重組pIRES-AD7c-NTP質(zhì)粒的構(gòu)建表達(dá)及其對(duì)PC12細(xì)胞凋亡的影響
本文選題:阿爾茨海默病相關(guān)神經(jīng)絲蛋白 + 質(zhì)粒構(gòu)建。 參考:《中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志》2015年05期
【摘要】:目的構(gòu)建重組pIRES-AD7c-NTP質(zhì)粒,探究其對(duì)PC12細(xì)胞凋亡的影響。方法構(gòu)建pIRESAD7c-NTP重組質(zhì)粒,通過(guò)脂質(zhì)體體外轉(zhuǎn)染至PC12細(xì)胞內(nèi),RT-PCR檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白bcl-2和bax的mRNA表達(dá)變化含量變化。結(jié)果成功構(gòu)建pIRES-AD7c-NTP重組質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染至PC12細(xì)胞內(nèi);重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組出現(xiàn)了明顯的細(xì)胞凋亡,流式細(xì)胞儀檢測(cè)出典型凋亡峰;重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組中bcl-2表達(dá)低于對(duì)照組,bax表達(dá)高于對(duì)照組。結(jié)論 AD7c-NTP重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組PC12細(xì)胞內(nèi)bcl-2/bax表達(dá)異常,說(shuō)明AD7c-NTP增加凋亡促進(jìn)蛋白的表達(dá)、同時(shí)減少凋亡抑制蛋白的表達(dá),可見(jiàn)AD7c-NTP可導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生凋亡,為后續(xù)研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to construct recombinant pIRES-AD7c-NTP plasmid and investigate its effect on apoptosis of PC12 cells.Methods pIRESAD7c-NTP recombinant plasmid was constructed and transfected into PC12 cells by liposome in vitro. The changes of mRNA expression of bcl-2 and bax were detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR).Results the recombinant plasmid of pIRES-AD7c-NTP was successfully constructed and transfected into PC12 cells, the apoptosis was observed in the transfected group, and the typical apoptotic peak was detected by flow cytometry. The expression of bcl-2 in the transfected group was lower than that in the control group, and the expression of bcl-2 in the transfected group was higher than that in the control group.Conclusion the abnormal expression of bcl-2/bax in PC12 cells transfected with AD7c-NTP recombinant plasmid indicates that AD7c-NTP can increase the expression of apoptosis-promoting protein and decrease the expression of apoptosis-inhibiting protein. It can be seen that AD7c-NTP can induce neuronal apoptosis and provide experimental basis for further study.
【作者單位】: 吉林省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】:吉林省科委課題(200705464)
【分類(lèi)號(hào)】:R749.16
【共引文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1751808
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