【摘要】： 阿片依賴是嚴(yán)重的醫(yī)學(xué)和社會(huì)問(wèn)題。神經(jīng)生物學(xué)和藥理學(xué)的研究均表明,阿片類物質(zhì)依賴與中腦皮層邊緣系統(tǒng)直接相關(guān)。嗎啡等阿片類物質(zhì)進(jìn)入體內(nèi)后,可以與GABA能神經(jīng)元上的μ-阿片受體結(jié)合,使位于腹側(cè)背蓋區(qū)(ventral tegmentalarea,VTA)的多巴胺(dopamine,DA)能神經(jīng)元因去抑制而激活,從而引起DA能神經(jīng)元的投射靶區(qū)伏隔核(nucleus accumbens,NAc)、內(nèi)側(cè)前額葉皮層(medialprefrontal cortex,mPFC)中DA釋放增加。這是阿片類物質(zhì)產(chǎn)生欣快效應(yīng)進(jìn)而誘導(dǎo)成癮的起始事件。除了引起欣快效應(yīng)外,阿片類物質(zhì)還激活一系列轉(zhuǎn)錄因子如CREB,Fos家族的表達(dá)。Fos家族蛋白,尤其是ΔFosB被認(rèn)為與依賴性藥物引起的敏化效應(yīng)相關(guān),是啟動(dòng)和維持藥物依賴狀態(tài)的分子開(kāi)關(guān)。 κ-阿片受體及其內(nèi)源性的配體強(qiáng)啡肽(Dynorphin,Dyn)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)有廣泛的分布。κ-阿片受體與μ-阿片受體介導(dǎo)的生物效應(yīng)通常相互對(duì)抗:μ-激動(dòng)劑激活DA能神經(jīng)元,使DA釋放增加,而κ-激動(dòng)劑則抑制DA能神經(jīng)傳遞;μ-激動(dòng)劑用藥后產(chǎn)生欣快,具有獎(jiǎng)賞、強(qiáng)化效應(yīng),而κ-激動(dòng)劑則介導(dǎo)煩躁、厭惡的情緒,沒(méi)有獎(jiǎng)賞、強(qiáng)化效應(yīng)。這些結(jié)果提示,κ-阿片受體與μ-阿片受體就像古代哲學(xué)中的“陰”和“陽(yáng)”一樣,共同參與情緒、動(dòng)機(jī)相關(guān)的精神神經(jīng)活動(dòng)的調(diào)節(jié),維持機(jī)體阿片系統(tǒng)功能的內(nèi)穩(wěn)態(tài)。 大量的研究表明,κ-阿片受體系統(tǒng)可以調(diào)控嗎啡的藥物依賴。選擇性的κ-受體激動(dòng)劑U-50488系統(tǒng)給藥可以逆轉(zhuǎn)嗎啡誘導(dǎo)的條件性位置偏愛(ài),阻斷嗎啡誘導(dǎo)的行為敏化,抑制嗎啡自身給藥行為,而且U-50488的這些作用可為選擇性的κ-受體拮抗劑nor-BNI所阻斷。而另一方面,在κ-阿片受體基因敲除的動(dòng)物,依賴性藥物引起的DA釋放顯著增加。κ-受體系統(tǒng)對(duì)DA能神經(jīng)傳遞的調(diào)節(jié)可能是κ-激動(dòng)劑對(duì)抗嗎啡依賴的作用機(jī)制。 中腦皮層邊緣系統(tǒng)是與藥物依賴密切相關(guān)的腦內(nèi)結(jié)構(gòu)。在該系統(tǒng)中,DA能神經(jīng)元占據(jù)相對(duì)主導(dǎo)的地位,也是該系統(tǒng)參與藥物依賴的主要功能性物質(zhì)基礎(chǔ)。其中,VTA是DA能神經(jīng)元胞體密集的核團(tuán),由它發(fā)出的神經(jīng)纖維可以投射到NAc和mPFC,分別形成DA能神經(jīng)元的中腦邊緣通路和中腦皮層通路。近年來(lái)的一些研究對(duì)于VTA是否存在κ-阿片受體、VTA中的κ-受體系統(tǒng)是否參與了嗎啡依賴、κ-激動(dòng)劑能否直接抑制該區(qū)內(nèi)的DA能神經(jīng)元以及其抑制作用的機(jī)制等問(wèn)題尚存爭(zhēng)議。本研究即擬從多個(gè)方面對(duì)上述問(wèn)題進(jìn)行探討。 我們首先應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)以及蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)方法,考察了嗎啡急慢性給藥對(duì)中腦皮層邊緣系統(tǒng)的三個(gè)重要腦區(qū)VTA、NAc、mPFC中κ-阿片受體mRNA和蛋白水平的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,嗎啡急性給藥可使上述三個(gè)腦區(qū)中的κ-阿片受體mRNA水平顯著升高,但蛋白水平?jīng)]有顯著性改變。而嗎啡慢性給藥后,NAc和VTA中κ-阿片受體mRNA水平回復(fù)正常,而mPFC中mRNA含量維持高水平;慢性給藥還使mPFC和VTA中的κ-受體蛋白顯著下降,但對(duì)NAc中的蛋白水平?jīng)]有顯著影響。