本文選題：阿爾茨海默病 + β淀粉樣蛋白��； 參考：《中國老年學(xué)雜志》2017年13期

【摘要】：目的探討以β淀粉樣蛋白(Aβ)42為靶抗原篩選人源天然單鏈抗體(sc Fv)噬菌體抗體庫中的特異性抗體對(duì)阿爾茨海默病(AD)模型鼠中淀粉樣沉積的影響。方法以Aβ42抗原包被免疫管,對(duì)人源天然sc Fv噬菌體抗體庫進(jìn)行篩選,經(jīng)過3輪吸附-洗脫-擴(kuò)增淘選富集,制備單克隆噬菌體抗體顆粒,用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測sc Fv的結(jié)合活性,得到一株陽性克隆sc Fv23。采用Western印跡和免疫組化的方法檢測了sc Fv23與Aβ42單體、寡聚體、纖維和鼠腦中Aβ沉積的結(jié)合能力。并通過甲氮甲唑藍(lán)(MTT)法檢測sc Fv23對(duì)Aβ42寡聚體引起細(xì)胞毒性的影響,同時(shí)采用硫黃素-T熒光法(Th T-F)測定sc Fv23對(duì)Aβ42聚集形成纖維的影響。最后,通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)檢測了sc Fv23對(duì)AD鼠模型腦中Aβ42沉積的影響。結(jié)果通過對(duì)人源天然sc Fv噬菌體抗體庫進(jìn)行篩選得到一株與Aβ42具有高親和力的克隆sc Fv23。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)sc Fv23可以特異性識(shí)別Aβ42寡聚體,纖維聚集體和鼠腦中Aβ42沉積,但是不能與Aβ42單體特異性結(jié)合。根據(jù)體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果,sc Fv23可以有效抑制Aβ42寡聚體所誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡,并且sc Fv23可以抑制Aβ42纖維聚集體的形成。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),sc Fv23可以有效清除AD鼠模型中Aβ42沉積。結(jié)論通過噬菌體文庫篩選得到的sc Fv23能夠特異性識(shí)別腦組織中的淀粉樣沉積,并且有效抑制轉(zhuǎn)基因鼠中淀粉樣沉積的形成。體外實(shí)驗(yàn)表明sc Fv23可以有效抑制Aβ42寡聚體所誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性。特異性識(shí)別Aβ42的sc Fv可能會(huì)成為治療AD的一種有效策略。
[Abstract]:Objective to study the effect of specific antibodies from human natural scFv phage antibody library on amyloid deposition in mice with Alzheimer's disease (AD) model. Methods A 尾 42 antigen was used to coat the immune tube to screen the natural Sc Fv phage antibody library. The phage antibody particles were prepared by three rounds of adsorption, elution, amplification and enrichment. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to detect the binding activity of sc FV, and a positive clone sc Fv23 was obtained. The binding ability of sc Fv23 to A 尾 42 monomer, oligomer, fiber and A 尾 deposition in brain was detected by Western blot and immunohistochemistry. The effects of SC Fv23 on cytotoxicity induced by A 尾 42 oligomer were detected by methazolyl methazolium (MTT) method, and the effect of SC Fv23 on the aggregation of A 尾 42 fibers was determined by thiolin-T fluorescence assay (Th T-F). Finally, the effects of sc Fv23 on A 尾 42 deposition in the brain of AD rats were investigated in vivo. Results A clone sc Fv23 with high affinity to A 尾 42 was obtained by screening human natural sc Fv phage antibody library. It was found that sc Fv23 could specifically recognize A 尾 42 oligomers, fibrous aggregates and A 尾 42 deposits in the brain, but could not bind to A 尾 42 monomers. According to the results of in vitro experiments, Sc Fv23 could effectively inhibit the cell death induced by A 尾 42 oligomer, and SC Fv23 could inhibit the formation of A 尾 42 fiber aggregation. The results showed that Sc Fv23 could effectively eliminate A 尾 42 deposition in AD mice. Conclusion sc Fv23 screened by phage display library can specifically recognize amyloid deposition in brain tissue and inhibit the formation of amyloid deposition in transgenic mice. In vitro experiments showed that sc Fv23 could effectively inhibit the cytotoxicity induced by A 尾 42 oligomer. Sc FV specific recognition of A 尾 42 may be an effective strategy in the treatment of AD.
【作者單位】： 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;廣東番禺中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科;廣州醫(yī)科大學(xué)臨床技能中心;
【分類號(hào)】：R749.16

【參考文獻(xiàn)】

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1 黃福德;;β淀粉樣肽在阿爾茲海默病中作用的逐步認(rèn)識(shí)[J];生命科學(xué);2014年01期

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【共引文獻(xiàn)】

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7 鄭江華;陳開;朱彥斌;汪海飛;陳志龍;雍熙;;復(fù)雜Stanford B型主動(dòng)脈夾層的腔內(nèi)治療策略[J];中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2015年08期

