【摘要】： 背景與目的：中樞膽堿能系統(tǒng)被證明是影響學習和記憶的重要神經系統(tǒng)，已有資料表明，中樞乙酰膽堿(Ach)是學習記憶的重要神經遞質，主要證據(jù)是M—膽堿受體阻斷劑東莨菪堿能使大腦乙酰膽堿含量下降，并導致記憶障礙，而膽堿酶抑制劑(AchE)能增強記憶，到目前為止，治療老年性癡呆(AD)最有效的方法是膽堿酯酶制劑。它保護AD病人大腦中正在減少的Ach數(shù)量，改善AD病人記憶。 有關阿片類藥物成癮及其脫毒治療的相關研究發(fā)現(xiàn)阿片系統(tǒng)也參與和調制學習記憶的過程。許多實驗研究證明嗎啡降低額葉皮層、隔區(qū)，海馬等部位細胞外Ach，其是，至少是部分抑制了中樞膽堿能神經元活力而損害學習記憶。非選擇性阿片受體拮抗劑納絡酮能夠逆轉這種作用。納絡酮有利于記憶的保持、鞏固，微腦透析實驗發(fā)現(xiàn)，納絡酮能顯著增加海馬Ach的釋放，并呈劑量依賴性�？赡芡ǔＧ闆r下阿片系統(tǒng)對膽堿能神經元有緊張性抑制作用，納絡酮解除了阿片肽對乙酰膽堿釋放的抑制。阿片系統(tǒng)和膽堿能系統(tǒng)對學習記憶影響的機制尚不清楚。 乙酰膽堿主要在神經末梢合成，其合成的關鍵酶是膽堿乙酰轉移酶(ChAT)。ChAT在神經元胞體合成，籍軸突運輸運送到神經末梢的胞漿中。是否阿片系統(tǒng)對膽堿能神經元胞體ChAT的合成或軸突ChAT的運輸或神經末梢ChAT活性存在影響，對神經元突觸可塑性有何影響，目前尚未見文獻報道。 基于以上理論及資料，納洛酮改善東莨菪堿所致學習記憶障礙與其促進乙酰膽堿在突觸的釋放有關，本課題擬對其機制進行一些探討：納洛酮是否對ChAT的合成或者運輸有影響，對學習記憶相關的神經元突觸可塑性有何影響。從而為納洛酮改善老年性癡呆的臨床應用提供理論依據(jù)，為進一步闡明在學習記憶過程中阿片系統(tǒng)對膽堿能系統(tǒng)的調節(jié)機制進行有益的探索。同時比較納洛酮和加蘭他敏對東莨菪堿所致大鼠學習記憶障礙的改善效果。 汕頭大學醫(yī)學院碩士學位論文 材料和方法: 實驗一Morris水迷宮工作記憶試驗 2月齡SD大鼠56只按Morris水迷宮工作記憶試驗方法訓練， 通過訓練，每只大鼠表現(xiàn)穩(wěn)定，隨機分成4組(n=14):正常對照組、 東蓖若堿組、納洛酮治療組(東食若堿+納洛酮)和加蘭他敏治療組 (東食若堿+加蘭他敏)。東蓑若堿按0.4mg/kg、納洛酮按3mg/kg， 加蘭他敏按2 mg/kg，正常對照組予等量生理鹽水，均在實驗前30 分鐘腹腔給藥，然后開始水迷宮延緩性匹配作業(yè)，記錄每只大鼠前后 兩次逃避潛伏期。四組大鼠各取半數(shù)(n=7)，1 .5小時后重復Morris 水迷宮工作記憶實驗，以觀察納洛酮治療效果持續(xù)時間。 采用免疫組化方法和計算機圖像分析技術定量檢測大鼠海馬 CAI、以3區(qū)和前額葉皮層區(qū)膽堿乙酞轉移酶(ChAT)，透射電鏡觀察 海馬以1區(qū)錐體細胞超微結構。 實驗二Morris水迷宮參照記憶試驗 1月齡sD大鼠14只，隨機分為正常對照組、東蓖若堿模型組 (下7)，東蓖若堿模型組大鼠每天皮下注射東蓑若堿Zmg/kg，一天 兩次，正常對照組予等量生理鹽水，連續(xù)21天。然后按Morris水迷 宮參照記憶試驗方法，觀察定位航行、空間探索和可見平臺實驗。 采用Nissl染色法進行海馬以l、以3區(qū)錐體細胞計數(shù)，常規(guī)蘇 木素一伊紅(hematoxylin一eosin，HE)染色進行海馬CAI、CA3區(qū)組 織病理學觀察，透射電鏡觀察海馬以1區(qū)錐體細胞超微結構。 結果: 實驗一結果: 四組大鼠空間工作記憶結果，前后逃避潛伏期比較:正常組呈極 顯著性差異(p0.001)，東莫若堿組無差異(乃0.05)，說明工作記 憶受損害;納洛酮治療組呈顯著性差異(p0.05)，說明東蓖若堿所 致工作記憶損害得到明顯恢復;加蘭他敏治療組仍無差異(乃0.05)， 說明受到損害的工作記憶并無改善。四組Triall逃避潛伏期比較: 其他三組與正常組比較(Dunnett T test)，均無顯著性差異，組間 最大差異(LSD檢測)比較，東莫蓉堿組、加蘭他敏治療組顯著小于 正常組(p0 .05)，東蓖若堿組、納洛酮治療組和加蘭他敏治療組間 無差異。 汕頭大學醫(yī)學院碩士學位論文 膽堿乙酞轉移酶(C hAT)的灰度、陽性單位數(shù)、陽性單位/面積 在四組大鼠海馬以1、以3區(qū)錐體細胞和前額葉皮層無顯著性差異 (P0.05);其他三組與正常組t匕較(Dunnett T test)，均無顯著性 差異;組間最大差異(LSD檢測)比較亦無顯著性差異。說明各組以1、 以3區(qū)錐體細胞、前額葉皮層神經元ChAT量、ChAT表達陽性數(shù)目及 密度無差別。 四組大鼠海馬CAI區(qū)超微結構的變化:四組大鼠錐體細胞胞體 細胞核及細胞器正常，但CAI區(qū)神經元突觸超微結構有明顯變化，正 常組突觸間隙清晰，囊泡大小均一，并向突觸前膜聚集，突觸后致密 物質均勻，致密。東蓖若堿組突觸前后膜模糊，融合，間隙不清;囊 泡明顯大小不一，突觸前膜處聚集明顯，密度增加，遠隔處囊泡大而 稀疏，突觸后致密物質不均、模糊，邊界朦朧。納絡酮組，突觸間隙 清楚，囊泡大小均一，稀疏，向突觸前膜聚集，突觸后致密物質均勻， 邊界整齊清楚。加蘭他敏組，突觸間隙清楚，但前后膜模糊似有融合; 囊泡大小欠均一，分布彌散，無明顯突觸前膜聚集現(xiàn)象，突觸后致密
【學位授予單位】：汕頭大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2003
【分類號】：R749.05

【引證文獻】

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1 趙永娜;李曉紅;方正梅;李順英;邵曉霞;;東莨菪堿對嗎啡誘發(fā)條件位置性偏愛重現(xiàn)大鼠杏仁核p-CREB及c-Fos表達的影響[J];中國臨床藥理學與治療學;2008年01期

本文編號：2795559