發(fā)布時間：2017-11-06 18:23

  本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用家蠶桿狀病毒表達系統(tǒng)在家蠶培養(yǎng)細胞和幼蟲體內(nèi)表達β-淀粉樣蛋白

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【摘要】：作為阿爾茨海默癥(AD)重要神經(jīng)病理學特征之一的腦內(nèi)老年斑主要由β-淀粉樣蛋白Aβ40和Aβ42聚集而成,Aβ42是其中的毒性成分。Aβ的特異性主動免疫對不同的轉(zhuǎn)基因AD模型小鼠均有治療作用,但臨床試驗中以注射方式給藥容易誘發(fā)炎癥反應(yīng)。為了能夠更好、更安全地采用主動的Aβ免疫療法達到預防和治療AD的目的,嘗試用家蠶桿狀病毒表達系統(tǒng)表達Aβ42蛋白。將Aβ42基因克隆入轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒pB acP AK8中,并使該重組質(zhì)粒和家蠶桿狀病毒Bm-BacP AK6線性化的DNA共轉(zhuǎn)染家蠶卵巢培養(yǎng)細胞BmN,經(jīng)篩選、純化獲得的重組病毒命名為BmN PV-Aβ42。用BmN PV-Aβ42感染BmN細胞和家蠶5齡起蠶后,利用Western blotting在BmN細胞和5齡幼蟲血淋巴中均可檢測到5 kD左右的特異性條帶,證明重組Aβ42蛋白表達成功。ELISA檢測顯示,重組Aβ42肽在感染后第4天的BmN細胞和感染后第6天的5齡幼蟲血淋巴中的表達量分別達到1.1 pg/個、2μg/mL。進一步提高Aβ42在家蠶桿狀病毒表達系統(tǒng)中的表達效率,有望為研發(fā)預防和治療阿爾茨海默癥的可食性疫苗提供新型原料。
【作者單位】： 浙江理工大學生命科學學院生物化學研究所 浙江省家蠶生物反應(yīng)器和生物醫(yī)藥重點實驗室;
【基金】：浙江省自然科學基金項目(No.Y3110354) 浙江省教育廳科研項目(No.Y201226220) 國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃“863”項目(No.2012ZX09102301-009,2011AA100603) 浙江省高校生物學重中之重(一級)學科建設(shè)項目
【分類號】：R749.16
【正文快照】： 阿爾茨海默癥(Alzheimer’disease,AD)是中樞神 經(jīng)系統(tǒng)的退行性變性疾病,臨床表現(xiàn)主要為記憶減退和認知障礙[1]。目前,世界醫(yī)學界主要針對AD的認知障礙進行治療,但卻缺乏針對AD的主要神經(jīng)病變特征的藥物。β-淀粉樣蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)的非正常沉積,以及微管相關(guān)蛋白

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本文編號：1148856