8 鄭江華;陳開;朱彥斌;汪海飛;陳志龍;雍熙;;腔內(nèi)修復(fù)治療36例復(fù)雜性急性Stanford B型主動(dòng)脈夾層的短期臨床療效分析[J];中國循環(huán)雜志;2015年08期

9 譚孟杰;張磊;周建;景在平;;炎性反應(yīng)與主動(dòng)脈夾層診斷及預(yù)后關(guān)系的研究進(jìn)展[J];中國普通外科雜志;2015年06期

10 劉元慶;盛國太;;近端漂下法在復(fù)雜B型主動(dòng)脈夾層腔內(nèi)隔絕術(shù)的應(yīng)用[J];實(shí)用臨床醫(yī)學(xué);2015年04期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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1 姚傳順;劉金有;楊世喜;郭佳;;64排螺旋CT對(duì)主動(dòng)脈夾層的診斷價(jià)值[J];南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年02期

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4 陳雷;韓濤;黃烽;丁杭;;支架“象鼻”在24例DeBakeyⅠ型主動(dòng)脈夾層動(dòng)脈瘤應(yīng)用的臨床分析[J];福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年02期

5 范瑞新;;主動(dòng)脈夾層的治療對(duì)策[J];嶺南心血管病雜志;2011年01期

6 黃烽;韓濤;陳雷;丁杭;姚祖武;;主動(dòng)脈夾層覆膜支架植入術(shù)后常見并發(fā)癥33例分析[J];福建醫(yī)藥雜志;2010年06期

7 張本青;趙振華;葉蘊(yùn)青;魏波;;DeBakeyⅢ型主動(dòng)脈夾層及其覆膜支架腔內(nèi)隔絕術(shù)[J];中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展;2010年10期

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9 常光其;李曉曦;伍淑文;李松奇;姚陳;李梓倫;王深明;;Stanford B型主動(dòng)脈夾層121例血管腔內(nèi)修復(fù)短中期結(jié)果分析[J];中華普通外科學(xué)文獻(xiàn)(電子版);2009年05期

10 沈文俊;郭大喬;符偉國;;Stanford B型主動(dòng)脈夾層腔內(nèi)手術(shù)回顧及中期隨訪[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年06期

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3 費(fèi)晉秀,任軍,苗繼延;單鏈抗體構(gòu)建、表達(dá)及臨床應(yīng)用的研究現(xiàn)狀[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;2000年01期

4 耿春蘭;單鏈抗體的生物學(xué)特性及應(yīng)用前景[J];邯鄲醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校學(xué)報(bào);2000年05期

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7 劉德新,李小鷹,陳瑞晗,郝好杰,王琰;人抗地高辛單鏈抗體在大腸桿菌的表達(dá)[J];中國分子心臟病學(xué)雜志;2002年02期

8 王臣,侯利華,張彥明,李建民,廖振林,杜桂鑫,陳薇,孫啟鴻,童貽剛;抗人整合素ανβ_3單鏈抗體的構(gòu)建和表達(dá)[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2004年02期

9 李民友,虞東方,張海濤,馮哲玲,李秀英,劉祖國,朱振宇;應(yīng)用蛋白質(zhì)L檢測和純化培養(yǎng)上清液中的單鏈抗體[J];免疫學(xué)雜志;2004年03期

10 楊康鵑,孟繁平,de Baets M.;抗乙酰膽堿受體單鏈抗體的純化[J];延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào);2004年02期

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4 汪世華;胡開輝;楊燕凌;邱君志;;基因工程單鏈抗體研究[A];2005全國第二屆核酸疫苗研討會(huì)論文集[C];2005年

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7 武婕;柯昌文;李暉;陳秋霞;周杰;張欣;鄒麗容;;特異結(jié)合人禽流感病毒H5N1的scFv分子生物學(xué)活性性能鑒定[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點(diǎn)研討會(huì)論文集[C];2011年

8 李揚(yáng);王大章;房思煉;楊西川;廖楚航;鄭光勇;;抗人血管內(nèi)皮生長因子單鏈抗體的提純與活性鑒定[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

9 施恒亮;朱筱娟;;抗aFGF單鏈抗體抗腫瘤活性的初步研究及其基因的修飾和表達(dá)[A];吉林省第六屆生命科學(xué)大型學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)論文集[C];2008年

10 唐勇;甄永蘇;;抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移單鏈抗體的構(gòu)建、表達(dá)和三維結(jié)構(gòu)模建[A];中國生物工程學(xué)會(huì)第三次全國會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2001年

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6 楊西川;抗人血管內(nèi)皮生長因子單鏈抗體的構(gòu)建、表達(dá)及活性鑒定[D];華西醫(yī)科大學(xué);1998年

7 婁e，

本文編號(hào)：1841317