本文關鍵詞：α7nAChR和nNOS在Aβ誘導的認知障礙大鼠中樞表達的變化及其對學習記憶功能的影響

  更多相關文章： 阿爾茨海病 α7煙堿型乙酰膽堿受體 神經(jīng)元型一氧化氮合酶 Y-迷宮 學習記憶

【摘要】：目的:本文旨在探討煙堿型乙酰膽堿受體(nicotinic acetylcholine receptor,n ACh R)與神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthetase,n NOS)在Aβ誘導的認知障礙大鼠皮質(zhì)和海馬的時間和空間分布與變化及其對學習記憶認知功能的影響。觀察Aβ誘導的認知障礙模型大鼠在持續(xù)不同的時間內(nèi)皮質(zhì)及海馬各區(qū)α7n ACh R和n NOS水平和分布的變化,分析其在認知障礙模型大鼠中樞分布的空間特征及其隨時間變化的規(guī)律;以及在復制模型的同時側(cè)腦室反復多次應用NO前體左旋精氨酸(L-arginine,L-Arg)或α7n ACh R激動劑氯化膽堿(choline chloride,CC)和聯(lián)合應用L-Arg和CC對認知功能障礙模型大鼠皮質(zhì)和海馬n NOS和α7n ACh R水平和學習記憶認知功能的影響,探討中樞NO能系統(tǒng)與煙堿系統(tǒng)在大鼠認知功能障礙的相互作用。方法:第一部分:SD大鼠60只,隨機分成6組,其中3個實驗組分別經(jīng)側(cè)腦室注射凝聚態(tài)Aβ1-42(2.5μg/μl,4μl),連續(xù)觀察7d(7 d Aβ組)、14 d(14 d Aβ組)和21 d(21 d Aβ組);3個對照組(分別為7 d NS組、14 d NS組和21 d NS組)則注射等量生理鹽水和觀察相同的時間。用Y迷宮刺激器對大鼠進行學習和記憶行為能力檢測。用免疫組織化學染色和Western-blot檢測皮質(zhì)和海馬CA1、CA3、DG各區(qū)n NOS和α7n ACh R陽性細胞分布和蛋白表達量的變化。第二部分:40只SD大鼠隨機分成4組,每組經(jīng)側(cè)腦室注射Aβ1-42(2.5μg/μl,4μl),30 min后分別再注射:NO前體L-Arg(17.5μg/μl)(Aβ+L-Arg組)、或α7n ACh R激動劑CC(8μg/μl)(Aβ+CC組)、或等量的L-Arg和CC(Aβ+L-Arg+CC組)、以及生理鹽水(Aβ+NS組),每天各一次,每次5μl,連續(xù)7天。各組于最后一次給藥30 min后進行行為學檢測、免疫組織化學染色和Western-blot檢測。結果:(1)第一部分結果:1)Y迷宮行為學檢測結果顯示,各組大鼠在連續(xù)4天的檢測中其學習和記憶達標次數(shù)均隨測試天數(shù)的增加而減少。大鼠學習和記憶達標次數(shù),在3個實驗組與各自對照組比較均增多(均為P0.01);在3個實驗組之間比較,14 d組較7 d組增多(均為P0.05),21 d組較14 d組增多(P0.05或P0.01);而在3個對照組之間比較均沒有明顯差異。2)免疫組化和Western-blot檢測n NOS和α7n ACh R在皮質(zhì)和海馬各區(qū)表達的積分光密度值和蛋白表達量,在3個實驗組與各自對照組比較均降低(P0.05或P0.01),特別是前額葉皮質(zhì)淺層和海馬CA3區(qū)變化明顯;在3個實驗組之間比較,14 d組較7 d組降低(P0.05或P0.01),21 d組較14 d組上述指標降低(P0.05或P0.01);3個對照組之間比較均沒有明顯差異。(2)第二部分結果:1)Y迷宮行為學檢測結果,其學習和記憶達標次數(shù),在Aβ+L-Arg組(均為P0.05)或Aβ+CC組(P0.05或P0.01)與Aβ+NS組比較均減少;在Aβ+L-Arg+CC組與Aβ+L-Arg組(P0.05或P0.01)或Aβ+CC組(P0.05或P0.01)比較均減少。