本文關(guān)鍵詞：α7nAChR和nNOS在Aβ誘導(dǎo)的認(rèn)知障礙大鼠中樞表達(dá)的變化及其對學(xué)習(xí)記憶功能的影響

  更多相關(guān)文章： 阿爾茨海病 α7煙堿型乙酰膽堿受體 神經(jīng)元型一氧化氮合酶 Y-迷宮 學(xué)習(xí)記憶

【摘要】：目的:本文旨在探討煙堿型乙酰膽堿受體(nicotinic acetylcholine receptor,n ACh R)與神經(jīng)元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthetase,n NOS)在Aβ誘導(dǎo)的認(rèn)知障礙大鼠皮質(zhì)和海馬的時間和空間分布與變化及其對學(xué)習(xí)記憶認(rèn)知功能的影響。觀察Aβ誘導(dǎo)的認(rèn)知障礙模型大鼠在持續(xù)不同的時間內(nèi)皮質(zhì)及海馬各區(qū)α7n ACh R和n NOS水平和分布的變化,分析其在認(rèn)知障礙模型大鼠中樞分布的空間特征及其隨時間變化的規(guī)律;以及在復(fù)制模型的同時側(cè)腦室反復(fù)多次應(yīng)用NO前體左旋精氨酸(L-arginine,L-Arg)或α7n ACh R激動劑氯化膽堿(choline chloride,CC)和聯(lián)合應(yīng)用L-Arg和CC對認(rèn)知功能障礙模型大鼠皮質(zhì)和海馬n NOS和α7n ACh R水平和學(xué)習(xí)記憶認(rèn)知功能的影響,探討中樞NO能系統(tǒng)與煙堿系統(tǒng)在大鼠認(rèn)知功能障礙的相互作用。方法:第一部分:SD大鼠60只,隨機(jī)分成6組,其中3個實(shí)驗(yàn)組分別經(jīng)側(cè)腦室注射凝聚態(tài)Aβ1-42(2.5μg/μl,4μl),連續(xù)觀察7d(7 d Aβ組)、14 d(14 d Aβ組)和21 d(21 d Aβ組);3個對照組(分別為7 d NS組、14 d NS組和21 d NS組)則注射等量生理鹽水和觀察相同的時間。用Y迷宮刺激器對大鼠進(jìn)行學(xué)習(xí)和記憶行為能力檢測。用免疫組織化學(xué)染色和Western-blot檢測皮質(zhì)和海馬CA1、CA3、DG各區(qū)n NOS和α7n ACh R陽性細(xì)胞分布和蛋白表達(dá)量的變化。第二部分:40只SD大鼠隨機(jī)分成4組,每組經(jīng)側(cè)腦室注射Aβ1-42(2.5μg/μl,4μl),30 min后分別再注射:NO前體L-Arg(17.5μg/μl)(Aβ+L-Arg組)、或α7n ACh R激動劑CC(8μg/μl)(Aβ+CC組)、或等量的L-Arg和CC(Aβ+L-Arg+CC組)、以及生理鹽水(Aβ+NS組),每天各一次,每次5μl,連續(xù)7天。各組于最后一次給藥30 min后進(jìn)行行為學(xué)檢測、免疫組織化學(xué)染色和Western-blot檢測。結(jié)果:(1)第一部分結(jié)果:1)Y迷宮行為學(xué)檢測結(jié)果顯示,各組大鼠在連續(xù)4天的檢測中其學(xué)習(xí)和記憶達(dá)標(biāo)次數(shù)均隨測試天數(shù)的增加而減少。大鼠學(xué)習(xí)和記憶達(dá)標(biāo)次數(shù),在3個實(shí)驗(yàn)組與各自對照組比較均增多(均為P0.01);在3個實(shí)驗(yàn)組之間比較,14 d組較7 d組增多(均為P0.05),21 d組較14 d組增多(P0.05或P0.01);而在3個對照組之間比較均沒有明顯差異。2)免疫組化和Western-blot檢測n NOS和α7n ACh R在皮質(zhì)和海馬各區(qū)表達(dá)的積分光密度值和蛋白表達(dá)量,在3個實(shí)驗(yàn)組與各自對照組比較均降低(P0.05或P0.01),特別是前額葉皮質(zhì)淺層和海馬CA3區(qū)變化明顯;在3個實(shí)驗(yàn)組之間比較,14 d組較7 d組降低(P0.05或P0.01),21 d組較14 d組上述指標(biāo)降低(P0.05或P0.01);3個對照組之間比較均沒有明顯差異。(2)第二部分結(jié)果:1)Y迷宮行為學(xué)檢測結(jié)果,其學(xué)習(xí)和記憶達(dá)標(biāo)次數(shù),在Aβ+L-Arg組(均為P0.05)或Aβ+CC組(P0.05或P0.01)與Aβ+NS組比較均減少;在Aβ+L-Arg+CC組與Aβ+L-Arg組(P0.05或P0.01)或Aβ+CC組(P0.05或P0.01)比較均減少。