這些結(jié)果提示中腦皮層邊緣系統(tǒng)內(nèi)的κ-阿片受體可能參與了藥物依賴的過(guò)程。而VTA、NAc、mPFC中κ-阿片受體表達(dá)改變的區(qū)域差異性說(shuō)明κ-受體在這些腦區(qū)的合成和降解受到不同方式的調(diào)節(jié),提示這些腦區(qū)在調(diào)控藥物依賴中可能處于不同的地位。 前人和我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明VTA中的κ-受體可能參與了嗎啡依賴的過(guò)程,同時(shí)VTA微注射κ-激動(dòng)劑在正常動(dòng)物可引起顯著的行為改變,于是我們推測(cè)VTA微注射κ-激動(dòng)劑U-50488有可能影響嗎啡誘導(dǎo)的精神依賴。我們?cè)趦蓚�(gè)動(dòng)物行為模型上對(duì)此進(jìn)行考察。在大鼠條件性位置偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)中,VTA微注射U-50488,至少在所用劑量下并不產(chǎn)生顯著的條件性位置厭惡(或偏愛(ài)),但卻可以顯著抑制嗎啡所致的條件性位置偏愛(ài);在大鼠行為敏化實(shí)驗(yàn)中,VTA微注射U-50488在并不影響動(dòng)物自發(fā)活動(dòng)的劑量下可顯著抑制嗎啡所致的行為敏化。這些結(jié)果表明,VTA微注射U-50488可以抑制嗎啡誘導(dǎo)的精神依賴。 在進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)中,我們對(duì)VTA微注射κ-激動(dòng)劑影響嗎啡依賴的機(jī)制進(jìn)行了初步探討。采用腦組織勻漿的實(shí)驗(yàn)方法,我們檢測(cè)了mPFC和NAc中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及其代謝產(chǎn)物濃度的改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,嗎啡急性給藥使mPFC和NAc中DA轉(zhuǎn)化率升高,表明這兩個(gè)腦區(qū)中DA能神經(jīng)傳遞加強(qiáng)。而VTA微注射U-50488可顯著抑制嗎啡引起的DA轉(zhuǎn)化率的升高。在嗎啡慢性給藥情況下,各處理組間雖無(wú)顯著性差異,但也表現(xiàn)出類似趨勢(shì)。在清醒動(dòng)物腦微透析實(shí)驗(yàn)中,VTA微注射U-50488還可顯著抑制嗎啡引起的NAc細(xì)胞外液中DA和5-HT代謝產(chǎn)物的升高。免疫組化實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明,形成行為敏化的大鼠,NAc(包括核部和殼部)和mPFC中的FosB陽(yáng)性細(xì)胞顯著增加,而VTA微注射U-50488顯著抑制嗎啡引起的變化。以上結(jié)果提示,VTA微注射U-50488影響嗎啡依賴的機(jī)制可能包括抑制DA能神經(jīng)傳遞,抑制轉(zhuǎn)錄因子FosB的表達(dá)。VTA微注射U-50488對(duì)投射靶區(qū)NAc和mPFC均可產(chǎn)生顯著影響,提示VTA中κ-阿片受體的作用可能并無(wú)VTA-NAc或VTA-mPFC投射通路的選擇性。 通過(guò)以上研究我們發(fā)現(xiàn),嗎啡急慢性給藥可引起中腦皮層邊緣系統(tǒng)中κ-阿片受體表達(dá)的改變,提示該系統(tǒng)中的κ-阿片受體可能參與了對(duì)嗎啡依賴的調(diào)節(jié)。在中腦皮層邊緣系統(tǒng)的核心區(qū)域VTA給予κ-激動(dòng)劑可以抑制嗎啡誘導(dǎo)的精神依賴,其作用可能與其對(duì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)以及FosB基因表達(dá)的調(diào)節(jié)有關(guān)。而且VTA給予κ-激動(dòng)劑可同時(shí)影響靶區(qū)NAc和mPFC,提示VTA中κ-阿片受體的作用并無(wú)投射通路的選擇性。本研究對(duì)全面理解κ-受體對(duì)中腦DA能神經(jīng)傳遞的調(diào)控作用以及κ-受體系統(tǒng)與藥物依賴的關(guān)系有一定意義。
【圖文】：

Figure24.Standardeurvesofmonoamineneurotransmitteranditsmetabolites.2.2HPLC一ECD法測(cè)得單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及其代謝產(chǎn)物的高效液相色譜圖50on，

本文編號(hào)：2612789