目的:抑郁癥作為一種使人衰弱的疾病,同時(shí)擁有高發(fā)病率、與神經(jīng)疾病高共病率的特點(diǎn),愈發(fā)突出地影響著人們的生活質(zhì)量。針對(duì)抑郁癥發(fā)病機(jī)制的研究日益增多,但其在病理生理上的表現(xiàn)仍難以被清晰的把握與總結(jié)。方法:在慢性不可預(yù)知性溫和刺激(CUMS)模型中,我們利用高效液相色譜結(jié)合紫外檢測(cè)的靶向代謝組學(xué)方法來(lái)鑒定小腸中氨基酸的變化。其后對(duì)存在顯著性差異的氨基酸與行為表型之間的相關(guān)性運(yùn)用皮爾森相關(guān)分析來(lái)研究。腸道氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)功能采用免疫印跡法驗(yàn)證。此外,我們整合了前期研究結(jié)果,整合分析了CUMS大鼠模型中海馬組織、小腦組織、外周血單核細(xì)胞、尿液中的相關(guān)差異氨基酸來(lái)進(jìn)一步了解抑郁癥中全身的氨基酸代謝變化。結(jié)果:對(duì)比CUMS組和對(duì)照組的結(jié)果后提示,在CUMS組大鼠小腸中檢測(cè)到了降低的谷氨酰胺和甘氨酸濃度和增加的天冬氨酸濃度。這些變化與抑郁樣行為顯著相關(guān)。免疫印跡法揭示了氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ASCT2和B~0AT1在CUMS組中呈現(xiàn)出降低的表達(dá)水平,而LAT1表達(dá)上調(diào)。甘氨酸和谷氨酰胺在小腸內(nèi)吸收轉(zhuǎn)運(yùn)失調(diào)很可能導(dǎo)致其在全身及中樞中的缺少。結(jié)論:本次研究結(jié)果表明,甘氨酸和谷氨酰胺攝取系統(tǒng)可能成為抑郁癥的潛在治療靶點(diǎn),綜合分析結(jié)果可為深入了解腸-腦軸下的細(xì)胞和分子機(jī)制提供新的見(jiàn)解,對(duì)闡釋圍繞在抑郁癥發(fā)病過(guò)程中的外周和中樞系統(tǒng)的病理生理變化帶來(lái)突破。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R749.4
【部分圖文】：

圖 1（A）CUMS 造模時(shí)間流程圖（b）CUMS 造模每周刺激方案Fig. 1. (A) Flow chart of CUMS procedure. (B) Weekly schedule of the CUMS regimen.1.5 行為學(xué)評(píng)估1.5.1 SPT 和體重SPT 在 CUMS 刺激前和刺激后分別進(jìn)行。在第一次進(jìn)行 SPT 之前，給予大鼠1%蔗糖溶液適應(yīng) 48 小時(shí)。試驗(yàn)當(dāng)天，將水和食物從籠中移出 6 小時(shí)，然后向大鼠提供預(yù)先稱重好的 1%蔗糖和清水各 1 瓶，1 小時(shí)后，通過(guò)稱量?jī)蓚�(gè)瓶子的重量計(jì)算出所有液體的消耗量，蔗糖偏好定義為（蔗糖消耗量/總消耗量）×100%。在 CUMS刺激前和整個(gè) CUMS 刺激期間每周測(cè)定大鼠體重。1.5.2 曠場(chǎng)試驗(yàn)（OFT）和 強(qiáng)迫游泳（FST）進(jìn)行 OFT 的房間要求安靜、隔音。OFT 開(kāi)始時(shí)，大鼠被放置于開(kāi)放的曠場(chǎng)箱

圖 2 CUMS 誘導(dǎo)的抑郁樣行為Fig. 2. CUMS-induced depressive-like behaviors（A）基線期和 CUMS 造模中連續(xù) 4 周的的體重（B）基線期和 CUMS 造模后的蔗糖偏好（C）FST 中的不動(dòng)時(shí)間（D-G）OFT 中的總活動(dòng)距離、中心區(qū)域活動(dòng)距離、中心區(qū)域活動(dòng)度和站立次數(shù)*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。NS，無(wú)顯著性差異；對(duì)照組（n=20）；CUMS組（n=20）(A) Body weight at baseline and during the consecutive 4-week course of the CUMS protocol.(B) Sucrose preference at baseline and after the CUMS procedure. (C) Immobility time in FST.(D G) Total distance, central distance, central activity, and number of rearings in OFT. *p < 0.05,**p < 0.01, ***p < 0.001. NS, not significant. CON (n = 20); CUMS (n = 20)2.2 小腸 20 種氨基酸中 Asp, Gln, Gly 的濃度顯著改變先前的研究對(duì)方法學(xué)驗(yàn)證指標(biāo)進(jìn)行了證實(shí)，該 HPLC 檢測(cè)方法具有良好的線性、準(zhǔn)確度、重復(fù)性和穩(wěn)定性[35, 39]，CON 和 CUMS 組的色譜圖和標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖 3

圖 3（A）CON 大鼠，（B）CUMS 大鼠和（C）標(biāo)準(zhǔn)曲線（250 nmol/l）的色譜圖峰值Fig. 3. Chromatogram of(A) control rats ,(B) CUMS rats and (C) Standard curve (250 nmol/L)peaks(1) 天冬氨酸, (2) 谷氨酸, (3) DABS-CL, (4) 天冬酰胺, (5) 谷氨酰胺, (6) 絲氨酸, (7) 酸, (8) 甘氨酸, (9) 精氨酸, (10) 丙氨酸, (11) 脯氨酸, (12) 纈氨酸, (13) 蛋氨酸, (14) 異酸, (15) 亮氨酸, (16) 正亮氨酸, (17) 苯丙氨酸, (18) 氨, (19) 賴氨酸, (20) 組氨酸, (21) 酸.(1) aspartic acid, (2) glutamic acid, (3) DABS-CL, (4) asparagine, (5) glutamine, (6) serine,hreonine, (8) glycine, (9) arginine, (10) alanine, (11) proline, (12) valine, (13) methionine, (1soleucine, (15) leucine, (16) NorLeu, (17) phenylalanine, (18) ammonia, (19) lysine, (20) histidi21) tyrosine.計(jì)算氨基酸與相應(yīng)的內(nèi)標(biāo)物的峰面積的比值確定每個(gè)氨基酸的濃度，涉及腸中 20 種氨基酸的濃度的詳細(xì)信息，參考表 2。

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1 宋歌;呂月濤;狄林林;宗文納;陳伯旺;;早期腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)對(duì)重癥肺炎大鼠免疫功能的影響分析[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版);2017年01期

2 葉敏;陳達(dá)柔;陳宇中;杜少冰;杜展鑫;李玉鳳;唐s鉈

本文編號(hào)：2825270