【摘要】：目的:探討大豆甙元(Daidzein)對(duì)慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠海馬腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)肽Y(NPY)蛋白表達(dá)和非特異免疫調(diào)節(jié)作用的影響。方法:取健康成年SD大鼠40只,雄性,體質(zhì)量(210±19)g,清潔級(jí),用1%蔗糖水喂養(yǎng)4 d,使動(dòng)物原來(lái)的飲水習(xí)慣發(fā)生改變。第5天開(kāi)始24 h禁水,但不禁食,第6天給予1%蔗糖水4 h,測(cè)1%蔗糖水的偏嗜度。根據(jù)1%蔗糖水偏嗜度和體重隨機(jī)分成4組,每組10只,糖水偏嗜度和體重各組間沒(méi)有顯著差異(P0.05)。正常對(duì)照組(CG)、模型對(duì)照組(MG)、氟西汀對(duì)照組(FG,10.0 mg/kg)、大豆甙元組(DG,80.0 mg/kg)。造模同時(shí)灌胃給藥,每日1次,連續(xù)給藥32 d。造模方法為慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性的應(yīng)激模型加孤養(yǎng)。觀察大鼠的行為改變,免疫蛋白印記(Western blot)技術(shù)和免疫組織化學(xué)法檢測(cè)海馬BNDF和NPY表達(dá),觀察淋巴細(xì)胞增值功能,脾臟指數(shù),外周血白細(xì)胞數(shù)目及抗體分泌細(xì)胞功能。結(jié)果:與正常對(duì)照組相比慢性應(yīng)急刺激大鼠體重、蔗糖消耗量及大鼠曠場(chǎng)試驗(yàn)得分顯著降低,游泳不動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng),海馬BNDF和NPY表達(dá)水平低下,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。氟西汀治療組和大豆甙元治療組與模型對(duì)照組相比大鼠體重、蔗糖消耗量、大鼠曠場(chǎng)試驗(yàn)得分以及海馬BNDF和NPY表達(dá)水平顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。大豆甙元組大鼠外周血白細(xì)胞數(shù)目、抗體分泌細(xì)胞功能及淋巴細(xì)胞增殖力顯著高于模型組。大豆甙元?jiǎng)┝科⑴K指數(shù)顯著高于模型組(P0.01)。結(jié)論:大豆甙元能顯著拮抗慢性應(yīng)激模型大鼠抑郁癥狀,大豆甙元可增加海馬內(nèi)BDNF和NPY蛋白的含量,并且有增強(qiáng)慢性應(yīng)激模型大鼠體液免疫應(yīng)答和淋巴細(xì)胞增殖能力的作用,大豆甙元拮抗慢性應(yīng)激模型大鼠抑郁作用的機(jī)制可能與大豆甙元治療后海馬中BDNF和NPY蛋白含量增加及免疫調(diào)節(jié)作用有關(guān)。
【圖文】：

4DG對(duì)大鼠強(qiáng)迫游泳的不動(dòng)時(shí)間影響大鼠在不可預(yù)知的應(yīng)激刺激后，不同程度地產(chǎn)生了抑郁癥狀，自主活動(dòng)減少，造模后進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中，與CG相比MG在慢性應(yīng)激作用下大鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P＜0.01);FG和DG大鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間顯著增加隨時(shí)間呈升高趨勢(shì)，與MG相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著意義(P＜0.05或P＜0.01)，見(jiàn)表4。2.5大鼠海馬區(qū)BDNF和NPY蛋白Westernblot檢測(cè)MG與CG相比，大鼠海馬BDNF和NPY的表達(dá)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);FG和DG與MG相比，BDNF和NPY蛋白表達(dá)明顯的增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見(jiàn)圖1。表3大鼠曠場(chǎng)試驗(yàn)得分(x±s，n=10)Tab．3Scoresofopenfieldtestinrat(x±s，n=10)GroupsLevelscoreVerticalscoreCG81.58±9.3520.62±6.53MG55.49±6.502)8.81±2.012)FG66.58±8.812)4)14.16±4.252)4)DG74.22±11.141)4)16.23±5.291)4)Note:ComparedwithCG，1)P＜0.05，2)P＜0.01;comparedwithMG，3)P＜0.05，4)P＜0.01.表4大鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間(x±s，n=10)Tab．4Immobilitytimeofforcedswimminginrat(x±s，n=10)GroupsSwimmingimmobilitytime(s)Swimmingfixedratio(%)CG65.59±8.8121.86±2.94MG120.64±19.452)40.21±6.482)FG95.16±9.432)4)31.72±3.142)4)DG83.81±9.362)4)27.94±3.122)4)Note:ComparedwithCG，1)P＜0.05，2)P＜0.01;comparedwithMG，3)P＜0.05，4)P＜0.01.2.6免疫組織化學(xué)檢測(cè)免疫組化陽(yáng)性的判定標(biāo)準(zhǔn)為胞膜和胞質(zhì)呈棕黃色染色，與CG海馬BDNF和NPY免疫組化單位面積陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目和積分光密度的表達(dá)相比較，MG大鼠海馬BDNF和NPY免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目和積分光密度水平顯著降低，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);FG和DG胞膜和

2)FG95.16±9.432)4)31.72±3.142)4)DG83.81±9.362)4)27.94±3.122)4)Note:ComparedwithCG，，1)P＜0.05，2)P＜0.01;comparedwithMG，3)P＜0.05，4)P＜0.01.2.6免疫組織化學(xué)檢測(cè)免疫組化陽(yáng)性的判定標(biāo)準(zhǔn)為胞膜和胞質(zhì)呈棕黃色染色，與CG海馬BDNF和NPY免疫組化單位面積陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目和積分光密度的表達(dá)相比較，MG大鼠海馬BDNF和NPY免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目和積分光密度水平顯著降低，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);FG和DG胞膜和胞質(zhì)呈明顯的免疫組化陽(yáng)性反應(yīng)，與MG相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)，見(jiàn)圖2，表5。2.7免疫器官重量及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的測(cè)定大鼠慢性應(yīng)激刺激后，與CG相比MG大鼠脾臟指數(shù)下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，DG與MG相比對(duì)脾臟指數(shù)增強(qiáng)作用顯著(P＜0.01);與CG相比MG大鼠白細(xì)胞數(shù)及淋巴細(xì)胞增殖能力顯著下降(P＜0.01)，F(xiàn)G和DG與MG相比白細(xì)胞數(shù)、抗體分泌細(xì)胞功能及淋巴細(xì)胞增殖能力顯著提高(P＜0.01)，見(jiàn)表6。圖1大鼠海馬區(qū)BDNF和NPY蛋白表達(dá)Fig．1ExpressionofBDNFandNPYinhippocampusofratsNote:ComparedwithCG，*.P＜0.05，＊＊.P＜0.01;comparedwithMG，#.P＜0.05，##.P＜0.01.圖2大鼠海馬BDNF和NPY免疫組織化學(xué)染色(×200)Fig．2ImmunohistochemistryofBDNFandNPYinhippo-campusofrats(×200)Note:A.CG;B.MG;C.GF;D.DG.表5大鼠海馬BDNF和NPY表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目和陽(yáng)性細(xì)胞積分光密度(x±s，n=10)Tab．5NumberofBDNFandNPYpositiveexpressioncellsandintegratedopticaldensityofpositivecells(x±s，n=10)GroupsBDNF(n)NPY(n)BDNF(od)NPY(od)CG11.52±2.45836.59±64.0411.84±2.91793.83±73.08MG5.66±2.112)332.14±44.192)6.00±1.422)339.51±42.042)FG9.25±1.641)4)3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2570019