1目的： 從神經(jīng)元凋亡角度探討嗎啡依賴的可能機(jī)理,研究Glu-Con-G、Glu-Con-G[1-13]對(duì)嗎啡軀體依賴的干預(yù)作用及可能機(jī)制。 2方法： 采用條件性位置偏愛(conditioned place preference,CPP)和軀體依賴模型,利用透射電子顯微鏡、免疫印跡法檢測(cè)成癮小鼠紋狀體腦區(qū)神經(jīng)元的凋亡情況及相關(guān)蛋白含量變化。 3結(jié)果： 1.嗎啡誘導(dǎo)小鼠CPP建立和復(fù)燃階段紋狀體腦區(qū)神經(jīng)元核固縮變形,染色質(zhì)邊集,CPP消退階段神經(jīng)元未出現(xiàn)顯著異常,但有異常溶酶體出現(xiàn)。 2.嗎啡誘導(dǎo)小鼠CPP建立、消退和復(fù)燃階段紋狀體腦區(qū)神經(jīng)元樹突、軸突數(shù)量明顯增多、密集。 3.嗎啡誘導(dǎo)小鼠CPP建立、消退和復(fù)燃階段Procaspase3蛋白含量在Hp、PFC腦區(qū)無(wú)明顯變化,但在紋狀體腦區(qū)于CPP建立和復(fù)燃階段含量減少。 4.150、300、600pmol Glu-Con-G和Glu-Con-G[1-13]呈劑量-效應(yīng)依賴性方式抑制嗎啡成癮小鼠戒斷跳躍,150、300、600pmol Glu-Con-G和300、600 pmol Glu-Con-G[1-13]還能抑制小鼠體重減輕癥狀。 5.150、300、600pmolGlu-Con-G和Glu-Con-G[1-13]均能顯著上調(diào)嗎啡成癮小鼠紋狀體腦區(qū)Procaspase3蛋白含量。 4結(jié)論： 1.多次嗎啡處理,可導(dǎo)致小鼠紋狀體腦區(qū)在CPP建立、復(fù)燃階段出現(xiàn)異常凋亡,CPP消退階段未見顯著凋亡但有異常溶酶體出現(xiàn)。 2.長(zhǎng)期嗎啡處理上調(diào)紋狀體腦區(qū)神經(jīng)元突觸數(shù)量,樹突、軸突密集,下調(diào)Procaspase3蛋白含量。 3. Glu-Con-G和Glu-Con-G[1-13]能干預(yù)嗎啡所致小鼠軀體依賴,并能上調(diào)紋狀體腦區(qū)Procaspase3蛋白含量,且呈劑量相關(guān)性。
【學(xué)位單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2011
【中圖分類】：R749.6
【部分圖文】：

1.3主要實(shí)驗(yàn)裝置及儀器1.3.1視頻跟蹤一計(jì)算機(jī)自動(dòng)分析的條件位置偏愛實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的構(gòu)建系統(tǒng)硬件組成:主要由鋁扣板隔音箱(規(guī)格:160x110x11ocm)、小鼠活動(dòng)盒、攝像系統(tǒng)和專用計(jì)算機(jī)組成。隔音箱頂部裝有排風(fēng)扇(新風(fēng)系統(tǒng))，背景噪音<30dB;發(fā)光二極管(LED)照明設(shè)備，亮度調(diào)至活動(dòng)盒底部平均照度<20Lux;正中為攝像頭，通過(guò)視頻線連接到一個(gè)裝有視頻采集卡的計(jì)算機(jī)，能同步觀察小鼠的活動(dòng)情況，并攝像保存。對(duì)位于攝像頭正下方的小鼠CPP活動(dòng)盒在Becker等人的基礎(chǔ)上做了一定的改進(jìn)【”]，是由4個(gè)相同的長(zhǎng)方形Pvc材料穿梭盒(30火15、15cm)組成的正方形盒子(45x45x45cm)。每一穿梭盒中間有一可活動(dòng)的隔板(訓(xùn)練階段為封閉型，測(cè)試階段為通道型)，將穿梭盒分隔為兩個(gè)大小相同的正方形盒子(巧、巧、巧cm)，其中一個(gè)盒子四周均為白色，底面光滑;另一個(gè)四周均為黑色，底面鏤刻成網(wǎng)格(o‘5x0.5cm)。

宙睡g只冷卜”.寧一一能 111圖2.Ra燈 MieeTrac址ng軟件的分析界面 Figure2.TheinterfaeeofRat/MieeTraekingsoftware視頻圖像分析主要原理:錄像前用飽和苦味酸溶液將小鼠涂成黃色，以區(qū)別其所在活動(dòng)盒的背景色(黑色和白色)， Rat/MiceTracking軟件即可對(duì)小鼠進(jìn)行實(shí)時(shí)跟蹤分析。打開背景灰度均勻并且和小鼠有較大對(duì)比度的視頻文件后，區(qū)域新建時(shí)沿活動(dòng)隔板上緣將區(qū)域分成兩小區(qū)。兩小區(qū)再分別劃定為中心和周邊兩部分區(qū)域，中心圓形區(qū)域面積大小為小區(qū)面積的1/4。在跟蹤小鼠運(yùn)動(dòng)軌跡時(shí)，根據(jù)設(shè)置好的灰度范圍，計(jì)算出各個(gè)區(qū)域(活動(dòng)區(qū)室)在此灰度范圍內(nèi)的點(diǎn)(可以是多個(gè))，選擇面積最大的點(diǎn)并取重心即為小鼠在此幀圖像的軌跡點(diǎn)。定位判斷每幀圖像中小鼠軌跡點(diǎn)所在小區(qū)。先后相鄰軌跡點(diǎn)在兩個(gè)小區(qū)

圖3.分別在兩個(gè)小區(qū)的先后相鄰A、B兩點(diǎn)示Figure3.SehematiediagramofadjaeentAandBPointsloeat1.3.2其他儀器DS一PAGE電泳轉(zhuǎn)膜裝置標(biāo)儀(ELX一800)BIO一量移液器E織勻漿機(jī)Bi速低溫離心機(jī)(eent八允ge5804R)E速離心機(jī)(eenth允ge5415n)E低溫冰箱(PremiumU410)H計(jì)(nELI，A32o)Mett功能漩渦振蕩器Gen泰凱弗隆超純水儀上

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 閆玉仙;呼文亮;叢斌;馬春玲;倪志宇;牛增強(qiáng);余磊;;大鼠海馬神經(jīng)元中μ阿片受體、CCK受體的表達(dá)及慢性嗎啡作用對(duì)其表達(dá)的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年13期

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本文編號(hào)：2827105