發(fā)布時(shí)間：2017-10-25 17:07

  本文關(guān)鍵詞：APOE基因多態(tài)性對(duì)神經(jīng)元軸突生長的影響

  更多相關(guān)文章： 細(xì)胞分裂周期蛋白 神經(jīng)元 微管蛋白 軸突 載脂蛋白E 樹突 微絲

【摘要】：目的：觀察不同的APOE基因型所翻譯出的不同亞型的ApoE蛋白（apolipoprotein E，ApoE）對(duì)原代培養(yǎng)的神經(jīng)元樹突及軸突生長的影響，并探討其可能機(jī)制。 方法：將新生1天內(nèi)的APOE基因敲除乳鼠和C57系野生乳鼠消毒斷頭，并小心剝離腦膜和可見血管，，然后取出大腦皮層，剪碎后進(jìn)行神經(jīng)元原代培養(yǎng)；取APOE基因敲除鼠神經(jīng)元4組，分別在培養(yǎng)基中加入重組人類ApoE2、ApoE3、ApoE4蛋白，依次分為ApoE2組、ApoE3組、ApoE4組，另外未加入任何蛋白的APOE基因敲除鼠神經(jīng)元定為ApoE( )組，培養(yǎng)的野生鼠神經(jīng)元?jiǎng)t定為野生組；定期在倒置相差顯微鏡下觀察神經(jīng)元生長情況，并照片記錄，測(cè)量各組神經(jīng)元平均突起數(shù)量和各組神經(jīng)元軸突平均長度；通過熒光免疫實(shí)驗(yàn)對(duì)神經(jīng)元軸突進(jìn)行染色，并照片記錄，通過軟件對(duì)各組神經(jīng)元軸突熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析；通過Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組神經(jīng)元中cdc42（細(xì)胞分裂周期蛋白，cell division cycle42，cdc42）的表達(dá)。 結(jié)果：培養(yǎng)第1、3、5天各組神經(jīng)元平均軸突長度不相同，在第5d，野生鼠和ApoE基因敲除鼠神經(jīng)元平均軸突長度分別為（248.98±10.57μm）和（226.44±8.32μm）（p㩳0.05）；加入重組人類ApoE2、3、4組軸突長度分別為（248.98±10.57μm），（243.91±8.37μm），（225.23±7.33μm），其中ApoE（-）和ApoE4組軸突長度短于ApoE2、3組、野生組軸突長度(P㩳0.05)；第5天，加入ApoE2、3、4組神經(jīng)元軸突熒光強(qiáng)度分別為(52.40±6.33)、(50.50±8.21)、(39.00±8.32)，其中加入重組人類ApoE4組的軸突熒光強(qiáng)度低于加入ApoE2、3組的熒光強(qiáng)度(P㩳0.05)；野生組cdc42蛋白表達(dá)高于ApoE基因敲除組，野生組、ApoE2組、ApoE3組間無明顯差異，ApoE( )組、ApoE4組間亦無明顯差異。 結(jié)論：不同亞型ApoE蛋白對(duì)神經(jīng)元突起生長以及對(duì)tubulin Ⅲ及cdc42表達(dá)的影響不同，ApoE2、ApoE3對(duì)突起生長的促進(jìn)作用以及對(duì)tubulin Ⅲ及cdc42的表達(dá)的促進(jìn)作用明顯強(qiáng)于ApoE4，這可能是ApoE影響神經(jīng)元突起生長的可能機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：細(xì)胞分裂周期蛋白 神經(jīng)元 微管蛋白 軸突 載脂蛋白E 樹突 微絲
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R749.16
【目錄】：

• 英漢縮寫對(duì)照5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-12
• 1.材料與方法12-21
• 1.1 儀器和試劑12-14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法14-20
• 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理20-21
• 2.結(jié)果21-28
• 2.1 神經(jīng)元觀察及鑒定21-22
• 2.2 軸突平均長度和樹突個(gè)數(shù)22-25
• 2.3 神經(jīng)元軸突免疫熒光強(qiáng)度25-27
• 2.4 各組神經(jīng)元 cdc42 蛋白表達(dá)27-28
• 3.討論28-32
• 全文總結(jié)32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 文獻(xiàn)綜述36-45
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 致謝45-46
• 攻讀碩士期間發(fā)表文章46-47

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本文編號(hào)：1094662