【摘要】： 阿爾茨海默病是以認(rèn)知能力衰退為主要表現(xiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,其臨床表現(xiàn)為認(rèn)知和記憶功能不斷惡化。主要病理特征為細(xì)胞外間隙β-淀粉樣蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)沉積所形成得老年斑(Senile plaque,SP),細(xì)胞內(nèi)異常磷酸化的Tau蛋白聚集形成得神經(jīng)纖維纏結(jié)(Neurofibrillary tangles,NFTs)以及海馬神經(jīng)元丟失。其中β-淀粉樣蛋白(β-amyloid,Aβ)斑塊(老年斑)在大腦內(nèi)的沉積被認(rèn)為是阿爾茨海默病的主要病理特征之一。以往的研究主要關(guān)注由Aβ直接的作用于神經(jīng)元所引發(fā)的神經(jīng)毒性,并提出了一系列的假說。并且普遍的研究結(jié)論都人為,β折疊結(jié)構(gòu)的形成是β-淀粉樣蛋白具有毒性作用的關(guān)鍵步驟。老年斑中存在有異常高濃度的Cu~(2+),提示Cu~(2+)可能參與了AD的發(fā)病過程。有研究指出通過與Aβ結(jié)合,Cu~(2+)可促進(jìn)β折疊結(jié)構(gòu)的形成,進(jìn)而引發(fā)神經(jīng)毒性。因此一直以來過渡態(tài)的金屬離子被認(rèn)為是誘發(fā)阿爾茨海默病的重要致病因素之一。然而近年來,隨著研究技術(shù)手段革新和研究的進(jìn)一步深入,有報(bào)道指出Cu~(2+)在某些情況下很可能具有神經(jīng)保護(hù)作用。在此基礎(chǔ)上,本題運(yùn)用圓二色光譜,熒光光譜分析以及高效液相色譜(沉積分析)等實(shí)驗(yàn)方法,研究了銅離子對β-淀粉樣蛋白聚集的影響。結(jié)果表明銅離子除了具有傳統(tǒng)意義上認(rèn)為的毒性作用之外還可能具有積極的作用。它能夠抑制β折疊結(jié)構(gòu)的形成,甚至破壞業(yè)已形成的β折疊結(jié)構(gòu),從而達(dá)到減弱毒性作用的效果。另一方面,從分子機(jī)理來看,目前關(guān)于Cu~(2+)與Aβ存在相關(guān)性的證據(jù)很多,但關(guān)于參與Cu~(2+)結(jié)合的氨基酸位點(diǎn)卻仍然存在爭議。本文對突變體Aβ,~(3,6,13,14)Aβ_(1-40)的研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果揭示了His6、His13、His14位點(diǎn)是Aβ上的Cu~(2+)結(jié)合位點(diǎn)。 再者,目前已有很多關(guān)于不同形式的Aβ與它們神經(jīng)毒性作用的研究,并且得出了一些很有意義的結(jié)論。而近年來,小膠質(zhì)細(xì)胞在阿爾茨海默病發(fā)生和發(fā)展中的作用成為一個(gè)新的研究熱點(diǎn),認(rèn)為β淀粉樣蛋白沉積激活小膠質(zhì)細(xì)胞引起的炎癥反應(yīng)是引起阿爾茨海默病患者的腦組織結(jié)構(gòu)改變的重要原因之一,是阿爾茨海默病的核心病理機(jī)制。本文通過運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,Griess reagent、ELISA檢測試劑盒等實(shí)驗(yàn)在mRNA和表達(dá)產(chǎn)物兩個(gè)水平上測定了不同結(jié)構(gòu)的β-淀粉樣蛋白對小膠質(zhì)細(xì)胞的活化作用(TNF-α,NO)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同聚集形式的β-淀粉樣蛋白通過不同的途徑活化小膠質(zhì)細(xì)胞,重要的是無論是那種形式活化均能被銅離子所抑制,從而進(jìn)一步證實(shí)了銅離子積極方面的作用。
【學(xué)位授予單位】：首都師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R749.16
【圖文】：

首都師范大學(xué)碩士研究生論文用了原子吸收光譜對離心后的上清液中的cu2+含量進(jìn)行了測定，結(jié)果表明，正如我們所期望的，與寡聚體Ap不同，在23，6，’3，，伙p上清液中檢測到了大量的cu2+(圖3一6D)。從而證明了在這樣的條件下，c礦+作用的“失效”是由不能繼續(xù)與Ap絡(luò)合引起的。即:通過與三個(gè)組氨酸殘基結(jié)合，cu2+可破壞p折疊結(jié)構(gòu)并使得Ap以非p沉積的形成沉積。同，00

本文編號：2790415