研究目的 1、探討杏仁體注射Aβ25-35對大鼠學(xué)習(xí)記憶功能、腦皮質(zhì)和海馬tau蛋白異常磷酸化(Pser404-tau)、膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)和乙酰膽堿酯酶(AchE)的影響。 2、在阿爾茨海默病(AD)模型的基礎(chǔ)上進行2-VO手術(shù),探討腦缺血對AD的影響。 3、觀察2-VO術(shù)后大鼠腦中Pser404-tau、ChAT和AchE的變化,探討腦缺血是否可以引起類AD樣改變。 4、通過葛根素(Pue)對腦缺血大鼠和AD大鼠的干預(yù)研究,探討Pue治療AD的機理。 研究方法 1、模型的制作:AD模型的制作:SD大鼠以0.4%戊巴比妥鈉麻醉,于腦立體定位儀下定位右側(cè)杏仁體,用微量注射器緩慢勻速注入Aβ25-35 (5.0nmol/3μl);腦缺血(CI)模型的制作:SD大鼠麻醉后,分離雙側(cè)頸總動脈,永久結(jié)扎左側(cè),右側(cè)夾閉60min后放開;AD+CI模型的制作:立體定位術(shù)后14天,將AD大鼠行腦缺血處理,方法同CI組。 2、Pue治療組于立體定位術(shù)后14天/缺血手術(shù)后腹腔注射給藥,劑量為80mg/kg/d,共7天。 3、分別在實驗前、立體定位術(shù)后14天、21天進行Y-迷宮試驗,檢測大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。 4、立體定位術(shù)后21天(即缺血術(shù)后7天)處死所有大鼠,應(yīng)用免疫組化方法測定各組大鼠皮質(zhì)和海馬Pser404-tau、ChAT陽性細胞數(shù)的表達;應(yīng)用比色法檢測各組大鼠雙側(cè)海馬AchE蛋白含量及活性的變化。 研究結(jié)果 1、Aβ25-35、腦缺血對SD大鼠的影響:Aβ25-35單側(cè)杏仁體一次性注射可導(dǎo)致大鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙;AD模型大鼠皮質(zhì)、海馬的Pser404-tau陽性細胞數(shù)顯著增高(P0.01),ChAT活性明顯降低(P0.01);AD模型大鼠右側(cè)海馬AchE蛋白含量、活性明顯降低(P0.05),左側(cè)海馬AchE蛋白含量及活性均無明顯變化(P0.05)。CI組大鼠皮質(zhì)、海馬Pser404-tau陽性細胞數(shù)增高而ChAT活性降低(P值均小于0.05),雙側(cè)海馬AchE蛋白含量和活性均降低(P0.05),且右側(cè)海馬AchE的變化較左側(cè)更為顯著。 2、腦缺血對AD的影響:相對于AD模型組,AD+CI組大鼠的記憶功能進一步下降,皮質(zhì)和海馬Pser404-tau陽性細胞數(shù)上升,ChAT活性下降(P0.05),右側(cè)海馬AchE蛋白含量降低,AchE活性也下降(P0.05)。 3、Pue可顯著改善AD、缺血大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能(P0.05);相對于AD/CI模型組,Pue治療組Pser404-tau的陽性細胞數(shù)顯著降低,而ChAT表達明顯升高(P0.05);右側(cè)海馬AchE含量及活性升高(P0.05)。 研究結(jié)論 1、杏仁體注射Aβ25-35產(chǎn)生的神經(jīng)毒性作用可導(dǎo)致腦內(nèi)Ser404位點的tau蛋白異常磷酸化和膽堿能系統(tǒng)功能損害。 2、腦缺血可加重AD病變。 3、腦缺血可導(dǎo)致AD病變。 4、Pue能夠改善AD的病理反應(yīng),緩解AD大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙,其機制可能與Pue對抗β-淀粉樣肽(Aβ)的神經(jīng)毒性,擴張腦血管、改善微循環(huán)從而抑制tau蛋白異常磷酸化,提高中樞膽堿能系統(tǒng)功能有關(guān)。
【學(xué)位單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2005
【中圖分類】：R749.16
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮略詞
前言
文獻綜述
    一、阿爾茨海默病概述
        1、Aβ 與阿爾茨海默病
        2、tau 蛋白與阿爾茨海默病
    二、阿爾茨海默病與缺血性腦血管病
        1、 Aβ與缺血性腦血管病
        2、 tau 蛋白與缺血性腦血管病
        3、 能量代謝與缺血性腦血管病
        4、膽堿能系統(tǒng)與缺血性腦血管病
    三、阿爾茨海默病的防治
ser404-tau、ChAT、AchE 的變化'>第一部分 AD 大鼠腦缺血后 P_ser404-tau、ChAT、AchE 的變化
    1、材料與方法
        1.1 主要試劑與儀器
        1.2 動物來源及分組
        1.3 動物模型的制備
        1.4 行為學(xué)檢測
        1.5 腦組織形態(tài)學(xué)檢測
        1.6 指標的檢測
    2、結(jié)果
        2.1 動物大體觀察
        2.2 行為學(xué)測試結(jié)果
        2.3 腦組織形態(tài)學(xué)變化
ser404-tau 和ChAT 免疫組化的變化'>        2.4 腦組織P_ser404-tau 和ChAT 免疫組化的變化
        2.5 AchE 活性及蛋白含量的變化
第二部分 葛根素對腦缺血和 AD 大鼠腦保護機制的實驗研究
    1、材料與方法
        1.1 主要試劑與儀器
        1.2 動物來源及分組
        1.3 動物模型的制備
        1.4 行為學(xué)檢測
        1.5 腦組織形態(tài)學(xué)檢測
        1.6 指標的檢測
    2、結(jié)果
        2.1 動物大體觀察
        2.2 行為學(xué)測試結(jié)果
        2.3 腦組織形態(tài)學(xué)變化
ser404-tau 和ChAT 免疫組化的變化'>        2.4 腦組織P_ser404-tau 和ChAT 免疫組化的變化
        2.5 AchE 活性及蛋白含量的變化
第三部分 討論
    1、動物模型的建立
    2、A β與磷酸化tau 蛋白
    3、A β與膽堿能系統(tǒng)
    4、AD 與缺血性腦血管疾病
    5、Pue 對AD 大鼠保護機制的研究
結(jié)論
致謝
參考文獻
附圖
作者簡介

【參考文獻】

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2 傅喆暾,黃寶康,鄭漢臣,張巧艷;補腎中藥防治老年癡呆癥研究進展[J];時珍國醫(yī)國藥;2003年01期

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本文編號：2856509