電休克對cuprizone誘發(fā)小鼠腦白質(zhì)脫髓鞘的修復(fù)作用
發(fā)布時間:2018-03-24 22:18
本文選題:電休克 切入點:小鼠 出處:《新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文
【摘要】:背景腦白質(zhì)病的病理特點為髓鞘的減少,脫失和壞死,進而引起神經(jīng)纖維的形態(tài)和功能變化,腦白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的異?赡苁蔷窦膊〉陌l(fā)病機制之一。臨床上應(yīng)用電休克治療(electroconvulsive therapy,ECT)能夠有效治療多種精神疾病,然而其治療機制尚不清楚。對于電休克治療機制的研究,有可能成為研究精神疾病發(fā)病機制的突破口。目的研究電休克(electroconvulsive shock,ECS)對雙環(huán)己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)所致小鼠腦白質(zhì)脫髓鞘修復(fù)的影響,獲得ECS對胼胝體、前額葉和海馬髓鞘堿性蛋白(Myelin basic protein,MBP)和2',3'-環(huán)核苷酸3'-磷酸二酯酶(2',3'-cyclic nucleotide 3'phosphodiesterase,CNPase)影響的研究數(shù)據(jù),觀察CPZ造模過程中行為學(xué)改變的情況,以及ECS對CPZ所致脫髓鞘模型小鼠的行為學(xué)影響。為研究電休克治療機制提供相關(guān)信息,進而對研究精神疾病的病理機制提供幫助。方法1.實驗動物分組:選取6-8周齡、體重20-25g的健康雄性C57BL/6小鼠共120只,隨機分為4組,分別為CNT+Sham組、CNT+ECS組、CPZ+Sham組和CPZ+ECS組,每組30只小鼠。2.CPZ造模:CPZ+Sham組和CPZ+ECS組在CPZ造模過程中統(tǒng)稱為CPZ組,每天喂食含有0.2%的CPZ的飼料,共6周;CNT+Sham組和CNT+ECS組統(tǒng)稱為CNT組,同等喂養(yǎng)環(huán)境下喂食正常飼料,6周末每組隨機選取12只處死。3.ECS干預(yù):CPZ造模結(jié)束后,CNT+ECS組和CPZ+ECS組給予ECS刺激,CNT+Sham組和CPZ+Sham組給予相應(yīng)偽刺激,連續(xù)給予2周刺激后每組隨機選取12只處死,剩余小鼠繼續(xù)給予2周刺激后,于10周末處死。4.蛋白檢測:免疫熒光方法檢測胼胝體MBP表達,western blot方法檢測小鼠前額葉與海馬MBP和CNPase表達。5.統(tǒng)計方法:采用SPSS 21.0軟件包進行數(shù)據(jù)分析,符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來表示,兩組間均數(shù)比較采用獨立樣本t檢驗,多組計量資料采用單因素方差分析,P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1.實驗過程中小鼠的行為學(xué)改變:CPZ造模過程中CPZ組小鼠體重和進食量明顯低于CNT組(P0.05)。8周末和10周末,四組小鼠的體重組間比較差異均有顯著性,P分別為0.000和0.017。第8周和第10周四組小鼠的周進食量組間比較差異均有顯著性,P分別為0.000和0.002;曠場實驗中CPZ造模前四組小鼠各項指標(biāo)差異均無顯著性,6周末四組小鼠的運動總距離和直立次數(shù)差異有顯著性,P分別為0.022和0.000,中心距離和中心距離百分比差異無顯著性,8周末四組小鼠的運動總距離和直立次數(shù)差異有顯著性,P值均為0.000;中心距離差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(F=4.593,P=0.029),而中心距離占比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。10周末四組小鼠的運動總距離和直立次數(shù)差異有顯著性,P值均為0.000;中心距離占比差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(F=8.361,P=0.000),而中心距離差異無統(tǒng)計學(xué)意義;蔗糖水實驗中,造模前和6周末四組小鼠差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。8周末四組間的蔗糖消耗百分比差異有顯著性差異(F=5.505,P=0.004),總消耗量差異無統(tǒng)計學(xué)意義。10周末四組間總消耗量和蔗糖消耗百分比差異均有顯著性,P值均為0.000;旋轉(zhuǎn)棒實驗CPZ造模前四組無明顯差異,6周末、8周末和10周末掉落時間四組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,P值依次為0.004,0.002和0.001,掉落時旋轉(zhuǎn)棒速度6周末、8周末和10周四組間差異也均有統(tǒng)計學(xué)意義,P值依次為0.009,0.002和0.001。2.免疫熒光檢測ECS對胼胝體脫髓鞘修復(fù)的影響:CPZ造模結(jié)束后,通過免疫熒光方法檢測小鼠胼胝體MBP蛋白表達量發(fā)現(xiàn):CPZ組的平均熒光強度顯著低于CNT組(t=3.254,P=0.024)。8周末MBP在胼胝體的平均光密度四組間差異有顯著性(F=8.483,P=0.007)。10周末MBP在胼胝體的平均光密度四組間差異有顯著性(F=6.110,P=0.018)。3.Western blot檢測ECS對前額葉和海馬髓鞘修復(fù)的影響:6周末CPZ組小鼠前額葉CNPase、MBP蛋白表達量均少于CNT組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P分別為0.003和0.004;CPZ組海馬CNPase、MBP蛋白表達量也均少于CNT組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P分別為0.005和0.007。8周末前額葉CNPase和MBP蛋白表達四組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,P值均為0.000;海馬CNPase和MBP蛋白表達四組間差異也均有統(tǒng)計學(xué)意義,P分別為0.049和0.008。10周末前額葉CNPase蛋白表達四組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(F=6.706,P=0.014),MBP蛋白表達四組間差異無顯著性(F=2.704,P=0.092);海馬CNPase和MBP蛋白表達四組間差異也均有統(tǒng)計學(xué)意義,P分別為0.013和0.004。結(jié)論1.ECS對脫髓鞘模型小鼠的行為學(xué)改善要早于對腦白質(zhì)脫髓鞘的修復(fù),長時間的ECS可能引起小鼠部分行為學(xué)的異常。2.ECS對CPZ所致小鼠脫髓鞘的修復(fù)作用受ECS作用時間的影響,短時間的ECS對脫髓鞘無明顯修復(fù)作用,長時間的ECS明顯促進脫髓鞘的修復(fù)作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R749
【參考文獻】
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1 李永德;王蕓;程國華;彭超;陳林;盧偉;孔吉明;肖嵐;唐勇;;不同雙環(huán)己酮草酰二腙劑量誘導(dǎo)小鼠行為學(xué)改變及海馬CA1區(qū)和DG區(qū)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維改變[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2013年13期
2 王維剛;劉震澤;吳文婷;萬穎寒;嚴(yán)惠敏;;小鼠動物實驗方法系列專題(七)曠場實驗在小鼠行為分析中的應(yīng)用[J];中國細胞生物學(xué)學(xué)報;2011年11期
3 范凱;宋大為;馬堅妹;;Cuprizone介導(dǎo)的急性脫髓動物模型髓鞘脫失及再生的機制[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2007年02期
,本文編號:1660259
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