本文關(guān)鍵詞： 阿爾茨海默癥 γ分泌酶 DAPT 突觸傳遞可塑性 長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)LTP　出處：《復(fù)旦大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：阿爾茨海默癥(Alzheimer's disease, AD)是一種進(jìn)行性神經(jīng)退行性疾病,臨床癥狀表現(xiàn)常伴隨嚴(yán)重的學(xué)習(xí)、記憶和認(rèn)知功能障礙,AD患者大腦神經(jīng)元中病理特征主要包括：由于細(xì)胞外p淀粉樣蛋白片段(Aβ)和細(xì)胞內(nèi)Tau非正常折疊、累積、沉淀而形成的老年斑塊和神經(jīng)元纏結(jié),炎癥反應(yīng),神經(jīng)元和突觸的損傷缺失等癥狀。阿爾茨海默癥在老年人群中有高發(fā)病率,給患者及看護(hù)帶來(lái)沉重的社會(huì)和精神負(fù)擔(dān)。因此,AD的研究備受重視,然而詳盡的發(fā)病原因和分子機(jī)制還沒有完全闡明,目前尚缺乏有效的治療手段。淀粉樣前體蛋白APP經(jīng)過(guò)一系列分泌酶有順序的剪切后產(chǎn)生多種蛋白片段,包括Aβ1-40 Aβ1-42等,其中Aβ1-42被普遍認(rèn)為與AD的老年斑塊形成以及記憶損傷有關(guān)。研究指出有效抑制p、γ等分泌酶的活性來(lái)降低Ap的產(chǎn)生,作為減緩AD發(fā)病進(jìn)程的重要策略之一。然而,正常生理狀態(tài)下,Ap的內(nèi)源性作用機(jī)制還未完全闡明。最新研究表明,Aβ1-42不能僅僅被看作是導(dǎo)致癡呆的有毒因子, 在正常生理狀態(tài)下,內(nèi)源性Aβ1.42可能在海馬依賴的記憶形成、鞏固過(guò)程中以及海馬突觸可塑性中包括短時(shí)程增強(qiáng)(Short-term potentiation, STP),長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(Long-term potentiation, LTP)中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。LTP被普遍認(rèn)為是學(xué)習(xí)和記憶的基礎(chǔ),可作為檢測(cè)學(xué)習(xí)和記憶能力的指標(biāo)。大腦海馬是LTP形成的重要區(qū)域之一。因此海馬區(qū)域突觸傳遞的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)LTP是研究學(xué)習(xí)記憶的突觸可塑性變化的首選常規(guī)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ�。DAPT是一種非蛋白1,分泌酶抑制劑,可以降低腦內(nèi)Ap的產(chǎn)生。所以本文提出假設(shè),在大鼠海馬區(qū)域通過(guò)抑制γ分泌酶的活性,進(jìn)而可能降低Ap的產(chǎn)生,可以間接影響海馬正常生理狀態(tài)下的突觸傳遞和活性依賴的可塑性。本文通過(guò)急性分離大鼠海馬腦片,Interface體外孵育,通過(guò)灌流的給藥方式給予1,分泌酶抑制劑DAPT或Compound E,分析Y分泌酶抑制劑對(duì)興奮性突觸后場(chǎng)電位基礎(chǔ)傳遞的影響,通過(guò)使用不同刺激方案,研究藥物對(duì)海馬活性依賴的可塑性的影響,包括三次高頻刺激誘導(dǎo)LTP、單次高頻刺激誘導(dǎo)STP、低頻刺激誘導(dǎo)LTD。此外,分析γ分泌酶抑制劑對(duì)NMDA受體依賴的突觸傳遞的影響。而且用另外一種Y分泌酶抑制劑Compound E,以DAPT同樣的作用方法來(lái)研究其對(duì)海馬突觸傳遞和活性依賴可塑性的電生理機(jī)制。結(jié)果指出,急性使用γ分泌酶抑制劑DAPT,可以顯著性抑制三次高頻刺激誘導(dǎo)的LTP的維持和鞏固,增強(qiáng)低頻刺激誘導(dǎo)的LTD表達(dá),而不影響單次高頻刺激誘導(dǎo)的STP。此外,不同的DAPT作用時(shí)間：在LTP誘導(dǎo)前給藥,LTP誘導(dǎo)后給藥,以及全程給藥,對(duì)LTP的影響不同。結(jié)果表明,DAPT并不影響LTP的誘導(dǎo),但是可以顯著性抑制LTP的維持和鞏固。指出DAPT的抑制作用主要發(fā)生在后期LTP蛋白合成階段。γ分泌酶抑制劑Compound E也可以顯著性抑制LTP的維持和鞏固,不影響海馬突觸基礎(chǔ)傳遞效率。進(jìn)一步驗(yàn)證了γ分泌酶抑制后對(duì)海馬突觸傳遞可塑性有一定的影響。然而,與之相關(guān)聯(lián)的具體細(xì)胞機(jī)制和細(xì)胞通路還需要進(jìn)一步研究,由于DAPT還可以抑制Notch信號(hào)蛋白的活性,所以不能排除DAPT是通過(guò)抑制Notch信號(hào)通路而影響海馬突觸傳遞可塑性。這種DAPT對(duì)LTP的維持抑制作用,進(jìn)而可能導(dǎo)致大鼠的學(xué)習(xí)記憶方面的認(rèn)知功能障礙。綜上提示,通過(guò)使用抑制γ分泌酶雖然降低Ap的產(chǎn)生,從而抑制AD患者的學(xué)習(xí)記憶損傷、減輕癡呆嚴(yán)重程度,以作為減緩AD發(fā)病進(jìn)程的治療策略,但是γ分泌酶的抑制也會(huì)影響正常海馬突觸傳遞和可塑性,因此可能會(huì)抑制正常學(xué)習(xí)記憶功能的發(fā)揮,一定程度上導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙。本文研究為篩選有效治療阿爾茨海默癥并減輕病人認(rèn)知功能障礙的藥物提供了一定的參考價(jià)值。
[Abstract]:闃垮皵鑼ㄦ搗榛樼棁(Alzheimer's disease, AD)鏄竴縐嶈繘琛屾，

本文編號(hào)：1496715