SAMP8小鼠海馬內(nèi)CD147與NCT的表達及其相互關(guān)系
本文選題:CD 切入點:NCT 出處:《神經(jīng)解剖學(xué)雜志》2017年03期
【摘要】:目的:運用免疫熒光組織化學(xué)和免疫共沉淀技術(shù)(Co IP),探討快速老化小鼠(SAMP8)海馬組織中細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(CD147)和單過性跨膜蛋白(NCT)間的表達情況,為尋找阿爾茨海默病(Alzheimer disease,AD)相關(guān)的治療策略和方向提供理論依據(jù)。方法:3月齡雄性SAMP8小鼠6只。3只小鼠用于免疫熒光組織化學(xué)實驗,經(jīng)4%多聚甲醛灌注、取腦、石蠟包埋后,冠狀面切片進行組織化學(xué)染色,觀察CD147與NCT在海馬區(qū)是否存在共定位的關(guān)系。3只用于Co IP實驗,提取海馬組織蛋白,與CD147抗體孵育后加入瓊脂糖微珠A/G孵育過夜,離心后上清用于Western Blot實驗檢測CD147與NCT間的相互作用關(guān)系。結(jié)果:SAMP8海馬區(qū),CD147和NCT的陽性表達部位主要分布于CA1、CA3、CA4區(qū)的錐體細胞層和齒狀回顆粒細胞層,二者在CA1、CA3區(qū)表達較強;標記部位為胞膜、胞漿,部分神經(jīng)元在胞漿進核周處存在不連續(xù)的點、線狀共標記部位。Co IP實驗顯示CD147與成熟型NCT相互作用,不與非成熟型NCT相互作用。結(jié)論:CD147和NCT在SAMP8小鼠海馬區(qū)錐體細胞層表達較高,推測二者可能與海馬的學(xué)習(xí)記憶功能密切相關(guān);CD147與NCT存在相互作用的關(guān)系,推測CD147可能參與調(diào)節(jié)γ-分泌酶活性。
[Abstract]:Objective: to investigate the expression of extracellular matrix metalloproteinase-inducible factor CD147 (CD147) and single transmembrane protein (NCTs) in hippocampus of rapidly aging mice (SAMP8) by immunofluorescence histochemistry and co-immunoprecipitation techniques.To provide theoretical basis for finding the treatment strategy and direction related to Alzheimer disease (AD).Methods six male SAMP8 mice at the age of 3 months were used in immunofluorescence histochemistry experiment. The brains were taken from the brain and embedded in paraffin wax, and the sections were stained with histochemistry on the coronal sections after perfusion with 4% paraformaldehyde.The co-localization of CD147 and NCT in hippocampus was observed. 3 was used only for Co IP experiment to extract hippocampal tissue protein, incubate with CD147 antibody and incubate with agarose microbead A- / G overnight.The supernatant of centrifuge was used to detect the interaction between CD147 and NCT by Western Blot experiment.Results the positive expression sites of CD147 and NCT were mainly located in the pyramidal cell layer and dentate gyrus granulosa cell layer in CA1 / CA3 / CA4 area in the hippocampal area of SAMP8.There were discontinuous points in some neurons around the cytoplasmic nucleus. The linear colabeling site. CoIP experiment showed that CD147 interacted with mature NCT and not with immature NCT.Conclusion the expression of CD147 and NCT is higher in the pyramidal layer of hippocampus of SAMP8 mice. It is speculated that they may be closely related to the learning and memory function of hippocampus. It is suggested that CD147 may be involved in the regulation of 緯 -secretase activity.
【作者單位】: 河北醫(yī)科大學(xué)人體解剖學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(31471145) 河北省自然科學(xué)基金資助項目(H2016206581) 河北省教育廳重點項目(ZD2016088) 2016年河北省研究生創(chuàng)新資助項目
【分類號】:R749.16
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,本文編號:1711902
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