【摘要】：目前抑郁癥是影響全球3.5億人的最常見精神科疾病。預(yù)計(jì)到2020年,抑郁癥將成為第二大死因。抑郁癥給整個(gè)社會(huì)帶來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),占疾病總負(fù)擔(dān)的10.3%。目前抑郁癥治療手段有限的主要原因在于抑郁癥的發(fā)生機(jī)制不明,雖然研究發(fā)現(xiàn)單胺類遞質(zhì)(5-羥色胺、去甲腎上腺素及多巴胺)、谷氨酸受體、表觀遺傳修飾、下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸、炎性細(xì)胞因子和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子等參與其機(jī)制發(fā)生,但均缺乏令人信服的證據(jù)。目前抑郁癥治療是以單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的失衡假說(shuō)為依據(jù)開發(fā)了一系列抗抑郁藥,如三環(huán)類抗抑郁藥物、5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRIs)。但這些抗抑郁藥均存在明顯的治療滯后效應(yīng),且其有很大的副作用,所以研發(fā)出新型有效抗抑郁藥社會(huì)意義重大。第一部分研究了黃酮類化合物漆黃素對(duì)抑郁的治療作用及其機(jī)制。漆黃素(Fisetin)是黃酮類小分子化合物,大量存在于水果和蔬菜中。既往研究證實(shí)其具有抗氧化性、抗炎性及神經(jīng)保護(hù)作用,因此被認(rèn)為具有治療神經(jīng)疾病如中風(fēng)、亨廷頓疾病和阿爾茲海默癥的作用。目前尚不清楚漆黃素是否具有抗抑郁的作用。因此在兩種不同的動(dòng)物抑郁模型中研究了漆黃素的抗抑郁作用。首先將普通的ICR小鼠進(jìn)行空間行為限制,小鼠表現(xiàn)出抑郁樣行為后對(duì)其進(jìn)行漆黃素處理。懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)證實(shí)漆黃素顯著降低小鼠的不動(dòng)時(shí)間,表明其具有一定的抗抑郁作用。與此同時(shí),我們用漆黃素治療Ahi1基因敲除小鼠因?yàn)锳hi1基因敲除小鼠具有穩(wěn)定的抑郁樣表型。同樣,漆黃素顯著改善了Ahi1基因敲除小鼠抑郁樣行為。TrkB信號(hào)通路在抑郁癥發(fā)生機(jī)制中發(fā)揮重要的作用;研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)漆黃素能快速增加TrkB的磷酸化水平。給予Trk B抑制劑(K252a)顯著降低了小鼠腦內(nèi)的TrkB的磷酸化水平,阻斷了漆黃素升高磷酸化TrkB的作用,TrkB抑制劑K252a也阻斷了漆黃素的抗抑郁效果。這些結(jié)果表明漆黃素通過(guò)激活TrkB的信號(hào)通路起到抗抑郁的作用。由于漆黃素價(jià)格便宜和其良好的安全特性,漆黃素和其衍生物有希望成為高效抗抑郁藥物。第二部分的研究是關(guān)于抗抑郁藥物治療應(yīng)激后Ahi1小鼠的機(jī)制研究。首先將Ahi1基因敲除小鼠進(jìn)行了兩周的空間行為限制,行為學(xué)觀察到對(duì)照小鼠和Ahi1基因敲除小鼠的抑郁程度均增加;而通過(guò)三周的抗抑郁藥氟西汀治療,Ahi1基因敲除小鼠對(duì)抗抑郁藥物不敏感。其次,通過(guò)Western Blot實(shí)驗(yàn),檢測(cè)到氟西汀治療應(yīng)激后的對(duì)照小鼠的Ahi1蛋白水平均增加,表明Ahi1可能參與了抗抑郁藥物治療的過(guò)程。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明氟西汀治療應(yīng)激后的對(duì)照小鼠和ICR小鼠中的海馬神經(jīng)元數(shù)目增加,而氟西汀治療對(duì)Ahi1基因敲除小鼠海馬神經(jīng)元數(shù)目增加不明顯。最后,Ahi1基因敲除小鼠小鼠細(xì)胞核內(nèi)中的Cend1水平降低,而Cend1對(duì)神經(jīng)再生有重要調(diào)控作用,因此提示了Ahi1通過(guò)調(diào)控Cend1細(xì)胞內(nèi)分布起到調(diào)控神經(jīng)再生和抗抑郁作用。研究結(jié)果均表明Ahi1有潛力成為治療抑郁癥的治療靶點(diǎn),為抑郁癥藥物的開發(fā)提供了新的思路。研究結(jié)果表明TrkB激活劑漆黃素和其衍生物可能將向臨床轉(zhuǎn)化為高效抗抑郁藥物;同時(shí)Ahi1蛋白參與調(diào)控抗抑郁藥物引起的神經(jīng)再生;Ahi1蛋白表達(dá)的減少會(huì)造成神經(jīng)再生減少和抗抑郁效果的降低,因此Ahi1蛋白及其信號(hào)通路也是抑郁癥治療的潛在靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R749.4
【圖文】：

