本文選題：雙側(cè)卵巢切除術　切入點：雌激素受體　出處：《華中科技大學》2012年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：【背景】 雙側(cè)卵巢切除術（Ovariectomy,Ovx）簡稱去勢又稱為外科絕經(jīng)(SurgicalMenopause)，伴隨著雌激素水平的顯著降低，該手術后女性會早于更年期絕經(jīng)，患心血管、認知障礙和癡呆等疾病的風險增加；認知功能障礙在雙側(cè)卵巢切除術后表現(xiàn)尤為明顯，主要表現(xiàn)為記憶力減退，工作能力下降。雌激素對大腦有神經(jīng)保護性作用，主要通過雌激素受體（ER）發(fā)揮功能，雌激素受體，包括了雌激素受體alpha（ER）和雌激素受體beta（ER），在大腦中分布廣泛。然而，雌激素受體在雙側(cè)卵巢切除術后認知功能障礙中的作用和機制尚不清楚。 【目的】 探討雙側(cè)卵巢切除術引發(fā)認知功能障礙的分子機制，為外科絕經(jīng)女性預防認知功能障礙提供新的信息，為藥物研發(fā)提供分子靶點。 【方法】 本研究以雙側(cè)卵巢切除的3月齡雌性大鼠作為研究對象，首先將Sprague-Dawley (SD)大鼠隨機分為假手術組（Sham）和去勢組（Ovx），分別監(jiān)測假手術組和去勢組在去勢后24小時、第1周、第2周、第4周、第8周5個不同時間點，雌激素受體在大腦海馬區(qū)的變化。根據(jù)實驗結(jié)果，選擇去勢后第7-8周作為下一步實驗的檢測時間。Sham組和Ovx組大鼠在術后第7周開始進行水迷宮訓練（Morris Water Maze，MWM）連續(xù)學習7天,休息6天后在去勢第8周的最后一天檢測大鼠學習記憶的能力。行為學檢測結(jié)束后，快速收集樣品。為了證明ER在去勢雌性大鼠學習記憶中的作用，又將大鼠分為假手術組、去勢組、對照給藥組（Ovx+Vehicle）組和PPT給藥組（Ovx+PPT）組,PPT給藥組每天皮下注射ER的激動劑PPT(1mg/kg/day),對照給藥組大鼠給予等體積的媒介液，持續(xù)給藥8周。經(jīng)行為學水迷宮訓練檢測后，收集樣品。用酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme-linked immunosorbent assay，Elisa）、免疫蛋白印跡（WesternBlot,WB）、免疫組織化學（Immunohistochemistry，IH）、高爾基染色（GolgiImpregnation）尼氏染色（Nissel Staining）等方法來檢測雌激素水平、雌激素受體的表達、神經(jīng)元、樹突棘及學習記憶相關蛋白和激酶的表達與活性。 【結(jié)果】 1.雙側(cè)卵巢切除大鼠學習記憶障礙，并伴有海馬ER水平下降，ER無明顯變化；同時伴有海馬神經(jīng)元、樹突棘及突觸相關蛋白丟失（Synapsin，NR2A, GluR1）,以及伴有學習記憶相關激酶活性的降低(CaMK,Akt，ERK)； 2.雙側(cè)卵巢切除后及時補充雌激素受體激動劑PPT,顯著改善雙側(cè)卵巢切除大鼠學習記憶能力、改善雙側(cè)卵巢切除大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元的丟失及ER表達下降、改善雙側(cè)卵巢切除大鼠海馬區(qū)樹突棘及突觸相關蛋白的丟失和學習記憶相關激酶活性的降低。同時PPT能改善維持雙側(cè)卵巢切除大鼠子宮的重量并防止體重的增加； 【結(jié)論】 ERα，而不是ERβ在雙側(cè)卵巢切除誘導的認知障礙中發(fā)揮重要作用，及時補充ER激動劑PPT為去勢后改善學習記憶的有效治療方式之一。 【背景】 有報道顯示雌激素能通過抑制糖原合酶激酶-3（Glycogen synthase kinase-3,GSK-3）的活性改善阿爾茨海默�。ˋlzheimer's disease，AD）的病理特點。AD的兩大病理特征為A的沉積及Tau蛋白的異常磷酸化，GSK-3參與了這兩大病理特征的形成。雌激素可通過雌激素受體ER發(fā)揮神經(jīng)保護性作用，ER是GSK-3的底物之一，GSK-3磷酸化ER的Ser118位點。雙側(cè)卵巢切除術后腦內(nèi)GSK-3活性變化及在去勢誘導學習記憶障礙中的作用尚不清楚。 【目的】 探討去勢后腦內(nèi)GSK-3活性變化及在去勢誘導學習記憶障礙中的作用，為預防卵巢切除術后認知功能障礙提供依據(jù)。 【方法】 本研究以雙側(cè)卵巢切除的3月齡(Sprague-Dawley，SD)雌性大鼠作為研究對象，首先檢測去勢組和假手術組GSK-3在去勢大鼠海馬區(qū)的活性及表達，及雌激素受體的活性改變。分別在去勢后運用ER的激動劑PPT、GSK-3的抑制劑LiCl及聯(lián)合運用PPT+LiCL，觀察去勢大鼠學習記憶的變化。將大鼠隨機分為載體組（Ovx+Vehicle）、PPT組（Ovx+PPT）、LiCL組（Ovx+LiCl）及（Ovx+PPT+LiCl）組。通過水迷宮訓練分別監(jiān)測不同給藥組去勢后學習記憶能力的改變。行為學檢測結(jié)束后，，快速收集樣品。通過免疫蛋白印跡、免疫組化、成份蛋白的提取、Golgi染色等檢測方法，了解不同給藥組治療后雌激素受體及GSK-3的活性、表達在大腦海馬區(qū)的變化及分布。 【結(jié)果】 1.去勢大鼠海馬GSK-3激活并表達增加；去勢大鼠ER活性位點p-Ser118ER在細胞核表達增高； 2.PPT組、LiCl組及聯(lián)合給藥組能通過減少去勢后ER的丟失和抑制激活GSK-3改善去勢大鼠學習記憶的能力；PPT組、LiCl組及聯(lián)合給藥組能通過減少去勢后ER的丟失和抑制激活GSK-3延緩突觸的丟失； 【結(jié)論】 PPT聯(lián)合LiCl處理能顯著緩解去勢大鼠空間認知障礙，并能預防雌激素缺乏誘導的神經(jīng)元退行性變性。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R749.2

