【摘要】：抑郁癥是一種嚴(yán)重影響人類健康的精神障礙性疾病,其發(fā)病機(jī)制尚不清楚。本研究采用熒光差異凝膠電泳(DIGE)技術(shù),在慢性輕度應(yīng)激致抑郁模型中,動(dòng)態(tài)研究模型動(dòng)物腦內(nèi)蛋白質(zhì)的表達(dá)變化,探討抑郁癥的發(fā)病機(jī)制并為新抗抑郁藥物作用靶點(diǎn)的篩選奠定基礎(chǔ)。 烏靈菌粉是我國(guó)一類中藥原料藥,以其為主要成分的烏靈膠囊在臨床已廣泛用于鎮(zhèn)靜安神、抗失眠的治療。本研究中我們采用經(jīng)典抗抑郁和抗焦慮藥物評(píng)價(jià)方法,對(duì)其抗精神疾患作用進(jìn)行系統(tǒng)研究,并采用基因芯片技術(shù)探討其作用機(jī)制。 第一部分：慢性應(yīng)激小鼠腦內(nèi)蛋白表達(dá)動(dòng)態(tài)變化研究 1.以慢性輕度應(yīng)激模型小鼠為研究對(duì)象,采集不同時(shí)間點(diǎn)小鼠的大腦組織,分析腦內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá)變化,研究抑郁癥的發(fā)病機(jī)制。 2.小鼠暴露在慢性輕度應(yīng)激程序中,誘發(fā)其血清皮質(zhì)酮水平顯著升高,蔗糖飲水、強(qiáng)迫游泳及開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明動(dòng)物處于抑郁狀態(tài)。 3.研究結(jié)果顯示多種與能量代謝相關(guān)的酶類發(fā)生顯著變化,ATP合酶及鳥氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平表明腦內(nèi)呈能量缺乏狀態(tài),而氧化還原酶的變化則表明腦內(nèi)處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。與功能神經(jīng)元相關(guān)的標(biāo)志物的變化表明腦內(nèi)存在著神經(jīng)損傷。 4.能量合成不足,以及由此誘發(fā)的氧化應(yīng)激最終導(dǎo)致神經(jīng)元功能受損,這些環(huán)節(jié)可能成為新的抗抑郁藥物開發(fā)靶點(diǎn)。 第二部分：烏靈菌粉抗焦慮作用研究 1.采用ICR小鼠通過三種行為學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察烏靈菌的抗焦慮作用。小鼠灌胃給予烏靈菌粉(0.25、0.50和1.00g/kg),給藥7天后進(jìn)行行為學(xué)評(píng)價(jià)(高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)、爬梯實(shí)驗(yàn)和抗戊四唑致驚厥實(shí)驗(yàn)) 2.高架十字迷宮觀察發(fā)現(xiàn)烏靈膠囊中、高劑量組明顯增加小鼠在開臂停留時(shí)間百分比和開臂次數(shù)百分比(OE%和OT%)。在爬梯實(shí)驗(yàn)中,烏靈膠囊低、高組的直立次數(shù)明顯減少。在抗戊四唑致驚厥中,中劑量烏靈膠囊明顯延長(zhǎng)了驚厥發(fā)作潛伏期和顯著降低了驚厥評(píng)分(p0.01)。抗印防己毒素致驚厥實(shí)驗(yàn)中,烏靈菌粉高劑量組可顯著延遲強(qiáng)直發(fā)作的潛伏期。 3.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)表明,烏靈膠囊有明確的抗焦慮作用。 第三部分：烏靈菌粉抗抑郁作用研究 1.采用慢性輕度應(yīng)激(CMS)小鼠評(píng)價(jià)鳥靈菌的抗抑郁作用。采用9種不同應(yīng)激源對(duì)小鼠實(shí)施2周刺激后給予藥物干預(yù)共10周,進(jìn)行蔗糖飲水、自發(fā)運(yùn)動(dòng)、強(qiáng)迫游泳和水迷宮實(shí)驗(yàn),并進(jìn)行神經(jīng)免疫組化分析。 2.在行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中可觀察到烏靈菌粉有很好的改善抑郁狀態(tài)的作用。CMS小鼠的蔗糖飲水量和自發(fā)運(yùn)動(dòng)明顯減少,不動(dòng)時(shí)間和尋臺(tái)潛伏期明顯延長(zhǎng),烏靈菌粉治療后均有顯著改善作用。 3.研究結(jié)果顯示烏靈菌粉具有顯著的抗抑郁作用,機(jī)制有待深入研究。 第四部分：烏靈菌粉的分子作用機(jī)理探討 1.以CMS抑郁模型小鼠為觀察對(duì)象,提取包括烏靈菌粉治療的各組小鼠的大腦皮層的總RNA,應(yīng)用小鼠表達(dá)譜芯片對(duì)各組的基因表達(dá)進(jìn)行分析,烏靈菌粉的作用機(jī)理。 2.基因芯片比較發(fā)現(xiàn),CMS組小鼠與對(duì)照組相比皮層有130個(gè)基因發(fā)生改變,其中上調(diào)116個(gè),下調(diào)14個(gè)；與CMS組比較,烏靈菌粉組有85個(gè)基因發(fā)生改變,其中上調(diào)34個(gè),下調(diào)51個(gè)；氟西汀組133個(gè)基因發(fā)生改變,上調(diào)35個(gè),下調(diào)98個(gè) 3.CMS小鼠在多個(gè)基因組別的表達(dá)方面出現(xiàn)亢奮或功能不全,而通過烏靈菌粉和氟西汀的干預(yù)作用,使多個(gè)基因表達(dá)趨向正常水平。烏靈菌粉的抗抑郁作用與氟西汀基本一致,效果略有差別,提示烏靈菌粉作用相對(duì)緩和。
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R749.4

【參考文獻(xiàn)】

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1 張禮萍;鄒麗萍;白麗敏;呂忠禮;;視黃酸受體β在針灸提高腦損傷幼鼠運(yùn)動(dòng)功能中的作用[J];中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志;2009年09期

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本文編號(hào)：2645476