發(fā)布時間：2019-10-11 14:20

【摘要】：目的探討褪黑素(Melatonin,MT)對發(fā)育早期鉛暴露小鼠海馬組織tau蛋白磷酸化的影響及可能的作用機制。方法健康C57BL/6小鼠隨機分為4組:正常對照組(Con組,全程正常飲用水喂養(yǎng))、發(fā)育早期鉛暴露組(Pb組,出生至出生后第21天母鼠給予0.2%醋酸鉛水)、單獨MT干預(yù)組(MT組,正常非暴露對照鼠在12月齡后給予含50mg/mL MT飲用水干預(yù)3個月)及MT干預(yù)聯(lián)合鉛暴露組(MT+Pb組,出生至出生后第21天母鼠給予0.2%醋酸鉛水,并于12月齡后給予含50mg/mL MT飲用水干預(yù)3個月)。采用石墨爐原子吸收光譜儀測定各組小鼠的血鉛和海馬鉛含量,Morris水迷宮檢測空間學(xué)習(xí)記憶功能,Western blot檢測海馬tau蛋白的磷酸化程度、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志分子GRP78和CHOP的蛋白表達水平。結(jié)果與Con組相比,Pb組小鼠血鉛和海馬鉛含量均明顯升高(均P0.05),給予MT干預(yù)并未影響血鉛和海馬鉛含量;且Pb組小鼠海馬tau蛋白磷酸化水平增強(P0.01),而給予MT干預(yù)后,相比Pb組,MT+Pb組小鼠海馬tau蛋白磷酸化水平明顯降低(P0.05);與Con組相比,Pb組小鼠海馬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志分子GRP78和CHOP蛋白表達水平均明顯升高(均P0.05),而MT干預(yù)后,相比Pb組,MT+Pb組GRP78和CHOP蛋白表達水平顯著下降(均P0.05)。結(jié)論 MT可改善發(fā)育早期鉛暴露小鼠海馬tau蛋白的過度磷酸化,并改善其學(xué)習(xí)記憶功能,其具體機制可能與調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有關(guān)。
【圖文】：

石墨爐原子吸收光譜法檢測血液和海馬組織中的鉛含量。如圖１所示：相比Ｃｏｎ組，Ｐｂ組小鼠血鉛含量明顯升高，而給予ＭＴ干預(yù)后，ＭＴ＋Ｐｂ組的血鉛含量也明顯升高（均Ｐ＜０．０１），與Ｐｂ組相比并未見明顯差異（Ｐ＞０．０５）。類似地，如圖１所示，Ｐｂ組小鼠海馬鉛含量也明顯升高，而給予ＭＴ干預(yù)后，ＭＴ＋Ｐｂ組的海馬組織鉛含量也明顯升高（均Ｐ＜０．０１），但與Ｐｂ組相比，海馬鉛含量亦未見顯著改變（Ｐ＞０．０５）。與Ｃｏｎ組比較，＊＊Ｐ＜０．０１圖１發(fā)育早期鉛暴露小鼠模型血鉛及海馬組織鉛含量Ｆｉｇ．１ＬｅａｄｌｅｖｅｌｓｉｎｔｈｅｂｌｏｏｄａｎｄｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｏｆｔｈｅＣ５７ＢＬ／６ｍｉｃｅｗｉｔｈｅｘｐｏｓｕｒｅｔｏＰｂａｔｅａｒｌｙｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓｔａｇｅ２．２ＭＴ干預(yù)對發(fā)育早期鉛暴露小鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能的影響通過Ｍｏｒｒｉｓ水迷宮實驗我們發(fā)現(xiàn)，相比Ｃｏｎ組，Ｐｂ組的小鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能存在明顯缺陷，如圖２所示：發(fā)育早期鉛暴露小鼠尋找隱藏平臺時間（潛伏期）明顯長于Ｃｏｎ組，而給予ＭＴ干預(yù)后，ＭＴ＋Ｐｂ組較Ｐｂ組潛伏期相對縮短，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；在第７天撤去隱藏平臺后，我們發(fā)現(xiàn)Ｐｂ組小鼠在目標(biāo)象限（隱藏平臺所在象限）停留時間明顯少于Ｃｏｎ組小鼠，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Ｐ＜０．０５），而給予ＭＴ干預(yù)后，較單獨鉛暴露組，ＭＴ＋Ｐｂ組小鼠在目標(biāo)平臺停留的時間明顯增加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Ｐ＜０．０５），如圖２所示�？梢姡l(fā)育早期鉛暴露組的

與Ｃｏｎ組比較，＊Ｐ＜０．０５＊＊Ｐ＜０．０１；與ＭＴ＋Ｐｂ組比較，＃Ｐ＜０．０５圖２ＭＴ對發(fā)育早期鉛暴露小鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能的影響Ｆｉｇ．２ＭＴａｔｔｅｎｕａｔｅｓｔｈｅｄｅｆｉｃｉｔｓｏｆｍｏｕｓｅｓｐａｔｉａｌｌｅａｒｎｉｎｇａｎｄｍｅｍｏｒｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙＰｂｅｘｐｏｓｕｒｅａｔｅａｒｌｙｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓｔａｇｅ２．３ＭＴ干預(yù)對發(fā)育早期鉛暴露小鼠ｔａｕ蛋白磷酸化的影響我們采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ檢測了各組小鼠海馬組織中磷酸化ｔａｕ蛋白的表達水平。如圖３所示：相比Ｃｏｎ組，Ｐｂ組小鼠ｔａｕ蛋白磷酸化（Ｓｅｒ３９６位點）水平顯著上調(diào)（Ｐ＜０．０１），而給予ＭＴ干預(yù)后，ＭＴ＋Ｐｂ組小鼠ｔａｕ蛋白磷酸化水平明顯下調(diào)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Ｐ＜０．０５）。可見，發(fā)育早期鉛暴露可導(dǎo)致ｔａｕ蛋白過度磷酸化，而ＭＴ干預(yù)可顯著改善ｔａｕ蛋白磷酸化程度。２．４ＭＴ干預(yù)對發(fā)育早期鉛暴露小鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志分子表達的影響進一步，，我們檢測了ＥＲｓｔｒｅｓｓ標(biāo)志性蛋白ＧＲＰ７８和ＣＨＯＰ的表達水平。如圖４所示：相比Ｃｏｎ組，Ｐｂ組ＧＲＰ７８和ＣＨＯＰ的表達均明顯增強（均Ｐ＜０．０５），而ＭＴ干預(yù)后，ＭＴ＋Ｐｂ組二者的表達較Ｐｂ組出現(xiàn)顯著下降（均Ｐ＜０．０５）�？梢姡l(fā)育早期的環(huán)境鉛暴露可引發(fā)ＥＲｓｔｒｅｓｓ，而ＭＴ可改善上述鉛暴露引發(fā)的ＥＲｓｔｒｅｓｓ．與Ｃｏｎ組比較，＊Ｐ＜０．０５＊＊Ｐ＜０．０１；與Ｐｂ組比較，＃Ｐ＜０．０５圖３ＭＴ干預(yù)對發(fā)育早期鉛暴
【作者單位】： 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院基因診斷研究室;華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)系;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.31171027,No.31670778,No.81371416) 福建省衛(wèi)生計生委青年課題資助項目(No.2016-1-55) 福建省自然科學(xué)基金資助項目(No.2016J05185)
【分類號】：R749.16

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

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【共引文獻】

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【相似文獻】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

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本文編號：2547531