【摘要】： (第一部分)ω-3多不飽和脂肪酸對(duì)CMS抑郁癥大鼠模型作用的行為學(xué)研究 目的探討ω-3多不飽和脂肪酸對(duì)慢性輕度應(yīng)激(chronic mild stress,CMS)抑郁癥模型的作用。 方法實(shí)驗(yàn)共持續(xù)8周,成年雄性Sprague-Dawley大鼠49只,隨機(jī)分為2組,正常組和模型組。模型組采用CMS方法制造抑郁癥大鼠模型。造模4周后,CMS模型組隨機(jī)分為6組;CMS+文拉法辛較高劑量組(5.0 mg·kg~(-1)·d~(-1)),CMS+文拉法辛較低劑量組(2.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))、CMS+橄欖油組(0.72g·kg~(-1)·d~(-1))、CMS+魚(yú)油組(0.72g·kg~(-1)·d~(-1))和CMS+生理鹽水組(4 mg·kg~(-1)·d~(-1))、CMS+氯米帕明組(10mg·kg~(-1)·d~(-1))。共治療4周,觀察各組藥物對(duì)CMS大鼠模型類(lèi)抑郁行為的逆轉(zhuǎn)作用,采用糖水消耗量、糖水偏愛(ài)百分比作為該模型的行為學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo),每周稱體重。 結(jié)果第8周末,CMS+魚(yú)油組糖水消耗量及糖水偏愛(ài)百分比明顯高于CMS+生理鹽水組和CMS+橄欖油組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),CMS+魚(yú)油組糖水消耗量及糖水偏愛(ài)百分比與CMS+氯米帕明組及正常對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);CMS+文拉法辛較高劑量組和CMS+文拉法辛較低劑量組糖水消耗量及糖水偏愛(ài)百分比明顯高于CMS+生理鹽水組和CMS+橄欖油組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),CMS+文拉法辛糖水消耗量及糖水偏愛(ài)百分比與CMS+氯米帕明組及正常對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。CMS各治療組之間體重的差異沒(méi)有顯著性(P＞0.05)。 結(jié)論(1)慢性輕度應(yīng)激能導(dǎo)致大鼠產(chǎn)生類(lèi)抑郁樣行為;(2)ω-3多不飽和脂肪酸對(duì)CMS模型所致類(lèi)抑郁行為具有逆轉(zhuǎn)作用;(3)較高劑量和較低劑量文拉法辛對(duì)CMS模型所致類(lèi)抑郁行為具有逆轉(zhuǎn)作用;(4)ω-3多不飽和脂肪酸對(duì)體重沒(méi)有影響。 (第二部分)ω-3多不飽和脂肪酸對(duì)慢性輕度應(yīng)激抑郁癥大鼠模型腦單胺類(lèi)遞質(zhì)的影響 目的探討ω-3多不飽和脂肪酸對(duì)慢性輕度應(yīng)激(chronic mild stress,CMS)抑郁癥模型腦單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的作用。 方法實(shí)驗(yàn)共持續(xù)8周,成年雄性Sprague-Dawley大鼠43只,隨機(jī)分為2組,正常組和模型組,模型組建立CMS抑郁癥大鼠模型,造模方法同第一部分。造模4周后,模型組隨機(jī)分為5組;CMS+文拉法辛組(2.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))、CMS+橄欖油組(0.72g·kg~(-1)·d~(-1))、CMS+魚(yú)油組(0.72g·kg~(-1)·d~(-1))和CMS+生理鹽水組(4 mg·kg~(-1)·d~(-1))、CMS+氯米帕明組(10mg·kg~(-1)·d~(-1))。實(shí)驗(yàn)第8周末,即給藥4周后,大鼠用10%水合氯醛(350 mg/kg)麻醉,斷頭取腦,冰上迅速分離前額葉皮層、海馬,稱重后用錫紙包裹迅速投入液氮中,-80℃凍存?zhèn)溆�。抽�?0.1 mol/L HClO_4(高氯酸)200μl加入大鼠海馬組織中,500μl加入大鼠前額葉皮層組織中(冰浴中),充分混勻后4℃12 000r/min離心20min。取上清,然后冰浴靜置10 min。4℃12 000/min再次離心20 min,取其上清。測(cè)定單胺類(lèi)遞質(zhì)及其代謝產(chǎn)物總量,計(jì)算遞質(zhì)含量。 結(jié)果(1)海馬;①應(yīng)激魚(yú)油組5-HT、5-HIAA水平低于橄欖油應(yīng)激組,DA水平高于橄欖油應(yīng)激組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);應(yīng)激魚(yú)油組5-HT、5-HIAA水平低于生理鹽水應(yīng)激組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。