【共引文獻】

相關期刊論文 前6條

1 左明新;陳曉光;;糖原合成酶激酶-3及其抑制劑研究進展[J];國際藥學研究雜志;2007年04期

2 于宏穎;趙昕;全南虎;鄭楊;;糖尿病與心肌缺血后適應保護[J];臨床心血管病雜志;2009年11期

3 尹霞;趙昕;鄭楊;;糖尿病與急性心肌梗死缺血再灌注損傷[J];心臟雜志;2011年03期

4 孫治坤;楊紅旗;陸國強;丁健青;陳生弟;;氯化鋰抑制β-淀粉樣蛋白誘導細胞Tau蛋白磷酸化[J];中國藥理學通報;2008年01期

5 孫治坤;潘靜;楊紅旗;梁梁;丁健青;陳生弟;;PI3K/Akt途徑在Aβ誘導細胞凋亡過程中的作用[J];中國病理生理雜志;2009年01期

6 李強;胡長林;王景周;;地黃益知浸膏對老年性癡呆大鼠海馬磷酸化CREB、GSK-3β表達的影響[J];中國老年學雜志;2008年06期

相關博士學位論文 前6條

1 王茜;Notch和Wnt信號通路與髓母細胞瘤的生長與治療[D];大連醫(yī)科大學;2008年

2 李強;1.輕度認知功能障礙與阿爾茨海默病臨床綜合性評價的對照研究 2.Alzheimer病大鼠腦內(nèi)突觸功能障礙分子生物學機制及干預的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學;2008年

3 左明新;甲異靛抗慢性髓性白血病和結(jié)腸癌HT-29的活性及作用機制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

4 蔡飛;糖原合成酶激酶-3β信號通路介導海馬CA1區(qū)長時程增強的氧化性調(diào)節(jié)作用[D];華中科技大學;2008年

5 唐正國;硫化氫延遲預處理對大鼠心肌的保護作用及其機制的研究[D];中南大學;2010年

6 許智祥;糖原合酶激酶3β在嗅覺系統(tǒng)中功能的研究[D];中國科學院研究生院（武漢物理與數(shù)學研究所）;2013年

相關碩士學位論文 前10條

1 賴忠盟;七氟烷后處理對缺氧缺血性腦損傷新生大鼠遠期神經(jīng)學預后及機制[D];福建醫(yī)科大學;2011年

2 董燕;阿托伐他汀對體外培養(yǎng)皮層神經(jīng)元樹突發(fā)育的影響及其作用機制[D];遼寧醫(yī)學院;2011年

3 陳艷杏;17β-雌二醇對亞致死量Aβ_（1-42）所致PC12細胞CREB活性改變的影響[D];華中科技大學;2010年

4 葉春美;GSK-3β和β-catenin在彌漫性大B細胞淋巴瘤組織中的表達及意義[D];蘇州大學;2011年

5 于宏穎;2型糖尿病大鼠心肌缺血后適應的實驗研究[D];吉林大學;2009年

6 譚婕;2型糖尿病患者糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）基因表達研究[D];湖北中醫(yī)藥大學;2010年

7 韋美丹;小膠質(zhì)細胞α7-nAChR激活在Aβ介導神經(jīng)干細胞失能中的作用及分子機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2012年

8 高偉忠;丙泊酚對肝缺血再灌注大鼠肺損傷及PI3K/AKT通路的影響[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

9 張金囡;SD大鼠腦缺血再灌及丹參多酚酸鹽干預后HSP22表達變化的研究[D];中南大學;2013年

10 李秀;荔枝核總皂苷對AD大鼠海馬神經(jīng)元的保護作用及其機制研究[D];瀘州醫(yī)學院;2013年

本文編號：1646605