本文選題：普羅布考 + 血管性癡呆　； 參考：《河北醫(yī)科大學(xué)》2013年碩士論文

【摘要】：目的：血管性癡呆(Vascular dementia,VD)已經(jīng)成為一個重要的公共衛(wèi)生問題，以缺血缺氧性或出血性腦損傷造成的病理組織學(xué)損傷和進行性智能減退為特征。VD是僅次于阿爾茨海默病的第二大癡呆類型，它的發(fā)病率逐年增加。VD的確切的發(fā)病機制還不是很清楚，但目前公認腦缺血缺氧是VD的主要病因。腦缺血缺氧損傷后產(chǎn)生大量的自由基，過量的自由基導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化、蛋白質(zhì)喪失功能、DNA破壞等。海馬是學(xué)習(xí)記憶的重要結(jié)構(gòu)，并且對腦缺血缺氧極其敏感。因此，腦缺血缺氧極易導(dǎo)致海馬神經(jīng)元凋亡，從而使學(xué)習(xí)記憶能力下降。神經(jīng)元凋亡是一種受基因調(diào)控的自主性、程序性細胞死亡過程，是腦缺血再灌注損傷的重要環(huán)節(jié)。bcl-2家族成員在細胞凋亡的基因調(diào)控過程中起著至關(guān)重要的作用。bcl-2抑制凋亡，bax促進凋亡，二者共同調(diào)控凋亡程序，是最經(jīng)典的凋亡調(diào)控基因。 腦缺血缺氧后神經(jīng)元凋亡與氧化應(yīng)激有關(guān)，普羅布考（probucol）具有降脂、清除自由基、抗氧化等作用。有研究證明普羅布考具有很強的抗氧化作用。目前，普羅布考用于治療血管性癡呆的研究很少。本研究旨在通過觀察普羅布考對血管性癡呆大鼠認知功能及海馬區(qū)bcl-2、bax蛋白表達的影響，探索其可能的作用機制，為普羅布考的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。 方法：選取健康雄性SD大鼠，采用永久性結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈的方法建立血管性癡呆大鼠模型，將大鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組、普羅布考組，每組12只。普羅布考組灌胃給予普羅布考500mg/kg/d，同時，假手術(shù)組和模型組給予等量的羧甲基纖維素鈉。給藥8周后，采用Morris水迷宮實驗，對各組大鼠進行學(xué)習(xí)記憶能力測試，第1-4天進行定位航行實驗測定逃避潛伏期時間，第5天進行空間搜索實驗測定穿越平臺次數(shù)。行為學(xué)測試完畢后，取材，用western blot方法和免疫組織化學(xué)染色方法測定海馬區(qū)bcl-2和bax蛋白的表達變化。 結(jié)果： 1普羅布考對血管性癡呆大鼠行為學(xué)的影響 1.1逃避潛伏期結(jié)果 第1-4天測定的逃避潛伏期時間表示大鼠的學(xué)習(xí)能力，逃避潛伏期時間越短學(xué)習(xí)能力越強。三組大鼠的逃避潛伏期時間均隨訓(xùn)練天數(shù)的增加而縮短，說明訓(xùn)練可以增強學(xué)習(xí)能力，但是各組大鼠的學(xué)習(xí)能力卻存在差異。模型組與假手術(shù)組相比，第1-4天模型組大鼠的逃避潛伏期時間均明顯延長（P㩳0.05）；普羅布考組與模型組相比，第1天大鼠的逃避潛伏期時間無顯著差異（P㧐0.05），第2-4天普羅布考組大鼠的逃避潛伏期時間明顯縮短（P㩳0.05）；普羅布考組與假手術(shù)組相比，第1-4天大鼠的逃避潛伏期時間均無顯著差異（P㧐0.05）。 1.2穿越平臺次數(shù)結(jié)果 第5天測定的穿越平臺次數(shù)表示大鼠的記憶能力，穿越平臺次數(shù)越多記憶能力越強。模型組與假手術(shù)組相比，模型組大鼠穿越平臺次數(shù)明顯減少（1.75±1.14VS5.58±1.83,P㩳0.05）；普羅布考組與模型組相比，，普羅布考組大鼠穿越平臺次數(shù)明顯增多（4.50±1.38VS1.75±1.14,P㩳0.05）；普羅布考組與假手術(shù)組相比，大鼠穿越平臺次數(shù)無顯著差異（4.50±1.38VS5.58±1.83,P㧐0.05）。 2普羅布考對血管性癡呆大鼠海馬區(qū)bcl-2和bax蛋白表達的影響 2.1western blot結(jié)果 2.1.1海馬區(qū)bcl-2蛋白的表達情況 模型組與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬區(qū)bcl-2蛋白的表達水平明顯降低（1.0783±0.1745VS1.4017±0.0880,P㩳0.05）；普羅布考組與模型組相比，普羅布考組大鼠海馬區(qū)bcl-2蛋白的表達水平明顯增高（1.5117±0.1734VS1.0783±0.1745,P㩳0.05）；普羅布考組與假手術(shù)組相比，大鼠海馬區(qū)bcl-2蛋白的表達水平無明顯差異（1.5117±0.1734VS1.4017±0.0880,P㧐0.05）。 2.1.2海馬區(qū)bax蛋白的表達情況 模型組與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬區(qū)bax蛋白的表達水平明顯增高（0.4467±0.1133VS0.2050±0.0748,P㩳0.05）；普羅布考組與模型組相比，普羅布考組大鼠海馬區(qū)bax蛋白的表達水平明顯降低（0.2300±0.0906VS0.4467±0.1133,P㩳0.05）；普羅布考組與假手術(shù)組相比，大鼠海馬區(qū)bax蛋白的表達水平無明顯差異（0.2300±0.0906VS0.2050±0.0748,P㧐0.05）。 2.2免疫組織化學(xué)染色結(jié)果 2.2.1大鼠海馬CA1區(qū)bcl-2蛋白表達的陽性細胞情況 模型組與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬CA1區(qū)bcl-2蛋白表達的陽性細胞數(shù)明顯減少（25.00±4.29VS35.00±3.03,P㩳0.05）；普羅布考組與模型組相比，普羅布考組大鼠海馬CA1區(qū)bcl-2蛋白表達的陽性細胞數(shù)明顯增多（39.17±4.12VS25.00±4.29,P㩳0.05）；普羅布考組與假手術(shù)組相比，大鼠海馬CA1區(qū)bcl-2蛋白表達的陽性細胞數(shù)無明顯差異（39.17±4.12VS35.00±3.03,P㧐0.05）。 2.2.2大鼠海馬CA1區(qū)bax蛋白表達的陽性細胞情況 模型組與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬CA1區(qū)bax蛋白表達的陽性細胞數(shù)明顯增多（49.33±2.81VS25.33±3.83,P㩳0.05）；普羅布考組與模型組相比，普羅布考組大鼠海馬CA1區(qū)bax蛋白表達的陽性細胞數(shù)明顯減少（27.00±4.65VS49.33±2.81,P㩳0.05）；普羅布考組與假手術(shù)組相比，大鼠海馬CA1區(qū)bax蛋白表達的陽性細胞數(shù)無明顯差異（27.00±4.65VS25.33±3.83,P㧐0.05）。 結(jié)論： 1本研究采用大鼠雙側(cè)頸總動脈永久性結(jié)扎的方法造成前腦慢性缺血可以很好的模擬血管性癡呆，是理想的VD動物模型。 2VD大鼠海馬組織中存在細胞凋亡因子的表達異常，提示細胞凋亡機制參與了血管性癡呆的發(fā)病過程。 3普羅布考可以提高VD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，改善VD大鼠的認知功能。 4普羅布考可能通過提高VD大鼠海馬區(qū)bcl-2蛋白的表達、減少VD大鼠海馬區(qū)bax蛋白的表達，從而抑制神經(jīng)元的凋亡來發(fā)揮保護神經(jīng)元的作用。