2)前額葉皮質(zhì)和海馬各區(qū)n NOS或α7n ACh R表達(dá)的積分光密度值和蛋白表達(dá)量,在Aβ+L-Arg組(均為P0.05)或Aβ+CC組(P0.05或P0.01)與Aβ+NS組比較均增多;在Aβ+L-Arg+CC組與Aβ+L-Arg組(P0.05或P0.01)或Aβ+CC組(P0.05或P0.01)比較均增多。結(jié)論:(1)在側(cè)腦室注射Aβ誘導(dǎo)的大鼠認(rèn)知障礙模型中,大鼠的學(xué)習(xí)記憶行為能力和前額葉皮質(zhì)及海馬α7n ACh R和n NOS表達(dá)隨Aβ作用時間的延長呈進(jìn)行性下降,且二者的表達(dá)變化在前額葉皮質(zhì)淺層和海馬CA3區(qū)最明顯。(2)側(cè)腦室聯(lián)合應(yīng)用L-Arg和CC可明顯促進(jìn)二者單獨(dú)應(yīng)用時對n NOS和α7n ACh R表達(dá)水平的提高及大鼠認(rèn)知障礙功能改善的效應(yīng)。中樞n NOS與煙堿系統(tǒng)的協(xié)同作用更有利于改善大鼠的認(rèn)知障礙功能。
【關(guān)鍵詞】：阿爾茨海病 α7煙堿型乙酰膽堿受體 神經(jīng)元型一氧化氮合酶 Y-迷宮 學(xué)習(xí)記憶
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R749.16
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-12
• 第一部分 α7n ACh R和n NOS在Aβ誘導(dǎo)的認(rèn)知障礙大鼠前額葉皮質(zhì)和海馬表達(dá)的時間和空間的變化12-29
• 1 材料與方法12-17
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物12
• 1.2 主要試劑及儀器12-13
• 1.3 動物篩選及側(cè)腦室插管13
• 1.4 動物分組及給藥13
• 1.5 大鼠學(xué)習(xí)和記憶行為能力檢測13-14
• 1.6 組織處理14
• 1.7 皮質(zhì)和海馬各區(qū)α7n ACh R和n NOS陽性細(xì)胞表達(dá)檢測14
• 1.8 海馬n NOS和α7n ACh R蛋白含量檢測14-16
• 1.9 統(tǒng)計學(xué)處理16-17
• 2 結(jié)果17-26
• 2.1 大鼠 Y 迷宮學(xué)習(xí)和記憶行為學(xué)檢測結(jié)果17-18
• 2.2 大鼠前額葉皮質(zhì)和海馬 n NOS-LI 和α7n ACh R-LI 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果18-24
• 2.3 Western-Blot檢測結(jié)果24-26
• 3 討論26-28
• 4 結(jié)論28-29
• 第二部分 中樞一氧化氮合酶與煙堿型乙酰膽堿受體對Aβ誘導(dǎo)的大鼠認(rèn)知功能障礙的影響29-39
• 1 材料與方法29-32
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動物29
• 1.2 主要試劑及儀器29
• 1.3 動物篩選及側(cè)腦室插管29
• 1.4 動物分組及給藥29-30
• 1.5 大鼠學(xué)習(xí)和記憶行為能力檢測(30
• 1.6 組織處理30
• 1.7 皮質(zhì)和海馬各區(qū)α7n ACh R和n NOS陽性細(xì)胞表達(dá)檢測30-31
• 1.8 海馬n NOS和α7n ACh R蛋白含量檢測31
• 1.9 統(tǒng)計學(xué)處理31-32
• 2 結(jié)果32-36
• 2.1 大鼠學(xué)習(xí)和記憶行為學(xué)能力檢測32-33
• 2.2 免疫組化染色結(jié)果33-35
• 2.3 Western-Blot檢測結(jié)果35-36
• 3 討論36-38
• 4 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 綜述43-58
• 參考文獻(xiàn)52-58
• 致謝58-59
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果59-60
• 個人簡歷60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 楊偉;未小明;荊治華;趙建強(qiáng);劉麗霞;祁文秀;;一氧化氮對大鼠學(xué)習(xí)記憶和膽堿能系統(tǒng)的影響[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2013年02期

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本文編號：1097236