【摘要】：目的：1.建立一種簡(jiǎn)單、快速并能同時(shí)測(cè)定血清中酪氨酸(Tyr)、5-羥色胺(5-HT)和色氨酸(Trp)的高效液相色譜—熒光檢測(cè)法(HPLC-FLD)。 2.初步探討血清酪氨酸(Tyr)、5-羥色胺(5-HT)和色氨酸(Trp)含量測(cè)定在重性抑郁障礙(MDD)患者中的臨床價(jià)值。 方法：1.血清標(biāo)本與等量5%(V/V)高氯酸溶液混合處理去蛋白后離心取上清液20μL直接進(jìn)樣分析。用Atlantis C18 column (4.6×150mm,i.d.5μm)分離；流動(dòng)相為0.1 mol/L KH2P04:甲醇(85：15,V/V)；流速1.0mL/min;熒光檢測(cè)波長(zhǎng)：0-4min激發(fā)光波長(zhǎng)228nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為306mn;4-7.5min激發(fā)光波長(zhǎng)278nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為338nm;7.5min后激發(fā)光波長(zhǎng)285nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為353nm。室溫下12min內(nèi)完成分析測(cè)定。Tyr.5-HT和Trp均采用峰保留值比較法和疊加法進(jìn)行定性分析,用外標(biāo)法測(cè)定峰面積進(jìn)行定量分析。通過(guò)對(duì)線(xiàn)性范圍和檢測(cè)限、精密度、回收率和干擾試驗(yàn)的考察,對(duì)該方法進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)。 2.測(cè)定健康成人(n=110例)和MDD患者(n=60例)血清Tyr、5-HT和Trp含量。探討MDD患者血清Tyr、5-HT和Trp含量含量變化臨床意義。 結(jié)果：1.血清和標(biāo)準(zhǔn)品樣本的Tyr、5-HT和Trp峰均分離良好,保留時(shí)間分別約為3min、5min和9min。Tyr的線(xiàn)性范圍為0.55-275μmol/L,最低檢出濃度為0.014μmol/L,回收率為98.0%-103.3%；5-HT的線(xiàn)性范圍為0.094-47.03μmol/L,最低檢出濃度為0.024μmol/L,回收率為96.3%-103.1%；Trp的線(xiàn)性范圍為0.049-49μmol/L,最低檢測(cè)濃度為0.0049μmol/L,回收率為93.3%-103.5%。Tyr、5-HT和Trp的日內(nèi)、日間測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于5%。苯丙氨酸(Phe)、犬尿喹啉酸(Kyna)、犬尿氨酸(Kyn)和肌酐(Cre)等物質(zhì)對(duì)該法均無(wú)干擾。 2.110例健康成人血清Tyr含量為(63.68±2.23)μmol/L,血清5-HT含量為(1.15±0.04)gmol/L,血清Trp含量為(42.46±1.17)μmol/L, 5-HT/Trp(×10-3)比值為(26.20±7.21)。與正常對(duì)照組比較,MDD患者組血清Tyr、5-HT和Trp含量顯著降低(P0.01)。Tyr診斷MDD的敏感性和特異性分別為：85.0%和100.0%；5-HT/Trp比值診斷MDD的敏感性和特異性分均為100%。 結(jié)論：1.本文在國(guó)內(nèi)外首次建立HPLC-FLD法同時(shí)測(cè)定血清Tyr、5-HT和Trp,方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏、特異、準(zhǔn)確,適宜于臨床和科研工作。 2.血清Tyr、5-HT和Trp對(duì)MDD的臨床輔助診斷有一定的臨床價(jià)值。
【圖文】：

3.3.2.3Tyr、5一HT和Trp對(duì)MDD診斷的效能評(píng)價(jià)本文對(duì)5一HT/Trp比值和Tyr含量診斷MDD的所有可能的界值作ROC曲線(xiàn)，如圖3一7。結(jié)果顯示5一HT/Trp比值診斷MDD的AUC為 1.0，以5一HT/Trp比值 ((16.63x10一3)作為界值的敏感度為100%，特異度為100%。以Tyr濃度(60.53 pmol/L作為臨界值，診斷MDD的AUC為0.885，，敏感度為85.0%，特異度為100%。說(shuō)明Tyr和5一HT/Trp這兩個(gè)指標(biāo)對(duì)MDD具有較好的診斷效能。度城接—5一HTITYr—Tyr0刀 020.40.60.日 1.01·特異性圖3一 7Tyr和5一HT汀中診斷MDD的Roc曲線(xiàn)Fig.3一 7ROCcurveofTyrands一HT/Trp
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：O657.72;R749.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2647693