本文選題：石斛合劑　切入點：STZ　出處：《福建中醫(yī)藥大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的研究石斛合劑對鏈脲佐菌素STZ(streptozotocin,STZ)誘導的認知功能障礙大鼠海馬組織的保護作用機制,為阿爾茨海默癥的防治提供新的研究思路。方法Wistar大鼠(體重220g左右,SPF級,雄性)40只,適應性喂養(yǎng)一周,隨機分為五組,其中8只作為正常組,剩余32只行側腦室定位注射(intracerebroventricular injection,ICV)。正常組大鼠不做任何處理,同期常規(guī)飼養(yǎng);其中8只大鼠側腦室注射10μL生理鹽水替代鏈脲佐菌素,即為假手術組;剩余24只大鼠均側腦室定位注射10%鏈脲佐菌素1OμL,32只大鼠均于第3日重復注射一次;建模一周后,采用Morris水迷宮實驗進行行為學檢測,根據(jù)水迷宮實驗結果將24只大鼠隨機分為模型組、低劑量組、高劑量組,灌胃石斛合劑4周后,再次利用Morris水迷宮對大鼠進行行為學檢測,檢測結束后禁食10h進行取材,麻醉大鼠后,各組隨機選取4只先后利用生理鹽水和4%多聚甲醛溶液作全身灌注,待肝臟及四肢變僵硬則停止灌注,斷頭取腦并取海馬,海馬組織行HE染色、剛果紅染色;TUNEL法檢測海馬組織內(nèi)神經(jīng)細胞凋亡程度;各組余下大鼠取海馬組織,分別采用 RT-qPCR 及 Western bolt 檢測 BCl-2、Bax、Caspase-3 的 mRNA 轉錄及蛋白表達水平。結果1大鼠一般情況觀察:正常組大鼠活動度正常,飲食、飲水量正常,假手術組大鼠活動度差,飲食、飲水量正常,模型組大鼠偶有出現(xiàn)茸毛現(xiàn)象,行動力差,體重有所減輕,經(jīng)藥物治療后,情況較前有所好轉。2大鼠Morris水迷宮實驗:藥物干預前,與正常組比,假手術組與模型組大鼠尋找水下平臺的時間延長、跨越平臺次數(shù)減少且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01);藥物干預后,與模型組相比,高劑量組大鼠到達平臺的時間縮短、跨越平臺次數(shù)增多但無統(tǒng)計學差異(P=0.067),低劑量組大鼠到達平臺時間縮短、跨越平臺次數(shù)增多且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01);其中假手術組和模型組與正常組大鼠相比,尋找水下平臺的時間延長、跨越平臺次數(shù)增多且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01)。3大鼠海馬組織HE染色:正常組細胞數(shù)量多排列整齊,形態(tài)正常且分布均勻,胞內(nèi)結構正常,染色正常;模型組細胞數(shù)量減少,可見許多細胞體積縮小,排列不規(guī)則,分布不均勻,胞核固縮,染色加深;藥物干預后,與模型組相比,高劑量組和低劑量組細胞數(shù)量增多,細胞內(nèi)結構、排列、形態(tài)均有所改善,染色正常。4大鼠海馬組織剛果紅染色:與正常組比,模型組的陽性斑塊數(shù)增多且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01);藥物干預后,與模型組比,高劑量組和低劑量組的陽性斑塊數(shù)減少且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01);與高劑量組比,低劑量組的陽性斑塊數(shù)減少且統(tǒng)計學差異顯著(P0.05)。5大鼠海馬組織TUNEL法凋亡檢測:與正常組比,模型組的陽性染色細胞數(shù)量增多且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01);藥物干預后,與模型組比,低劑量組和高劑量組的陽性染色細胞數(shù)量減少且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01)。6大鼠海馬組織Bax、Bcl-2、Caspase-3mRNA的表達:與正常組比,模型組Bcl-2mRNA表達水平降低且統(tǒng)計學差異顯著(P0.05),BaxmRNA、Caspase-3mRNA表達水平升高且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01);藥物干預后,與模型組比,低劑量組Bcl-2mRNA表達水平升高但無明顯差異(P=0.0503),BaxmRNA、Caspase-3mRNA表達水平顯著降低且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01),高劑量組Caspase-3mRNA表達水平降低但無明顯差異(P0.05),Bcl-2mRNA表達水平升高但無明顯差異(P0.05),BaxmRNA表達水平降低且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01)。7大鼠海馬組織Bax、Bcl-2、Caspase-3的蛋白表達:與正常組相比,模型組Bcl-2蛋白表達量降低且統(tǒng)計學差異顯著(P0.05),Bax、Caspase-3蛋白表達量升高且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01);藥物干預后,與模型組比,高劑量組和低劑量組Bcl-2的蛋白表達量升高且統(tǒng)計學差異顯著(P0.05),Bax蛋白表達量降低且統(tǒng)計學差異顯著(P0.05),Caspase-3蛋白表達量降低且統(tǒng)計學差異極顯著(P0.01)。結論1.石斛合劑可增強STZ誘導的認知功能障礙大鼠的學習記憶能力;2.石斛合劑可減少STZ誘導的認知功能障礙大鼠腦組織的斑塊沉積以及減輕大鼠腦組織的凋亡壞死程度;3.石斛合劑可能通過上調Bcl-2、下調Bax、Caspase-3的表達量,抑制認知功能障礙大鼠的腦損傷。
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【學位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R749.16

【參考文獻】

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