2)前額葉皮質(zhì)和海馬各區(qū)n NOS或α7n ACh R表達的積分光密度值和蛋白表達量,在Aβ+L-Arg組(均為P0.05)或Aβ+CC組(P0.05或P0.01)與Aβ+NS組比較均增多;在Aβ+L-Arg+CC組與Aβ+L-Arg組(P0.05或P0.01)或Aβ+CC組(P0.05或P0.01)比較均增多。結論:(1)在側(cè)腦室注射Aβ誘導的大鼠認知障礙模型中,大鼠的學習記憶行為能力和前額葉皮質(zhì)及海馬α7n ACh R和n NOS表達隨Aβ作用時間的延長呈進行性下降,且二者的表達變化在前額葉皮質(zhì)淺層和海馬CA3區(qū)最明顯。(2)側(cè)腦室聯(lián)合應用L-Arg和CC可明顯促進二者單獨應用時對n NOS和α7n ACh R表達水平的提高及大鼠認知障礙功能改善的效應。中樞n NOS與煙堿系統(tǒng)的協(xié)同作用更有利于改善大鼠的認知障礙功能。
【關鍵詞】：阿爾茨海病 α7煙堿型乙酰膽堿受體 神經(jīng)元型一氧化氮合酶 Y-迷宮 學習記憶
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R749.16
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-12
• 第一部分 α7n ACh R和n NOS在Aβ誘導的認知障礙大鼠前額葉皮質(zhì)和海馬表達的時間和空間的變化12-29
• 1 材料與方法12-17
• 1.1 實驗動物12
• 1.2 主要試劑及儀器12-13
• 1.3 動物篩選及側(cè)腦室插管13
• 1.4 動物分組及給藥13
• 1.5 大鼠學習和記憶行為能力檢測13-14
• 1.6 組織處理14
• 1.7 皮質(zhì)和海馬各區(qū)α7n ACh R和n NOS陽性細胞表達檢測14
• 1.8 海馬n NOS和α7n ACh R蛋白含量檢測14-16
• 1.9 統(tǒng)計學處理16-17
• 2 結果17-26
• 2.1 大鼠 Y 迷宮學習和記憶行為學檢測結果17-18
• 2.2 大鼠前額葉皮質(zhì)和海馬 n NOS-LI 和α7n ACh R-LI 免疫組織化學染色結果18-24
• 2.3 Western-Blot檢測結果24-26
• 3 討論26-28
• 4 結論28-29
• 第二部分 中樞一氧化氮合酶與煙堿型乙酰膽堿受體對Aβ誘導的大鼠認知功能障礙的影響29-39
• 1 材料與方法29-32
• 1.1 實驗動物29
• 1.2 主要試劑及儀器29
• 1.3 動物篩選及側(cè)腦室插管29
• 1.4 動物分組及給藥29-30
• 1.5 大鼠學習和記憶行為能力檢測(30
• 1.6 組織處理30
• 1.7 皮質(zhì)和海馬各區(qū)α7n ACh R和n NOS陽性細胞表達檢測30-31
• 1.8 海馬n NOS和α7n ACh R蛋白含量檢測31
• 1.9 統(tǒng)計學處理31-32
• 2 結果32-36
• 2.1 大鼠學習和記憶行為學能力檢測32-33
• 2.2 免疫組化染色結果33-35
• 2.3 Western-Blot檢測結果35-36
• 3 討論36-38
• 4 結論38-39
• 參考文獻39-43
• 綜述43-58
• 參考文獻52-58
• 致謝58-59
• 在學期間承擔/參與的科研課題與研究成果59-60
• 個人簡歷60

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 楊偉;未小明;荊治華;趙建強;劉麗霞;祁文秀;;一氧化氮對大鼠學習記憶和膽堿能系統(tǒng)的影響[J];神經(jīng)解剖學雜志;2013年02期

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本文編號：1097236