本研究驗證經(jīng)鼻—腦通路給予神經(jīng)保護肽(NAP)對實驗性癡呆大鼠的神經(jīng)保護作用,為老年性癡呆治療提供新的途徑;進而應用蛋白質組學技術研究NAP對實驗性癡呆大鼠海馬蛋白質表達的影響,篩選出NAP對實驗性癡呆大鼠具有神經(jīng)保護作用的差異蛋白,為闡明NAP對實驗性癡呆大鼠治療作用的機制提供理論依據(jù)。本研究主要經(jīng)鼻-腦通路給予神經(jīng)保護肽(NAP)驗證對實驗性癡呆大鼠的神經(jīng)保護作用。將凝聚態(tài)的Aβ1-40聯(lián)合應用轉移生長因子β1(TGFβ1)注入實驗大鼠左側海馬區(qū)制備實驗性癡呆動物模型:通過Morris水迷宮定位航行實驗檢測大鼠記憶能力;通過HE染色觀察各組大鼠海馬區(qū)的形態(tài)學改變;通過原位雜交的方法檢測實驗各組大鼠海馬區(qū)NF-κBmRNA,caspase3mRNA表達的變化。應用蛋白組學方法篩選出NAP對實驗性癡呆大鼠具有神經(jīng)保護作用的差異蛋白。本研究得到如下結果:癡呆組大鼠的記憶能力明顯下降,rLent/NT4-NAP組大鼠較癡呆組大鼠記憶能力明顯改善;HE染色發(fā)現(xiàn)癡呆組大鼠左側海馬區(qū)神經(jīng)細胞明顯變性、壞死,而rLent/NT4-NAP組細胞損傷情況較癡呆組大鼠明顯減輕;檢測癡呆組大鼠左側海馬區(qū)神經(jīng)細胞胞漿內NF-kBmRNA, caspase3mRNA強陽性表達,而rLent/NT4-NAP組左側海馬區(qū)神經(jīng)細胞胞漿內NF-kBmRNA, caspase3mRNA表達較癡呆組顯著減少。通過質譜鑒定和數(shù)據(jù)庫檢索,鑒定出有5種蛋白質表達水平發(fā)生變化。分別為膜聯(lián)蛋白A5、谷氨酸、蛋白激酶C、白細胞粘附分子、基底細胞粘附分子。本研究證明了NAP對實驗性癡呆大鼠具有神經(jīng)保護作用。首次應用蛋白質組學的方法研究了NAP對實驗性癡呆大鼠腦內蛋白質表達的影響,發(fā)現(xiàn)膜聯(lián)蛋白A5、谷氨酸、蛋白激酶C三種蛋白均參與了神經(jīng)退行性疾病神經(jīng)元細胞的凋亡,為研究NAP治療老年性癡呆的作用機制提供了理論依據(jù)。
【學位單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2009
【中圖分類】：R749.1
【部分圖文】：

圖 1 對照組大鼠海馬神經(jīng)元病理學 圖 2 假手術組海馬神經(jīng)元病理學HE 染色結果（×400） HE 染色結果（×400）Picture 1 control group rat hippocampus neuronic Picture 2 sham operated group rat hippocampuneuronic HE pathology dyeing (×400） HE pathology dyeing (×400）圖 3 癡呆組大鼠海馬神經(jīng)元病理學 圖 4 rLent/NT4-NAP 組大鼠海馬神HE 染色結果（×400） 經(jīng)元病理學 HE 染色結果（×400）Picture 3 dementia group rat hippocampus neuronic Picture4 rLent/NT4-NAP group rat hippocampuHE pathology dyeing (×400） neuronic HE pathology dyeing (×400）

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【參考文獻】

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本文編號：2819316