【摘要】：抑郁癥是一種常見的精神疾病且有高發(fā)病率和高致死率。全球抑郁癥患者的數(shù)量約為3.5億,并且呈逐年上升態(tài)勢,到2030年抑郁癥將成為危害廣大群眾的身心健康并且給社會帶來沉重負擔的首位疾病,但是抑郁病的發(fā)病機制目前還未完全闡明。核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白1(Nucleotide-bindingleucine-rich repeatpyrin domain containing protein 1,NLRP1)炎癥小體是由NLRP1、凋亡相關斑點樣蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Cysteinyl aspartate specific proteinase-1,caspase-1)等共同組成的一個多蛋白復合物,NLRP1炎癥小體的激活會進一步促進炎癥因子的釋放,從而引起炎癥反。自噬是亞細胞水平的"自我清理和吞噬",細胞可以通過單層或雙層的細胞膜包裹待被降解物而形成自噬體,然后被運送到溶酶體處形成自噬溶酶體然后再進行多種酶的降解和消化,從而實現(xiàn)細胞自身的代謝和更新。自噬體的形成起始于自噬相關蛋白,在形成過程中受m TOR和P13K/Beclin-1信號調(diào)控協(xié)調(diào),其中自噬起始的微管相關蛋白1輕鏈3(Microtubuleassociated protein 1 light chain 3,LC3)和它的加工產(chǎn)物LC3Ⅰ/LC3Ⅱ(自噬體最終形成時的標志性分子)是在自噬發(fā)生過程中起著關鍵作用的蛋白。以往研究表明,NLRP1炎癥小體和自噬均參與了多種炎癥相關神經(jīng)系統(tǒng)疾病,但是它們在抑郁癥中的作用還未見報道。本課題旨在研究NLRP1炎癥小體-自噬相關蛋白在抑郁樣小鼠海馬中表達情況,希望可以通過研究找到新的方法用以更好的治療抑郁癥。目的研究NLRP1炎癥小體及其相關的炎性因子和自噬相關蛋白在慢性社會挫敗應激(Chronic Social Defeat Stress,CSDS)和重復社會挫敗應激(Repeat Social Defeat Stress,RSDS)誘導的抑郁樣小鼠海馬中的表達情況.方法:建立CSDS和RSDS小鼠抑郁癥模型。實驗小鼠通過明暗喜好實驗、社會接觸實驗、開放曠場實驗(Open field test,OFT)、強迫游泳實驗(Forced swimming test,FST)和懸尾實驗(Tail suspension test,TST)觀察小鼠在應激誘導下致其產(chǎn)生的抑郁樣行為的改變。通過Western blot和Real-time PCR的方法檢測NLRP1、ASC和Caspase-1在各個實驗組別小鼠的海馬組織中的表達情況,通過Western blot方法檢測相關炎癥因子白細胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)、白細胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白細胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及自噬相關蛋白微管相關蛋白輕鏈3(Microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、自噬相關基因5(Autophagy associated gene 5,ATG5)、自噬相關基因7(Autophagy associated gene 7,ATG7)、和Beclin-1等目的蛋白在各個實驗組別小鼠的海馬組織中的表達情況。結果:1.在CSDS模型中,和對照組相比,CSDS組的小鼠懸尾不動時間和強迫游泳不動時間都顯著延長,社會接觸率明顯降低。同時,小鼠的移動距離,平均移動速度,象限間穿線次數(shù)和站立次數(shù)明顯減少。另外,和對照組相比,CSDS組小鼠的海馬組織中NLRP1,Caspase-1和ASC等炎癥小體復合物的表達明顯增加,IL-6,IL-18,IL-1β,TNF-α等炎性相關因子的表達也明顯增加,而ATG5,ATG7,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ等自噬相關蛋白的表達明顯降低。2.在RSDS模型中,和對照組相比,RSDS組的小鼠懸尾不動時間和強迫游泳不動時間都顯著延長,在明暗喜好檢測中其在明亮處所待的時間也少于對照組。同時,小鼠的移動距離,平均移動速度,象限間穿線次數(shù)和站立次數(shù)也明顯減少。另外,和對照組相比,RSDS組小鼠的海馬組織中NLRP1,Caspase-1和ASC等炎癥小體復合物的表達明顯增加,IL-6,IL-18,IL-1β,TNF-α等炎性相關因子的表達也明顯增加,而ATG5,ATG7,Beclin-1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ等自噬相關蛋白的表達明顯降低。結論:在慢性社會挫敗應激和重復社會挫敗應激誘導的抑郁樣小鼠海馬中,NLRP1炎癥小體以及其他炎性相關因子的表達是上調(diào)的,而自噬相關蛋白的表達水平則明顯降低,表明NLRP1炎癥小體-自噬信號可能在應激致小鼠抑郁樣行為中扮演重要角色。
【圖文】：

CSDS應激刺激下對實驗小鼠抑郁樣行為變化的影響（mean±SEM,n=15）

speed in OFT.(D)Number of standing in OFT. Data were presented as mean±SEM,n=15. **P<0.01vs control group.3.3 CSDS 應激刺激致小鼠抑郁樣模型中，Western Blot 和 Real-time PCR 檢測其海馬組織中 NLRP1，ASC 和 Caspase-1 的表達情況。如圖 3 所示，在經(jīng)過給予 CSDS 應激刺激以后，，其所測得結果相對于空白對照組來說，Western Blot 測得模型組小鼠的海馬組織中的 NLRP1，ASC 和Caspase-1 蛋白的表達均有增加，其所得結果具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；Real-time PCR 測得模型組小鼠的海馬組織中的 NLRP1，ASC 和 Caspase-1 的表達明顯增加，其所得結果明顯具有統(tǒng)計學意義（P<0.01）.
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R749.4

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本文編號：2650751