本文關(guān)鍵詞：針刺與氟西汀對強迫游泳應(yīng)激大鼠JNK信號通路影響差異性研究

  更多相關(guān)文章： 針刺 氟西汀 強迫游泳 抑郁癥 JNK信號通路 差異性

【摘要】：抑郁癥是一種常見的精神疾病。以顯著而持久的情緒低落、思維遲緩和意志活動減退為主要特征。抑郁癥具有很高的致死致殘率。抑郁癥嚴(yán)重危害患者的身心健康和生活質(zhì)量,同時給患者家屬帶來巨大的精神和經(jīng)濟負擔(dān)。也能給社會造成經(jīng)濟負擔(dān)。 抑郁癥的發(fā)病與遺傳、生物、心理、社會等多種因素有關(guān)。近年來,細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在抑郁癥發(fā)病與抗抑郁藥物治療中的作用受到越來越多的關(guān)注。 大量的文獻報道,抑郁癥針刺治療療效肯定。其作用機制與針刺能夠調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)功能紊亂有關(guān)。針刺對抑郁模型大鼠腦內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響的研究也逐漸增多。但針刺與抗抑郁藥物對細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響的差異性研究尚未報道。 本研究擬選擇精神藥理學(xué)行為絕望強迫游泳動物模型,以行為學(xué)和JNK通路上與抑郁-應(yīng)激關(guān)系密切的主要效應(yīng)因子、促炎性細胞因子、HSP70為觀察指標(biāo),觀察在JNK信號通路阻斷劑SP600125作用下針刺與氟西汀的抗抑郁作用的有效性,探討針刺與氟西汀對模型大鼠腦內(nèi)JNK信號通路影響的差異性。研究方法 1分組將曠場實驗和糖水實驗行為學(xué)評分近似,體重170±10g的48只SD大鼠,按照隨機數(shù)字表分成正常組、正常+SP600125組(以下簡稱SP)、模型組、模型+SP組、針刺組、針刺+SP組、氟西汀組、氟西汀+SP組,每組6只。 2造模方法選擇模擬抑郁癥病人行為絕望的強迫游泳應(yīng)激模型。將大鼠放置盛有水溫24±1℃自來水的透明玻璃缸中行強迫游泳應(yīng)激15min.24h后再次進行強迫游泳6min,記錄其后5min內(nèi)游泳不動時間。用游泳不動時間評價行為學(xué)。 3干預(yù)方法正常組不給予任何干預(yù)。正常+SP組,僅腹腔注射SP600125(用DMSO溶解后,按10mg/kg腹腔注射)。模型+SP組,造模前30min腹腔注射SP600125。針刺組,造模前1h,取“百會”、“印堂”穴,用“百會透刺印堂”法留針20min。針刺+SP組,針刺穴位、方法及時間與針刺組相同,但針刺前30min腹腔注射SP600125。氟西汀組,造模前1h灌胃給藥,按1.8mg/kg,用蒸餾水配成氟西汀溶液,按10ml/kg灌胃。氟西汀+SP組,給藥劑量和方法與氟西汀組相同,但給藥前30min腹腔注射SP600125。 4檢測指標(biāo)及方法用ELISA方法檢測大鼠血清與海馬內(nèi)促炎性細胞因子IL-1βIL-6, TNF-a, HSP70的含量。Western blot法檢測海馬內(nèi)MKK4, MKK7, JNK, p-JNK, c-jun的含量。RT-PCR方法檢測海馬內(nèi)Caspase-3基因的表達。 研究結(jié)果 1行為學(xué)變化 正常組與正常+SP組大鼠游泳不動時間沒有顯著差異(P0.05)；與正常組比較,模型組大鼠游泳不動時間顯著增加(P0.01)；與模型組比較,模型+SP組、針刺組、針刺+SP組、氟西汀組、氟西汀+SP組大鼠游泳不動時間明顯降低(P0.05,P0.01,P0.01,P0.01,P0.01)；模型+SP組、針刺組、針刺+SP組、氟西汀組、氟西汀+SP組之間比較差異性沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 2血清與海馬IL-1β、IL-6、TNF-a含量 各組大鼠血清與海馬內(nèi)IL-1β、IL-6、TNF-a含量變化趨勢基本一致。正常組與正常+SP組之間比較,血清與海馬內(nèi)IL-1β、IL-6、TNF-含量無顯著差異(P0.05)：與正常組比較,模型組大鼠血清與海馬內(nèi)IL-1β、IL-6、TNF-a含量均顯著增加(均P0.01)；與模型組比較,模型+SP組、針刺組、針刺+SP組、氟西汀組、氟西汀+SP組大鼠血清與海馬內(nèi)IL-1β、IL-6、TNF-a含量含量均顯著降低(均P0.01)；模型+SP組、針刺組、針刺+SP組、氟西汀組、氟西汀+SP組各組之間均有顯著差異(均P0.01),氟西汀的降低作用優(yōu)于針刺(P0.01)。 3海馬內(nèi)MKK4、MKK7的含量 正常組與正常+SP組之間比較,海馬組織中MKK4、MMK7的含量無顯著差異(P0.05)；與正常組比較,模型組大鼠海MMK4、MMK7著增加(均p0.01)；與模型組比較,氟西汀+SP組MKK4和MMK7含量降低比較明顯(P0.05),模型+SP組、針刺組、針刺+sβ組、氟西汀組大鼠海馬MKK4、MMK7含量雖有降低趨勢,但差異性沒有統(tǒng)計學(xué)意義(均P0.05)；針刺組與氟西汀組之間比較沒有顯著差異(P0.05)。 4海馬JNK.p-JNK含量 海馬JNK含量不同組別之間沒有顯著差異((均P0.05)。 海馬β-JNK表達水平,正常組與正常+SP組之間無顯著差異(P0.05)；模型組大鼠海馬p-JNK表達較正常組顯著增加(P0.01)；與模型組比較,模型+SP組、針刺組、針刺+sβ組、氟西汀組、氟西汀+SP組大鼠p-JNK表達顯著降低(P0.05、P0.01、P0.01、P0.01、P0.01)；針刺組與氟西汀組之間比較無顯著差異(P0.05)。 