本文關(guān)鍵詞：姜黃素通過Caveolin-1在AD中發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的分子機(jī)制

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【摘要】：目的：細(xì)胞膜小凹的標(biāo)志蛋白Caveolin-1與阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）密切相關(guān)，它不僅與AD時膽固醇失衡有關(guān)，還參與裂解β淀粉樣蛋白前體蛋白（amyloid β-protein precursor，APP）和生成β淀粉樣蛋白（β-amyloid peptide，Aβ）。有研究表明姜黃素在AD中發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，但其對AD中Caveolin-1的影響及作用機(jī)制目前尚不清楚。本實驗通過體內(nèi)外研究姜黃素對Caveolin-1的表達(dá)和糖原合成酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）活性的影響，以及對Tau蛋白的影響，探討其發(fā)揮作用的機(jī)制，為姜黃素有效防治AD提供新的理論依據(jù)。 方法：體外實驗部分，N2a細(xì)胞分為三組：WT組（N2a/WT細(xì)胞）、APP組（N2a/APP695swe細(xì)胞）和CUR組（5μM姜黃素處理24h的N2a/APP695swe細(xì)胞）；電鏡觀察細(xì)胞膜小凹結(jié)構(gòu)的變化；免疫熒光方法檢測細(xì)胞內(nèi)Tau、Tau-Ser404、Caveolin-1、GSK-3β和GSK-3β-Ser9的定位和表達(dá)變化；Western blot方法檢測細(xì)胞內(nèi)Tau、Tau-Ser404、Caveolin-1、GSK-3β和GSK-3β-Ser9的蛋白水平變化；Real-time PCR方法檢測細(xì)胞內(nèi)Caveolin-1mRNA水平變化。體內(nèi)實驗部分，六月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠隨機(jī)分為四組：NOR組（APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因陰性小鼠）、MOD組（APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因陽性小鼠）、LCUR組（含0.16g/kg姜黃素的混合飼料飼喂6個月的陽性小鼠）和HCUR組（含1.0g/kg姜黃素的混合飼料飼喂6個月的陽性小鼠）；免疫組化方法檢測小鼠大腦海馬區(qū)域Tau、Tau-Ser404、Caveolin-1、GSK-3β和GSK-3β-Ser9的表達(dá)變化；Western blot方法檢測小鼠大腦內(nèi)Tau、Tau-Ser404、Caveolin-1、GSK-3β和GSK-3β-Ser9的蛋白水平變化；Real-time PCR方法檢測小鼠大腦內(nèi)Caveolin-1mRNA水平變化。 結(jié)果：體外實驗部分，電鏡結(jié)果顯示姜黃素使N2a/APP695swe細(xì)胞膜上的小凹數(shù)量減少，小凹結(jié)構(gòu)處細(xì)胞膜變��；免疫熒光和Westernblot結(jié)果顯示姜黃素使細(xì)胞內(nèi)Tau-Ser404/Tau表達(dá)水平下降（P＜0.001），，Caveolin-1表達(dá)水平下調(diào)（P＜0.001），GSK-3β-Ser9/GSK-3β表達(dá)水平升高（P＜0.05）；Real-time PCR結(jié)果顯示姜黃素使細(xì)胞內(nèi)Caveolin-1mRNA表達(dá)下降（P＜0.01）。體內(nèi)實驗部分，免疫組化和Western blot結(jié)果顯示姜黃素使AD小鼠腦內(nèi)Tau-Ser404/Tau表達(dá)水平下降（P＜0.01）， Caveolin-1表達(dá)水平下調(diào)（P＜0.05），GSK-3β-Ser9/GSK-3β表達(dá)水平升高（P＜0.05）；Real-time PCR結(jié)果顯示姜黃素使AD小鼠腦內(nèi)Caveolin-1mRNA表達(dá)下降（P＜0.05）。 結(jié)論：姜黃素能夠通過下調(diào)Caveolin-1的表達(dá)抑制GSK-3β的活性，進(jìn)而抑制Tau蛋白的異常過度磷酸化，在AD中發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，提示Caveolin-1可能在姜黃素防治AD的過程中發(fā)揮著重要作用，本實驗結(jié)果為姜黃素防治AD提供了新思路。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.16

【共引文獻(xiàn)】

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1 李秋萍;戴俊東;翟文文;蔣俏麗;;單純形網(wǎng)格法優(yōu)化設(shè)計姜黃素-胡椒堿復(fù)方自微乳制劑處方[J];中國中藥雜志;2014年20期

本文編號：1178184