②氯米帕明應(yīng)激組5-HIAA水平低于生理鹽水應(yīng)激組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。③文拉法辛應(yīng)激組5-HIAA水平低于橄欖油應(yīng)激組,低于正常組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);DA水平顯著更低于生理鹽水應(yīng)激組和氯米帕明應(yīng)激組(P＜0.05)。④單因素方差分析顯示MHPG和DOPAC含量組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.772和P=0.461)。(2)前額葉;①與正常組相比,橄欖油應(yīng)激組前額葉5-HT,5-HIAA,NE水平有顯著性升高,DA水平有顯著性降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);②生理鹽水組與正常組相比,也有著NE水平的顯著性升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。③氯米帕明治療應(yīng)激組5-HT,5-HIAA,NE水平性低于橄欖油治療應(yīng)激組,DA水平高于橄欖油治療組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),5-HT與NE水平低于生理鹽水治療組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。④魚(yú)油治療應(yīng)激組5-HT水平低于橄欖油應(yīng)激組,DA水平高于橄欖油應(yīng)激組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。⑤文拉法辛應(yīng)激組5-HT水平低于橄欖油應(yīng)激組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。⑥MHPG和DOPAC含量組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論(1)應(yīng)激能夠?qū)е侣暂p度應(yīng)激抑郁癥大鼠模型腦5-HT,NE功能的增強(qiáng),DA功能的減低;(2)ω-3多不飽和脂肪酸能夠逆轉(zhuǎn)慢性輕度應(yīng)激抑郁癥大鼠模型所致5-HT功能的增強(qiáng)以及DA功能的減低,對(duì)NE功能沒(méi)有影響;(3)較低劑量的文拉法辛能逆轉(zhuǎn)慢性輕度應(yīng)激抑郁癥大鼠模型腦5-HT功能的增強(qiáng),不能逆轉(zhuǎn)CMS模型所致的DA和NE功能的異常;(4)氯米帕明對(duì)慢性輕度應(yīng)激抑郁癥大鼠模型腦5-HT和NE,DA的異常均具有調(diào)節(jié)作用。 (第三部分)ω-3多不飽和脂肪酸對(duì)慢性輕度應(yīng)激抑郁癥大鼠模型作用的基因芯片研究 目的(1)探討ω-3多不飽和脂肪酸對(duì)慢性輕度應(yīng)激(chronic mildstress,CMS)抑郁癥模型海馬基因表達(dá)的影響。(2)探討文拉法辛對(duì)CMS動(dòng)物模型海馬基因表達(dá)的影響。(3)對(duì)ω-3多不飽和脂肪酸及文拉法辛所調(diào)控的基因進(jìn)行比較。 方法實(shí)驗(yàn)共持續(xù)8周,取12只大鼠,進(jìn)行4周的CMS刺激。在第4周末,將所有大鼠隨機(jī)分成3組;CMS模型+灌胃文拉法辛組(3只);CMS模型+灌胃魚(yú)油組(3只);CMS模型+灌胃生理鹽水(6只);文拉法辛組給藥量為2.5 mg·kg-1·d~(-1),魚(yú)油和橄欖油的給藥量為0.72g·kg-1·d~(-1),生理鹽水的給藥量為4 mg·kg-1·d~(-1)。共給藥4周,實(shí)驗(yàn)第8周末,即給藥4周后,大鼠用10%水合氯醛(350 mg/kg)麻醉,斷頭取腦,冰上迅速分離海馬,抽提mRNA,采用含10,003條基因的大鼠全基因組cDNA芯片對(duì)ω-3多不飽和脂肪酸和文拉法辛干預(yù)組大鼠及未治療模型組大鼠海馬基因表達(dá)的差異情況進(jìn)行研究。ω-3多不飽和脂肪酸對(duì)CMS大鼠模型作用的基因芯片共做3張,每張芯片分別由CMS+魚(yú)油組1個(gè)海馬mRNA樣本與CMS+生理鹽水組6個(gè)樣本的混合mRNA和芯片進(jìn)行雜交;文拉法辛對(duì)CMS大鼠模型作用的基因芯片共做3張,每張芯片分別由CMS+文拉法辛組1個(gè)海馬mRNA樣本與CMS+生理鹽水組6個(gè)樣本的混合mRNA和芯片進(jìn)行雜交。 