【摘要】：目的:研究低氧環(huán)境下藏族中老年人的慢性牙周炎與認知功能障礙相關(guān)性,探討牙周炎參與藏族中老年人MCI及AD的潛在機制。方法:選取2016年10月到2018年12月青海省黃南藏族自治州(平均海拔3,287m)社區(qū)藏族中老年人(年齡≥50歲)作為研究對象,進行一般信息調(diào)查(年齡、性別、文化程度、職業(yè)、運動、日常生活能力、情緒和居住地等),并進行MMSE和Mo CA認知量表篩查和牙周袋深度、附著喪失水平、出血指數(shù)、缺牙個數(shù)等牙周病臨床指標檢查,通過病例對照的方法選取認知功能障礙患者78例作為病例組,病例組中輕度認知功能障礙(MCI)22例、癡呆(AD)13例、輕度認識功能障礙合并牙周炎(MCI+CP)26例、癡呆合并牙周炎(AD+CP)17例,同時選取同期與病例組,性別、年齡、受教育程度相匹配的人員82例作為對照組,對照組中健康34(NC)例、牙周炎(CP)48例。采用SYBR?GreenΔΔCT方法檢測齦下菌斑中牙齦卟啉單胞菌的表達,對于PPARγ基因Pro12Ala位點用聚合酶鏈反應擴增后,送公司測序。結(jié)果:1.六組研究對象性別比例、年齡及受教育程度沒有顯著性差異(P0.05);2.六組研究對象間Mo CA、MMSE、ADAS-Cog量表評分比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。CP組的Mo CA、MMSE評分明顯低于NC組(P0.05),CP組的ADAS-Cog評分明顯高于NC組(P0.05)。MCI+CP組的Mo CA、MMSE評分明顯低于MCI組(P0.05),MCI+CP組的ADAS-Cog評分明顯高于MCI組(P0.05)。AD+CP組的Mo CA、MMSE評分明顯低于AD組(P0.05),AD+CP組的ADAS-Cog評分明顯高于AD組(P0.05)。六組研究對象CDT、NPI、HAMA等量表評分比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),HRSD、HIS評分比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);3.Mo CA的各因子評分的比較,與NC組比,CP組延遲記憶、執(zhí)行功能、工作記憶、語言功能明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與MCI組比,MCI+CP語言功能評分明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與AD組比,AD+CP組在定向、工作記憶差異具有顯著性(P0.05);與NC組比,MCI組在Mo CA各因子水平除視空間能力外差異均具有顯著意義(P0.05),AD組在Mo CA各因子水平差異均具有顯著意義(P0.05);與CP組比,MCI+CP在定向、延遲記憶、工作記憶差異具有顯著性(P0.05),AD+CP組在Mo CA各因子水平差異均具有顯著意義(P0.05);4.六組研究對象MMSE量表各因子間有明顯差異(P0.05)。與NC組比較CP組延遲記憶和語言功能明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與MCI組比較,MCI+CP組語言功能明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與AD組比,AD+CP組在定向、短時記憶、延遲記憶、語言功能差異具有顯著性(P0.05);與NC組比,MCI、AD組在MMSE的定向、延遲記憶、語言功能明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與CP組比,MCI+CP、AD+CP組在定向、延遲記憶、視空間、語言功能差異具有顯著性(P0.05);5.牙周病合并MCI、AD組和牙周病組比較牙周袋深度、附著喪失、出血指數(shù)明顯高于牙周病組(P0.05);6.在160例研究對象中,Pg總的檢出率為73.75%,NC組為44.12%,MCI組68.18%,AD組84.62%,CP組79.17%,MCI+CP組88.46%,AD+CP組94.12%,六組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);7.在160名研究對象中,Pro/Pro 117例,Pro/Ala 42例,Ala/Ala1例,Ala等位基因頻率為0.1375,χ2=1.75,查χ2界值表P0.05,所以該樣本處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。因樣本量較少,部分組的Ala攜帶者頻數(shù)較少,為減少誤差將MCI和AD組合并,MCI+CP與AD+CP合并進行統(tǒng)計分析。各組間Ala攜帶者的基因型頻率不同,差異有統(tǒng)計學差異(P0.05)。與NC組比,MCI+AD組的Ala+頻率明顯升高,差異有統(tǒng)計學差異(P0.00417),CP組與NC組無明顯差異(P0.01250),MCI+CPAD+CP組Ala+頻率明顯高于MCI+AD組(P0.00500),MCI+CPAD+CP組Ala+頻率明顯高于CP組(P0.00313);8.通過PPAR-γPro12Ala位點多態(tài)性與MMSE、Mo CA評分的spearman相關(guān)分析,結(jié)果顯示在NC組中,PPAR-γPro12Ala位點多態(tài)性與MMSE、Mo CA得分無明顯相關(guān)性(P0.05),在MCI+AD和CP組中,Ala攜帶者與MMSE存在中等程度的負相關(guān)關(guān)系,與Mo CA存在弱的負相關(guān)關(guān)系;在MCI+CPAD+CP組中,Ala攜帶者與MMSE存在強負相關(guān)關(guān)系,與Mo CA中等負相關(guān)。結(jié)論:1.高原低氧環(huán)境下(青海黃南藏族自治州)藏族中老年人牙周炎和認知功能呈正相關(guān),即患有慢性牙周炎藏族中老年人認知功能明顯下降,合并牙周炎MCI和AD較早表現(xiàn)出較多領域的認知水平減退;同時認知功能障礙加重牙周炎表現(xiàn),齦下菌斑Pg檢出率和牙齦附著喪失水平的升高。2.外周血PPARγ基因Pro/Ala多態(tài)性與認知功能障礙及牙周炎相關(guān),同時患有兩種疾病相關(guān)性最強;Ala等位基因攜帶者比Pro/Pro基因型具有更高的認知功能障礙風險。PPARγ基因Pro/Ala可能為牙周炎參與藏族中老年人MCI及AD的潛在機制。
【圖文】：

