發(fā)布時(shí)間：2020-06-12 17:21

【摘要】：背景:氧化修飾蛋白質(zhì)在腦老化及阿爾茨海默病等老年變性神經(jīng)病的發(fā)病機(jī)制中扮演著重要角色。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可以發(fā)現(xiàn)氧化修飾蛋白質(zhì),為相關(guān)疾病的藥物治療選擇新的靶標(biāo)。目的:建立以雙向電泳結(jié)合Western blot及生物質(zhì)譜技術(shù)分離、鑒定人腦氧化修飾蛋白質(zhì)的方法。方法:取3個(gè)無神經(jīng)系統(tǒng)疾患的男性腦組織蛋白,第一向等電聚焦電泳后,固相pH梯度膠條同二硝基苯肼反應(yīng),然后行第二向SDS-PAGE電泳。2張相同凝膠中的1張行考馬斯亮藍(lán)染色,另1張凝膠上免疫熒光顯色。同PVDF膜上顯色點(diǎn)相對應(yīng)的考染凝膠上的蛋白質(zhì)點(diǎn)即為氧化修飾蛋白質(zhì)。凝膠蛋白膠內(nèi)酶解,基質(zhì)輔助激光解析飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜鑒定氧化修飾蛋白質(zhì)。結(jié)果與結(jié)論:從提取的腦組織中鑒定出β-肌動蛋白、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、果糖二磷酸醛縮酶、磷酸甘油酸激酶、1,3-磷酸甘油醛脫氫酶、碳酰還原酶1、磷酸丙糖異構(gòu)酶、轉(zhuǎn)酮醇酶、丙酮酸激酶、血清白蛋白前體、二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白質(zhì)2、熱休克蛋白60為氧化修飾蛋白質(zhì)。說明實(shí)驗(yàn)成功建立了用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分離及鑒定人腦氧化蛋白質(zhì)的方法。

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳守義;張欣強(qiáng);劉俊華;胡玉山;龔玉嬌;李釧華;王鳴;;霍亂弧菌菌體蛋白雙向電泳技術(shù)的建立[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2008年04期

2 李麗梅;王秀梅;;HepG2細(xì)胞蛋白質(zhì)組雙向電泳條件的優(yōu)化與圖譜的建立[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志;2011年05期

3 邱芳華;饒衛(wèi)農(nóng);周強(qiáng);陳求剛;肖洪廣;;雙向凝膠電泳分析脾臟蛋白組學(xué)的方法研究[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2011年01期

4 何東茍;蛋白質(zhì)組學(xué)研究及其在寄生蟲學(xué)上的應(yīng)用[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2003年04期

5 劉國紅;孫蕓;呼林;張欽憲;;人胃黏膜蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜的獲得和分析[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年06期

6 羅元明,劉彥信,鄭德先;蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法及其在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2003年02期

7 王明華;蔣東;吳士良;王久存;;GSFs細(xì)胞蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜的建立[J];江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年06期

8 徐菲菲;孫勝;劉秀華;;缺氧預(yù)處理誘導(dǎo)心肌細(xì)胞蛋白質(zhì)組變化的初步研究[J];化學(xué)學(xué)報(bào);2006年06期

9 陳劍波;蔡建春;;質(zhì)膜蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的研究進(jìn)展[J];中外醫(yī)學(xué)研究;2011年13期

10 鄭輝;吳峗;余軼婧;鐘政榮;羅慶禮;沈繼龍;;雙向電泳聯(lián)合免疫印跡技術(shù)分析日本血吸蟲成蟲可溶性抗原[J];臨床輸血與檢驗(yàn);2009年02期

相關(guān)會議論文 前10條

1 黃海燕;劉建軍;莊志雄;李習(xí)藝;衛(wèi)秦芝;楊曉華;楊建平;;L-02肝細(xì)胞蛋白質(zhì)雙向電泳條件的建立[A];第五屆廣東省環(huán)境誘變劑學(xué)會暨第三屆廣東省預(yù)防醫(yī)學(xué)會衛(wèi)生毒理專業(yè)委員會學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2006年

2 徐良;張奉春;;60kd SSA/Ro抗原的提出、純化及蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定[A];首屆全國中青年風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2004年

3 李明;肖志強(qiáng);陳主初;李建玲;馮雪萍;張鵬飛;;人類結(jié)腸上皮衰老相關(guān)的蛋白質(zhì)組學(xué)分析[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)第三屆學(xué)術(shù)大會論文摘要[C];2005年

4 耿建林;魏海明;孫lm;田志剛;;MyD88相互作用蛋白的免疫蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

5 李慶云;李敏;馮耘;郭倩;顧淑一;萬歡英;;慢性間歇缺氧致雄性小鼠血管損傷的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];2008年中國睡眠研究會第五屆學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2008年