結(jié)果(1)ω-3多不飽和脂肪酸調(diào)節(jié)表達(dá)差異基因;①按照較為嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn),即cy3/cy5＞2.0或cy3/cy5＜0.5的標(biāo)準(zhǔn),與CMS+生理鹽水組相比,CMS+魚(yú)油組共有36條表達(dá)差異基因,其中12條基因上調(diào)表達(dá),23條基因下調(diào)表達(dá);②按照較為寬松的標(biāo)準(zhǔn),即cy3/cy5＞1.67或cy3/cy5＜0.67的標(biāo)準(zhǔn),CMS+魚(yú)油組共有202條表達(dá)差異基因,其中71條基因上調(diào)表達(dá),131條基因下調(diào)表達(dá)。魚(yú)油所致表達(dá)差異基因包括神經(jīng)免疫、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、腦神經(jīng)遞質(zhì)、腦神經(jīng)肽、離子通道等相關(guān)基因及其他基因和功能不明基因。(2)文拉法辛調(diào)節(jié)表達(dá)差異基因;①按照較為嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)CMS+文拉法辛共有10條表達(dá)差異基因,均為上調(diào)表達(dá);②按照較為寬松的標(biāo)準(zhǔn),CMS+文拉法辛組共有80條表達(dá)差異基因,其中54條基因上調(diào)表達(dá),26條基因下調(diào)表達(dá)。文拉法辛所致表達(dá)差異基因包括藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因、離子通道基因、神經(jīng)發(fā)育、神經(jīng)可塑性基因其他基因以及功能未知基因。(3)通過(guò)對(duì)ω-3多不飽和脂肪酸以及文拉法辛作用的基因芯片雜交結(jié)果進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)ω-3多不飽和脂肪酸和文拉法辛具有35條共同調(diào)節(jié)基因。②按照較為寬松的標(biāo)準(zhǔn),即cy3/cy5＞1.67或cy3/cy5＜0.67的標(biāo)準(zhǔn),ω-3多不飽和脂肪酸和文拉法辛存在共同調(diào)節(jié)基因35條,其中共同上調(diào)基因有16條,共同下調(diào)基因有19條;②按照較為嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn),即cy3/cy5＞2或cy3/cy5＜0.5的標(biāo)準(zhǔn),ω-3多不飽和脂肪酸和文拉法辛沒(méi)有共同調(diào)節(jié)基因。魚(yú)油和文拉法辛共同調(diào)節(jié)基因包括神經(jīng)肽、神經(jīng)調(diào)質(zhì)、GABA受體、線粒體凋亡過(guò)程、TNF相關(guān)基因及其他一些基因和功能不明基因。 結(jié)論(1)ω-3多不飽和脂肪酸通過(guò)對(duì)離子通道基因、神經(jīng)免疫基因、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路基因、腦神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)基因、腦神經(jīng)肽相關(guān)基因等的調(diào)節(jié)從而產(chǎn)生抗抑郁作用;(2)文拉法辛通過(guò)對(duì)藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因、離子通道基因、神經(jīng)發(fā)育、可塑性相關(guān)基因等的調(diào)節(jié)從而產(chǎn)生抗抑郁作用;(3)ω-3多不飽和脂肪酸和文拉法辛的抗抑郁機(jī)制具有存在共同點(diǎn),也存在差異。
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類(lèi)號(hào)】：R749.4

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 劉超;蔡偉雄;;二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸與小鼠攻擊行為的相關(guān)性[J];法醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 劉超;ω-3多不飽和脂肪酸對(duì)小鼠攻擊行為的影響研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2721356