本文選題：SAMP8小鼠 + 輕度認(rèn)知功能障礙��； 參考：《河北醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：目的：應(yīng)用快速老化SAMP8小鼠作為研究對(duì)象，觀察輕度認(rèn)知功能障礙期（MCI）去勢(shì)及雙氫睪酮（DHT）補(bǔ)充治療后其行為學(xué)和形態(tài)學(xué)的變化，以明確MCI發(fā)展為阿爾茨海默�。ˋlzheimer’s disease, AD）的危險(xiǎn)因素，為AD的早期預(yù)防和早期治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：選用健康雄性5月齡SAMP8小鼠41只。隨機(jī)分為假手術(shù)組（簡(jiǎn)稱P8組）、去勢(shì)組、去勢(shì)＋DHT補(bǔ)充治療組（簡(jiǎn)稱DHT組）。去勢(shì)組和DHT組小鼠去除睪丸。DHT組于去勢(shì)術(shù)后1天給予頸背皮下注射DHT1mg/(kg·day)，其余各組注射等量醫(yī)用玉米油，每天上午注射1次，共注射60天。所有小鼠飼養(yǎng)于正常溫控、光照和自由飲食條件下。選取17只健康雄性SAMR1小鼠作為同源正常對(duì)照組（簡(jiǎn)稱R1組）。 1.血清睪酮含量的測(cè)定：選用5月齡R1組和P8組以及7月齡R1組、P8組、去勢(shì)組和DHT組小鼠，每組各5只。各組小鼠采取斷頭取血，靜置后，3000轉(zhuǎn)室溫離心20分鐘，取上清，-20℃保存待測(cè)。采用碘[125I]睪酮放射免疫分析試劑盒檢測(cè)血清睪酮含量。 2. Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)：每組選用7只小鼠，將各組小鼠置于迷宮實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下飼養(yǎng)2天。訓(xùn)練在每天上午9:00～11:00進(jìn)行。定位航行實(shí)驗(yàn)：將Morris水迷宮平均分為4個(gè)象限，平臺(tái)放入第Ⅰ象限中。小鼠分別自4個(gè)象限同一點(diǎn)面向池壁進(jìn)水，視頻采集系統(tǒng)跟蹤并記錄小鼠找到平臺(tái)所需的時(shí)間，實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行5天�？臻g探索實(shí)驗(yàn)：第6天撤掉平臺(tái)，記錄小鼠120秒內(nèi)跨越平臺(tái)的次數(shù)。 3.組織切片的制備及染色觀察：Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，各組小鼠6!水合氯醛腹腔注射麻醉，開(kāi)胸暴露心臟，將輸液針刺入左心室，同時(shí)剪開(kāi)右心耳，用生理鹽水快速?zèng)_洗，，4!多聚甲醛灌注。自上丘至視交叉節(jié)段取腦組織，用刀片把腦組織從正中矢狀位分為左右兩半，一半用于Golgi染色，一半制備成石蠟切片，分別用于HE染色、Nissl染色和抗Aβ免疫組織化學(xué)染色。 結(jié)果： 1.血清睪酮含量的測(cè)定結(jié)果：5月齡和7月齡R1組血清睪酮含量高于同月齡P8組。兩組7月齡小鼠較5月齡小鼠血清睪酮含量均下降，但P8組小鼠下降程度（28!）明顯大于R1組（5!）。 2. Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果：P8組逃避潛伏期顯著長(zhǎng)于R1組（P0.05）；去勢(shì)組逃避潛伏期顯著長(zhǎng)于其它各組（P0.05）；DHT組逃避潛伏期較去勢(shì)組明顯縮短（P0.05），但與P8組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。R1組跨越平臺(tái)次數(shù)多于其它各組(P0.05)，去勢(shì)組跨越平臺(tái)次數(shù)明顯少于P8組和DHT組（P0.05），P8組和DHT組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 3. HE染色結(jié)果：R1組海馬神經(jīng)元排列緊密整齊，CA1區(qū)結(jié)構(gòu)正常。P8組神經(jīng)元排列較疏松紊亂，細(xì)胞層數(shù)減少。去勢(shì)組細(xì)胞排列紊亂、疏松，海馬CA1區(qū)神經(jīng)元彌漫性空泡變性，核固縮、深染明顯。DHT組神經(jīng)元細(xì)胞的病理改變較去勢(shì)組有明顯的改善。 4．Nissl染色結(jié)果：R1組海馬神經(jīng)元形態(tài)規(guī)則，排列整齊且密集，細(xì)胞數(shù)與其它各組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。P8組海馬神經(jīng)元尼氏體較稀疏，部分細(xì)胞核深染、固縮。去勢(shì)組海馬神經(jīng)元排列稀疏、紊亂，較多細(xì)胞核固縮、濃密深染，胞漿內(nèi)尼氏體減少。DHT組與去勢(shì)組相比細(xì)胞數(shù)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。DHT組與P8組相比無(wú)差異（P0.05）。 5．Aβ免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：R1組海馬CA1區(qū)Aβ陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和吸光度與其它各組相比減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。DHT組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和吸光度與去勢(shì)組相比減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），但與P8組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 6．Golgi染色結(jié)果：R1組海馬CA1區(qū)第二、三級(jí)樹(shù)突棘排列整齊且密集，形態(tài)規(guī)則，樹(shù)突棘密度為1.30±0.17/μm，與其它各組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。P8組樹(shù)突棘密度為1.16±0.09/μm。DHT組樹(shù)突棘密度1.15±0.07/μm較去勢(shì)組樹(shù)突棘密度0.78±0.04/μm明顯增多（P0.05），但與P8組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： 1．SAMP8小鼠從進(jìn)入MCI期（5月齡）發(fā)展至AD期（7月齡），血清睪酮水平下降程度明顯高于SAMR1小鼠，提示SAMP8小鼠雄激素水平降低在某種程度上可能是發(fā)展為癡呆的危險(xiǎn)因素。 2．SAMP8小鼠MCI期去勢(shì)可加重學(xué)習(xí)認(rèn)知功能障礙并導(dǎo)致海馬神經(jīng)元疏松紊亂、腫脹變性，凋亡數(shù)目增加，神經(jīng)元大量丟失以及Aβ沉著增加。提示雄激素缺乏能加速其向AD發(fā)展的進(jìn)程。 3．SAMP8小鼠去勢(shì)后給予雄激素補(bǔ)充治療能逆轉(zhuǎn)學(xué)習(xí)記憶能力下降和海馬神經(jīng)元病理?yè)p傷，延緩去勢(shì)所致的向AD發(fā)展的快速進(jìn)程。
[Abstract]:Objective : To investigate the behavioral and morphological changes of mild cognitive impairment ( MCI ) and dihydrotestosterone ( DHT ) after the treatment of mild cognitive impairment ( MCI ) and dihydrotestosterone ( DHT ) during the treatment of Alzheimer ' s disease ( AD ) , and to provide experimental basis for early prevention and early treatment of AD .

Methods : Forty - four healthy male 5 - month - old mice were randomly divided into two groups : sham operation group ( group P8 ) , castration group , castration + DHT replacement therapy group ( DHT group ) .

1 . Determination of serum testosterone level : 5 months old R1 group and P8 group and 7 month - old R1 group , P8 group , ovariectomized group and DHT group mice were selected . Each group was divided into five groups . Each group of mice took blood and left standing , centrifuged at 3000 rpm for 20 minutes , the supernatant was collected , and the supernatant was stored at -20 鈩

本文編號(hào)：2044262