[Abstract]:Objective: Vascular dementia (VD) has become an important public health problem. Histopathological injury and progressive intellectual hypothyroidism caused by ischemic hypoxia or hemorrhagic brain injury are the second major dementia types next to Alzheimer's disease. The incidence of.VD is increasing by year and year by year with the exact incidence of.VD. The mechanism of the disease is not very clear, but it is recognized that ischemic anoxia is the main cause of VD. A large number of free radicals are produced after the injury of cerebral ischemia and hypoxia. Excessive free radicals lead to lipid peroxidation, protein loss and DNA destruction. Hippocampus is an important structure of learning and memory and is extremely sensitive to cerebral ischemia and hypoxia. Therefore, cerebral ischemia and hypoxia It is very easy to lead to apoptosis of hippocampal neurons and thus decrease the learning and memory ability. Apoptosis is a kind of autonomic regulation, programmed cell death process and is an important part of cerebral ischemia reperfusion injury..bcl-2 family members play an important role in.Bcl-2 inhibition of apoptosis and Bax promotion in the process of apoptosis. Apoptosis is the two most common apoptosis regulating gene.
Apoptosis is associated with oxidative stress after cerebral ischemia and hypoxia. Probuol (probucol) has the effects of lowering lipid, removing free radicals, and antioxidation. Studies have shown that probucol has a strong antioxidant effect. To explore the possible mechanism of cognitive function and the expression of Bcl-2 and Bax protein in the hippocampus of rats, and to provide experimental evidence for the clinical application of probucol.
Methods: a healthy male SD rat was selected to establish a rat model of vascular dementia by permanent ligature of bilateral common carotid arteries. The rats were randomly divided into sham operation group, model group and probucol group with 12 rats in each group. The probucol group was given 500mg/kg/d for perropucol, and the same amount of carboxymethyl fiber was given in sham operation group and model group at the same time. After 8 weeks, the Morris water maze test was used to test the learning and memory ability of the rats in each group. On the 1-4 day, the escape latency time was measured by the navigation experiment, and the number of the crossing platform was measured by the space search experiment on the fifth day. After the behavior test, the material was taken, the Western blot method and the immunohistochemical staining prescription were used. Methods the expression of Bcl-2 and Bax protein in hippocampus was measured.
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本文編號：1993213