抑郁作用及抗抑郁藥物治療應(yīng)激后 Ahi1 小鼠的機(jī)制研究 箱中繼續(xù)培養(yǎng)（所有操作在操凈臺(tái)中進(jìn)行）。 細(xì)胞給藥：細(xì)胞傳代 24 小時(shí)后，鏡下觀察細(xì)胞貼壁良好，當(dāng)六率達(dá)到 50%以上時(shí)，細(xì)胞換液，每孔 2ml，Dex 組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入終濃度 20μM），Control 組細(xì)胞加入 2μl 等體積 DMSO 溶液。十放入培養(yǎng)箱培養(yǎng) 72 小時(shí)。Fisetin(40μM）給予細(xì)胞處理。.7 實(shí)驗(yàn)分組及動(dòng)物處理了清晰表明整個(gè)實(shí)驗(yàn)的安排過(guò)程，我們將實(shí)驗(yàn)的每個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)標(biāo)注

漆黃素抗抑郁作用及抗抑郁藥物治療應(yīng)激后 Ahi1 小鼠的機(jī)制研究 第一部分間行為限制兩周后的小鼠發(fā)現(xiàn)存在抑郁樣表型后，隨后進(jìn)行為期兩周的 Fisetin 治療，之后再對(duì)小鼠進(jìn)行治療后的行為學(xué)檢測(cè)。在為期進(jìn)行的兩周的 Fisetin 治療后，我們發(fā)現(xiàn)小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)的不動(dòng)時(shí)間均明顯降低，表示存在著明顯的抗抑郁樣表現(xiàn)（圖 1-E，F(xiàn)）。綜上所述，我們得出結(jié)論，F(xiàn)isetin 能治療空間行為限制誘導(dǎo)的抑郁模型小鼠。

第一部分 漆黃素抗抑郁作用及抗抑郁藥物治療應(yīng)激后 Ahi1 小鼠的機(jī)制研究2.2 漆黃素改善 Ahi1 KO 小鼠的抑郁樣表型漆黃素在空間行為限制模型誘導(dǎo)的抑郁小鼠中表現(xiàn)出了抗抑郁作用。為了更加明確漆黃素的抗抑郁作用，我們選擇了另外一種抑郁模型小鼠，也就是我們實(shí)驗(yàn)室擁有的 Ahi1 基因敲除小鼠。在先前的研究報(bào)道中，我們已經(jīng)證實(shí)過(guò) Ahi1 缺失會(huì)導(dǎo)致抑郁樣的行為。所以我們將 Ahi1 基因敲除小鼠也作為一種抑郁模型。通過(guò)連續(xù)給予漆黃素三周的治療，我們發(fā)現(xiàn) Ahi1 基因敲除小鼠在第二周的行為學(xué)（懸尾實(shí)驗(yàn) TST 和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn) FST）檢測(cè)中已經(jīng)觀察到小鼠抗抑郁的表型（圖 2-C，D）。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 Shangli Cai;Shucai Huang;Wei Hao;;New hypothesis and treatment targets of depression:an integrated view of key findings[J];Neuroscience Bulletin;2015年01期

2 ;Antidepressant-like effects of the ethanolic extract of XiaobuxinTang,a traditional Chinese herbal prescription in animal models of depression[J];Chinese Medical Journal;2007年20期

本文編號(hào)：2769649