【摘要】： 目的 AD是老年性癡呆最常見(jiàn)的形式。現(xiàn)對(duì)AD的診斷治療的局限，很大程度上是由于動(dòng)物模型的不完善。本實(shí)驗(yàn)選用Aβ注射的大鼠模型，腦海馬內(nèi)注射BK，觀察BK在正常大鼠及AD大鼠中所引起的行為學(xué)及腦形態(tài)學(xué)的改變。以評(píng)價(jià)當(dāng)應(yīng)用Aβ、BK兩種物質(zhì)注入海馬后，是否可建立一種更為可靠而持久的動(dòng)物模型。 方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wister大鼠25只，雌雄各半。行水迷宮訓(xùn)練4天至大鼠學(xué)會(huì)迷宮，后隨機(jī)分為5組，每組5只。分別為空白對(duì)照組，DW注射組，BK注射組，Aβ注射組，Aβ+BK注射組。參照文獻(xiàn)定位雙側(cè)齒狀回，各組大鼠齒狀回注射一定劑量的相應(yīng)藥物。術(shù)后飼養(yǎng)2周后，測(cè)試水迷宮潛伏期并記錄。測(cè)試后常規(guī)灌注取腦，放入4％PFA中后固定3天，酒精后固定，石蠟包埋。以注射點(diǎn)為中心連續(xù)切片厚7μm。行HE及Nissl染色，磷酸化Tau蛋白免疫組化染色。測(cè)量皮層及海馬CA1、CA4區(qū)免疫陽(yáng)性細(xì)胞積分光密度值。所有數(shù)據(jù)以SPSS11.5軟件包處理分析。 結(jié)果 1．行為學(xué)檢測(cè) DW組與空白對(duì)照組之間潛伏期值無(wú)顯著差異，P＞0.05。 DW組與BK組、Aβ組、Aβ+BK組潛伏期之間差異顯著，P＜0.05。 AB+BK組與Aβ組、BK組潛伏期之間差異顯著，P＜0.05。 2．HE及Nissl染色 (1)空白對(duì)照組及DW組：海馬各區(qū)及頂葉皮層細(xì)胞未見(jiàn)明顯形態(tài)學(xué)改變，無(wú)明顯小膠質(zhì)細(xì)胞增生。 (2)BK組：海馬各區(qū)及頂葉皮層細(xì)胞未見(jiàn)明顯形態(tài)學(xué)改變，，無(wú)明顯小膠質(zhì)細(xì)胞增生。與DW組相比未見(jiàn)明顯不同。 (3)Ap組:海馬齒狀回背側(cè)細(xì)胞帶輕度受損，細(xì)胞數(shù)有所減少，細(xì)胞排 列略紊亂。注射點(diǎn)周?chē)腃AI、CA4區(qū)細(xì)胞排列略欠整齊，細(xì)胞數(shù)減少不明 顯。頂葉皮層神經(jīng)元數(shù)目同前兩組。HE染色未見(jiàn)明顯小膠質(zhì)細(xì)胞增生。 (4)Ap+BK組:海馬齒狀回背側(cè)細(xì)胞帶明顯受損或完全消失，CAI、 CA4區(qū)細(xì)胞明顯排列紊亂，數(shù)目減少。頂葉皮層神經(jīng)元數(shù)目也有所減少。 HE染色顯示，齒狀回背側(cè)細(xì)胞帶缺失區(qū)明顯小膠質(zhì)細(xì)胞增生。 3.磷酸化Tau蛋白免疫組化結(jié)果。 Tau蛋白免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞漿及突起呈棕色，皮層及海馬 各區(qū)均可見(jiàn)Tau蛋白免疫陽(yáng)性細(xì)胞。 海馬CAI、CA4區(qū)免疫陽(yáng)性細(xì)胞積分光密度值，Ap+BK組明顯高于 DW組、BK組、Ap組，均有顯著差異，P0.05;BK組與DW組及Ap組比 較，也有顯著差異，P0.05;DW組與Ap組比較無(wú)顯著差異，P0.05。皮 層區(qū)免疫陽(yáng)性細(xì)胞積分光密度值，Ap+BK組明顯高于其他三組，均有顯著 差異，P0.05;DW組、BK組、A日組之間兩兩比較無(wú)顯著差異，P0·05。 結(jié)論 1.證實(shí)了Ap注射人大鼠海馬可引起大鼠行為學(xué)改變和神經(jīng)元損害， 但損害程度輕微，范圍局限于藥物注射部位及其周?chē)?2.BK注射人正常大鼠海馬可引起大鼠行為學(xué)的改變，但神經(jīng)元并未發(fā) 生形態(tài)學(xué)的變化。 3.BK注人Ap所致AD大鼠海馬，可引起比Ap單獨(dú)注人更加明顯的 行為學(xué)改變，神經(jīng)元損害不僅見(jiàn)于注射部位及其周?chē)�，而且�?jiàn)于遠(yuǎn)離注射區(qū) 的頂葉皮層。 4.Ap與BK同時(shí)注人大鼠海馬可產(chǎn)生協(xié)同作用，提示可以試用此方法 建立AD動(dòng)物模型，并對(duì)此進(jìn)行進(jìn)一步研究。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類(lèi)號(hào)】：R749.16

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 劉輝,陳俊拋,田時(shí)雨,高曲文,韓燕;海馬注射β淀粉樣蛋白對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶及局部神經(jīng)元的損傷作用[J];中華神經(jīng)科雜志;2000年03期

2 張熙，張葆樽，楊新平，張微微，李莉;D－半乳糖誘導(dǎo)擬衰老動(dòng)物模型的記憶行為改變[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;1996年04期

本文編號(hào)：2616454