5海馬c-jun的含量 海馬c-jun含量,正常組與正常+SP組之間無顯著差異(P0.05)；模型組大鼠海馬c-含量較正常組明顯增加(P0.01)；與模型組比較,模型+SP組、針刺組、針刺+sβ組、氟西汀組、氟西汀+SP組c-jun含量明顯降低(P0.05,P0.05,P0.01,P0.01,P0.01)；氟西汀的降低作用較針刺更明顯(P0.05)。 6海馬Caspase-3基因表達 正常組與正常+SP組大鼠海馬內(nèi)Caspase-3基因表達無顯著差異(P0.05);模型組大鼠海馬Caspase-3基因表達較正常組明顯增加(P0.01)；與模型組比較,模型+SP組、針刺組、針刺+SP組、氟西汀組、氟西汀+SP組大鼠海馬Caspase-3基因表達均明顯降低(均P0.01)；氟西汀的降低作用優(yōu)于針刺(P0.01)。 7血清與海馬HSP70含量 大鼠血清與海馬HSP70表達,正常組與正常+SP組之間無顯著差異(P0.05)；模型組大鼠血清與海馬內(nèi)HSP70表達較正常組明顯增加(均P0.01)；與模型組比較,模型+SP組、針刺組、針刺+SP組、氟西汀組、氟西汀+SP組大鼠血清與海馬HSP70表達明顯降低(均P0.01)；氟西汀的降低作用優(yōu)于針刺(P0.01)。結(jié)論 1強迫游泳應(yīng)激使大鼠出現(xiàn)行為絕望狀態(tài),增加游泳不動時間。針刺與氟西汀干預(yù)均能有效改善模型大鼠行為學(xué)變化。 2強迫游泳應(yīng)激增加大鼠血清與海馬IL-1β、IL-6、TNF-a的分泌。針刺與氟西汀干預(yù)均能有效降低模型大鼠血清與海馬IL-1β、IL-6、TNF-a的過度分泌。 3強迫游泳應(yīng)激激活大鼠海馬JNK信號通路,提高JNK的磷酸化水平。針刺與氟西汀均能降低模型大鼠海馬JNK的磷酸化水平,有效抑制模型大鼠腦內(nèi)JNK信號通路活性。 4強迫游泳應(yīng)激增加大鼠海馬c-jun和Caspase-3基因的表達。針刺與氟西汀均能顯著降低模型大鼠海馬c-jun和Caspase-3基因的表達。 5強迫游泳應(yīng)激增加大鼠血清與海馬HSP70含量。針刺與氟西汀干預(yù)使模型大鼠血清與海馬HSP70含量趨于正常水平。 6SP600125對正常生理狀態(tài)下大鼠行為學(xué)、促炎性細胞因子、JNK通路主要效應(yīng)因子、HSP70的表達沒有影響。而對強迫游泳應(yīng)激模型大鼠的行為學(xué)變化有顯著改善作用。同時,明顯降低模型大鼠促炎性細胞因子的分泌,抑制海馬JNK的磷酸化水平,降低c-jun和Caspase-3基因的表達,下調(diào)海馬內(nèi)HSP70高表達。 7針刺與氟西汀對強迫游泳應(yīng)激模型大鼠行為學(xué)的改善作用無顯著差異。對模型大鼠血清與海馬促炎性細胞因子、c-jun、 Caspase-3基因以及HSP70的調(diào)節(jié)作用二者存在差異性,氟西汀優(yōu)于針刺。
【關(guān)鍵詞】：針刺 氟西汀 強迫游泳 抑郁癥 JNK信號通路 差異性
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.4
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-13
• 英文縮略詞表13-15
• 前言15-17
• 第一部分 文獻綜述17-50
• 綜述一 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對抑郁癥的研究進展17-34
• 1 抑郁癥概述17
• 2 應(yīng)激與抑郁癥17-18
• 3 海馬與抑郁癥18-19
• 4 細胞因子與抑郁癥19-21
• 5 JNK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與抑郁癥21-22
• 6 抑郁癥動物模型22-26
• 7 抑郁癥的西醫(yī)治療進展26-28
• 參考文獻28-34
• 綜述二 抑郁癥的針刺治療研究進展34-50
• 1 針刺治療抑郁癥臨床研究34-39
• 2 針刺抗抑郁機制研究39-45
• 參考文獻45-50
• 第二部分 實驗研究50-81
• 實驗一 針刺與氟西汀對強迫游泳應(yīng)激大鼠行為學(xué)的影響50-56
• 前言50
• 材料與方法50-52
• 結(jié)果52-54
• 小結(jié)54-56
• 實驗二 針刺與氟西汀對強迫游泳應(yīng)激大鼠血清、海馬內(nèi)細胞因子的影響56-62
• 前言56
• 材料與方法56-58
• 結(jié)果58-61
• 小結(jié)61-62
• 實驗三 針刺與氟西汀對強迫游泳應(yīng)激大鼠海馬JNK通路信號效應(yīng)分子的影響62-71
• 前言62
• 材料與方法62-66
• 結(jié)果66-70
• 小結(jié)70-71
• 實驗四 針刺與氟西汀對強迫游泳應(yīng)激大鼠海馬Caspase-3基因的影響71-77
• 前言71
• 材料與方法71-75
• 結(jié)果75-76
• 小結(jié)76-77
• 實驗五 針刺與氟西汀對強迫游泳應(yīng)激大鼠血清與海馬HSP70的影響77-81
• 前言77
• 材料與方法77-78
• 結(jié)果78-80
• 小結(jié)80-81
• 第三部分 分析討論81-95
• 1 選題依據(jù)81-82
• 2 模型的選擇與建立82
• 3 穴位的選擇與干預(yù)方法82-83
• 4 陽性藥物的選擇83
• 5 檢測指標(biāo)選擇的依據(jù)83-84
• 6 針刺與氟西汀對大鼠行為學(xué)的影響84-85
• 7 針刺與氟西汀對大鼠血清與海馬細胞因子的影響85-86
• 8 針刺與氟西汀對大鼠海馬JNK通路效應(yīng)分子的影響86-87
• 9 針刺與氟西汀對大鼠海馬Caspase-3基因表達的影響87-88
• 10 針刺與氟西汀對大鼠血清與海馬Hsp70表達的影響88-89
• 11 針刺與氟西汀對強迫游泳應(yīng)激模型大鼠JNK信號通路影響的差異性89-90
• 參考文獻90-95
• 第四部分 結(jié)論95-96
• 展望95-96
• 致謝96-97
• 個人簡歷97-98

