【摘要】：目的： 阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是常見的老年人慢性退行性神經(jīng)疾病，AD的主要病理學標志包括老年斑(SP)和神經(jīng)原纖維纏結(NFTs)。SP的淀粉樣沉積物主要成份是β-淀粉樣肽(Aβ，包括Aβ_(40)和Aβ_(42))，由淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protein，APP)分解而來，被認為在AD的發(fā)病中起著十分重要的作用。目前許多證據(jù)表明，APP基因的點突變、代謝異常及過表達所引起的Aβ聚集，是AD發(fā)病的重要原因之一。越來越多的研究證實AD存在多基因缺陷，包括APP、PS1、PS2、apoE4、ACT以及ERAB基因，且建立了許多AD轉基因動物模型。然而，受不同內(nèi)外環(huán)境的影響及不同的實驗條件限制，不便于系統(tǒng)探討AD特征性標志產(chǎn)物APP及Ap的表達及其對細胞的影響。目前，國外對AD病的致病機制的研究主要集中在轉基因動物模型上，國內(nèi)尚無通過轉基因技術建立轉基因AD細胞模型并使用NGF進行干預的報道。本研究旨在構建突變型APP基因序列的質粒并轉染PC12細胞，觀察APP及Aβ的表達、細胞形態(tài)及細胞周期的改變，并使用神經(jīng)生長因子(NGF)進行干預，系統(tǒng)探討AD重要致病因素APP及Aβ表達的分子機制及NGF對AD的治療作用。 方法： 1．質粒構建：NCBI網(wǎng)站上查找APP基因及其啟動子的序列，
【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2006
【分類號】：R749.16
【圖文】：

腦RNA電泳結果。1，Marker;2，抽提0.8%agaroseeleetrophoresisoffet模板擴增APP序列，PCR結束后，擴增產(chǎn)物進行瓊脂20V，60分鐘)，EB液中染色，可見P察結果并照相。經(jīng)檢測膠證實大小收純化，連接到pGEM一T載體上，提質粒DNA后，0.%8瓊脂糖凝膠檢有特異條帶。用測序引物測序，致(圖1.2，1.3)。234567M

4突變型質粒載體的克隆和構建以克隆的APP質粒載體DNA為模板，AT/IATZ，TA3/AT4為引物擴增，分別擴增得到了1485飾、767Pb片段(圖1.4)，以擴增的PCR產(chǎn)物作模板，TAI/TA4為引物PRC擴增得到2250飾片段(圖1.5)，經(jīng)檢測膠證實大小相同的PRC產(chǎn)物，用低熔點瓊脂糖凝膠電泳回收純化，連接到pGEM一T載體上，挑取單克隆，將細菌

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8 叢琳;;調(diào)控ADAM9基因表達的啟動子區(qū)多態(tài)性對散發(fā)性阿爾茨海默病的保護作用[A];2011全國老年癡呆與衰老相關疾病學術會議第三屆山東省神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師（學術）論壇論文匯編[C];2011年

9 郭U

本文編號：2741618