(一)、嗎啡處理后原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)[Ca~(2+)]i的變化目的:研究嗎啡對(duì)原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)[Ca~(2+)]i的影響,探索嗎啡成癮的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制與可能的治療途徑。方法:取原代培養(yǎng)七天的成熟海馬神經(jīng)元,隨機(jī)分為嗎啡急性作用組、納洛酮急性戒斷組、嗎啡慢性作用組、納洛酮慢性戒斷組、阿片受體拮抗劑預(yù)處理組、鈣通道阻斷劑預(yù)處理組、空白對(duì)照組,每組6皿細(xì)胞,運(yùn)用新型熒光探針Fluo-4標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)游離鈣后,利用激光共聚焦顯徽鏡研究嗎啡對(duì)大鼠原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)[Ca~(2+)]i的影響。結(jié)果:急、慢性嗎啡作用均引起[Ca~(2+)]i升高,加入納洛酮戒斷后,不能阻斷嗎啡引起的細(xì)胞內(nèi)[Ca~(2+)]i升高,反而導(dǎo)致[Ca~(2+)]i異常增高;δ_2阿片受體選擇性拮抗劑Naltrindole可以阻斷嗎啡引起的[Ca~(2+)]i增加,μ阿片受體選擇性拮抗劑CTOP不能阻斷嗎啡引起的[Ca~(2+)]i增加;維拉帕米預(yù)處理海馬神經(jīng)元不能阻斷嗎啡引起的[Ca~(2+)]i升高,特異性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣泵抑制劑(TG)預(yù)處理海馬神經(jīng)元抑制嗎啡升高[Ca~(2+)]i的作用。結(jié)論:嗎啡急慢性刺激引起原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)[Ca~(2+)]i升高,δ_2阿片受體選擇性拮抗劑可以阻斷鈣庫釋放引起的細(xì)胞內(nèi)[Ca~(2+)]i升高。 (二)、嗎啡處理后原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元CaM蛋白的變化 目的:研究急、慢性嗎啡處理后原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元CaM蛋白的改變。方法:取原代培養(yǎng)七天的成熟海馬神經(jīng)元,隨機(jī)分為:嗎啡急性作用組,納洛酮急性戒斷組,嗎啡慢性作用組,納洛酮慢性戒斷組,空白對(duì)照組,每組6皿細(xì)胞。采用細(xì)胞免疫熒光染色(Immunofluorescence assay,IFA,雙抗體夾心法染色)及CaM蛋白相對(duì)含量檢測。結(jié)果:急性嗎啡干預(yù)和戒斷對(duì)原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元內(nèi)CaM
【學(xué)位單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2005
【中圖分類】：R749.64
【部分圖文】：

突起的末端有膨大的生長錐結(jié)構(gòu)，正在不斷變化;細(xì)胞體呈圓形、梭形、三角形或多角形不等，胞體較厚，具有空泡狀核，有明顯的核仁;立體感強(qiáng)，常見“暈”。(圖1一1)培養(yǎng)細(xì)胞中可包括幾種神經(jīng)元的類型和非神經(jīng)元的“背景細(xì)胞”，即成纖維細(xì)胞、室管膜細(xì)胞和幾種膠質(zhì)細(xì)胞。成纖維細(xì)胞貼壁最快，呈扁平狀，胞核卵園形，有并列的兩粒小核仁，從胞體兩端發(fā)出細(xì)長突起。膠質(zhì)細(xì)胞貼附在膠原上和成纖維細(xì)胞形成一層“地毯”。神經(jīng)細(xì)胞貼壁較慢，落在“地毯”上生長遷移和分化。圖1一1典型的培養(yǎng)細(xì)胞

突起的末端有膨大的生長錐結(jié)構(gòu)，正在不斷變化;細(xì)胞體呈圓形、梭形、三角形或多角形不等，胞體較厚，具有空泡狀核，有明顯的核仁;立體感強(qiáng)，常見“暈”。(圖1一1)培養(yǎng)細(xì)胞中可包括幾種神經(jīng)元的類型和非神經(jīng)元的“背景細(xì)胞”，即成纖維細(xì)胞、室管膜細(xì)胞和幾種膠質(zhì)細(xì)胞。成纖維細(xì)胞貼壁最快，呈扁平狀，胞核卵園形，有并列的兩粒小核仁，從胞體兩端發(fā)出細(xì)長突起。膠質(zhì)細(xì)胞貼附在膠原上和成纖維細(xì)胞形成一層“地毯”。神經(jīng)細(xì)胞貼壁較慢，落在“地毯”上生長遷移和分化。圖1一1典型的培養(yǎng)細(xì)胞

急性嗎啡刺激引起海馬神經(jīng)細(xì)胞熒光強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 李志強(qiáng);XFM及賽拉嗪對(duì)大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)鈣調(diào)蛋白和鈣離子動(dòng)力學(xué)的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

本文編號(hào)：2812545