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 侯安繼;胡艷;周維;張紅衛(wèi);唐志佼;;老年抑郁大鼠海馬CA3區(qū)c-fos和Caspase-3蛋白的表達[J];武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年01期

2 王哲;胡隨瑜;雷德亮;宋煒熙;;慢性應(yīng)激對大鼠海馬神經(jīng)元PKA和P-CREB蛋白表達的影響及抗抑郁劑的拮抗作用[J];中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年05期

3 鄭華;王默力;段冬梅;于春水;圖婭;;抑郁癥首次發(fā)病患者海馬磁共振質(zhì)子波譜成像的研究[J];神經(jīng)疾病與精神衛(wèi)生;2008年06期

4 楊福中;施慎遜;;強迫游泳實驗研究應(yīng)用及進展[J];上海精神醫(yī)學(xué);2009年03期

5 韓毳,李曉泓,李學(xué)武,郭順根;電針“百會”、“三陰交”穴對慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠HPA軸的影響[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2001年03期

6 史榕荇;秦麗娜;吳茜;王遠征;圖婭;;電針對慢性應(yīng)激模型大鼠行為學(xué)及海馬谷氨酸含量影響的研究[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2007年03期

7 王遠征;淑沙尼克;宋萌;圖婭;;電針抗抑郁療效作用特點分析[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2010年03期

8 梁佳;盧峻;王俊仁;崔善福;阿英格;圖婭;;不同針刺方法對慢性應(yīng)激抑郁大鼠下丘腦CRH基因表達及血清ACTH、CORT的影響[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2012年04期

9 韓傳寶;周欽海;錢燕寧;;熱休克蛋白70對細胞應(yīng)激反應(yīng)的調(diào)節(jié)[J];臨床麻醉學(xué)雜志;2008年08期

10 張莉;哈木拉提·吾甫爾;;細胞因子在神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)中的調(diào)節(jié)機制[J];免疫學(xué)雜志;2006年S1期

，

本文編號：1077404