6 徐晨;石建莉;楊征敏;王;程國艷;李定;王一飛;周元聰;劉小龍;;從微生物尋找免疫節(jié)育抗原的研究[A];第十屆全國生殖生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2005年

7 張世聯(lián);;生命科學(xué)新的研究領(lǐng)域-蛋白質(zhì)組學(xué)應(yīng)用簡介[A];2006年全國微循環(huán)與血液流變學(xué)暨分子生物學(xué)新進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會專題學(xué)術(shù)報(bào)告論文集[C];2006年

8 苗蘭;李欣志;劉建勛;;中國小型豬冠心病模型的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];2008心血管藥理學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2008年

9 胡水旺;姜勇;;熒光差異雙向電泳技術(shù)平臺在疾病蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用[A];中國病理生理學(xué)會受體和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)專業(yè)委員會暨消化專業(yè)委員會聯(lián)合學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

10 方敏;茹強(qiáng);王洪云;茹炳根;;人三葉因子3體外拮抗順鉑誘導(dǎo)HCT116細(xì)胞凋亡的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)第三屆學(xué)術(shù)大會論文摘要[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 黎明;科學(xué)新寵——蛋白質(zhì)組學(xué)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2001年

2 本報(bào)特約記者 洛頻;利用蛋白質(zhì)組學(xué)加速癌癥研究[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2002年

3 丁丁;科學(xué)家將發(fā)起人類蛋白質(zhì)組計(jì)劃[N];中國醫(yī)藥報(bào);2008年

4 本報(bào)記者 張荔子;蛋白質(zhì)組學(xué)：人類下一個(gè)目標(biāo)[N];健康報(bào);2001年

5 ;打開生命的“萬花筒”[N];科技日報(bào);2007年

6 胡德榮;中德科學(xué)家聯(lián)手分析蛋白質(zhì)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)和功能[N];健康報(bào);2006年

7 金光亮;證候基因組學(xué)和證候蛋白質(zhì)組學(xué)[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

8 記者 王庭君;600多名蛋白質(zhì)組學(xué)專家來泰研討[N];泰州日報(bào);2009年

9 張中橋;生理鹽水灌注法展示肺組織蛋白可獲更多生物學(xué)信息[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

10 吳一福;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院從MSCs中篩選出重要差異蛋白[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 趙忠鵬;布魯氏菌毒力、免疫相關(guān)分子的篩選研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

2 何昆;H-Ras介導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的蛋白質(zhì)組學(xué)分析[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年

3 霍然;人睪丸蛋白質(zhì)表達(dá)譜的構(gòu)建及精子發(fā)生相關(guān)蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2006年

4 李明;人結(jié)腸上皮衰老機(jī)制的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];中南大學(xué);2007年

5 王從斌;人類十二指腸液蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

6 袁泉;雙向凝膠電泳技術(shù)研究及其在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2004年

7 劉鋒;人CD34+造血干/祖細(xì)胞和日本血吸蟲的轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

8 曾群力;電磁場對細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)的影響[D];浙江大學(xué);2007年

9 李麗莉;貝氏柯克斯體與單核細(xì)胞相互作用的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2006年

10 張國安;生物質(zhì)譜新技術(shù)及其在疾病蛋白質(zhì)組研究中的應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2003年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 何海洋;輪狀病毒感染誘導(dǎo)MA104細(xì)胞感染相關(guān)蛋白的分析鑒定[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

2 張慧芳;幽門螺桿菌對阿莫西林耐藥機(jī)制的初步探索[D];山西醫(yī)科大學(xué);2007年

3 郭西良;雙側(cè)坐骨神經(jīng)切斷對貓脊神經(jīng)節(jié)蛋白質(zhì)組表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2008年

4 鄭小莉;ONO-AE-248誘發(fā)中性粒細(xì)胞非凋亡性程序化死亡的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2006年

5 趙亮;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

6 于晗;幽門螺桿菌甲硝唑耐藥的比較蛋白質(zhì)組學(xué)初步研究[D];山東大學(xué);2009年

7 王潔;雙向電泳法測定大鼠輻照前后外周血淋巴細(xì)胞蛋白質(zhì)組的差異表達(dá)[D];蘇州大學(xué);2004年

8 蘭國偉;結(jié)核分枝桿菌北京家族多重耐藥菌株CCDC5180、藥物敏感菌株CCDC5079與BCG的蛋白質(zhì)組學(xué)初步研究[D];石河子大學(xué);2007年

9 馬翔;卵細(xì)胞成熟過程蛋白質(zhì)表達(dá)差異性研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2003年

10 李延倉;表皮干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及蛋白組學(xué)研究[D];暨南大學(xué);2008年

，

本文編號：2709858