì)胞周期:
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本文編號(hào)：2862782