青海大學碩士學位論文 第 2 章 對象與方法④ 加入 500μL 緩沖液 GD，12,000rpm 簡短離心，倒掉收集管中棄液。⑤ 吸取 PW 漂洗液 600μL 加入到吸附柱中，混合均勻后放入設置好轉(zhuǎn)速12,000 rpm 的離心機內(nèi)離心 30s，倒掉收集管中的廢液，重新將吸附柱 CG2 次放入管中，重復加入 600μL 漂洗液 PW。12,000rpm 離心 2min，丟掉收集管，將CB3 打開蓋子放到濾紙上室溫下徹底晾干，以清除附著的無水乙醇。⑥ 將晾干的 CB3 放入新的滅菌理 EP 管內(nèi)，中心懸空滴加 50μL TE，常溫放置數(shù)分鐘，12,000rpm 離心 2 分鐘，丟掉吸附柱，在紫外分光光度計上檢測所提取的DNA濃度，確保OD260/280值在1.8-2.0。保存質(zhì)檢合格的DNA標本在-20℃冰箱備用。

青海大學碩士學位論文 第 2 章 對象與方法④ 加入 500μL 緩沖液 GD，12,000rpm 簡短離心，倒掉收集管中棄液。⑤ 吸取 PW 漂洗液 600μL 加入到吸附柱中，混合均勻后放入設置好轉(zhuǎn)速12,000 rpm 的離心機內(nèi)離心 30s，倒掉收集管中的廢液，重新將吸附柱 CG2 次放入管中，，重復加入 600μL 漂洗液 PW。12,000rpm 離心 2min，丟掉收集管，將CB3 打開蓋子放到濾紙上室溫下徹底晾干，以清除附著的無水乙醇。⑥ 將晾干的 CB3 放入新的滅菌理 EP 管內(nèi)，中心懸空滴加 50μL TE，常溫放置數(shù)分鐘，12,000rpm 離心 2 分鐘，丟掉吸附柱，在紫外分光光度計上檢測所提取的DNA濃度，確保OD260/280值在1.8-2.0。保存質(zhì)檢合格的DNA標本在-20℃冰箱備用。
【學位授予單位】：青海大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R781.42;R749.1

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本文編號：2634303