本文關(guān)鍵詞：長(zhǎng)期低劑量銅暴露對(duì)小鼠焦慮、抑郁行為的影響及蛋白質(zhì)組學(xué)研究

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【摘要】：目的：隨著社會(huì)的發(fā)展,醫(yī)療條件的進(jìn)步,以行為、心理活動(dòng)上的紊亂為主的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,包括精神分裂癥、帕金森氏病、阿爾茨海默癥(AD)等,已成為二十一世紀(jì)影響人類健康的最主要疾病之一。慢性低劑量銅暴露會(huì)引起情緒障礙的惡化,但機(jī)制尚不清楚。本文旨在初步確認(rèn)慢性低劑量銅暴露對(duì)焦慮、抑郁行為的影響,為人類了解并預(yù)防銅暴露的危害提供科學(xué)依據(jù),也為探索AD伴發(fā)的焦慮、抑郁的機(jī)制提供依據(jù)。方法：本文選用3月齡的野生型(wide-type mice, WT)小鼠及AD模型小鼠(3xTg-AD, Tg)小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,用含0.13 ppm氯化銅的飲用水喂養(yǎng)小鼠8個(gè)月,同時(shí)以未暴露銅的WT小鼠和Tg小鼠作為對(duì)照。首先利用曠場(chǎng)、高架十字迷宮以及黑白箱檢測(cè)慢性低劑量銅暴露對(duì)小鼠焦慮行為的影響；利用強(qiáng)迫游泳和懸尾實(shí)驗(yàn)檢測(cè)慢性低劑量銅暴露對(duì)小鼠抑郁行為的影響。隨后,利用同位素相對(duì)和絕對(duì)定量技術(shù)GTRAQ)標(biāo)記結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)檢測(cè)慢性低劑量銅暴露對(duì)杏仁核蛋白質(zhì)組學(xué)的影響。最后,應(yīng)用熒光差異雙向電泳(2D-DIGE)結(jié)合質(zhì)譜分析的方法研究慢性低劑量銅暴露對(duì)WT小鼠海馬蛋白質(zhì)組的影響,并使用蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western blot)對(duì)差異蛋白進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果：行為學(xué)結(jié)果顯示,經(jīng)銅暴露的WTCu小鼠相比正常WT小鼠有明顯的焦慮、抑郁行為；經(jīng)銅暴露的TgCu小鼠相比普通Tg小鼠有明顯的抑郁行為。杏仁核蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果表明,未經(jīng)銅暴露的Tg小鼠與未經(jīng)銅暴露的WT小鼠共有246個(gè)差異表達(dá)的蛋白；經(jīng)銅暴露的WTCu小鼠與未經(jīng)銅暴露的WT小鼠共有152個(gè)差異表達(dá)的蛋白；經(jīng)銅暴露的TgCu小鼠與未經(jīng)銅暴露的Tg小鼠共有210個(gè)差異表達(dá)的蛋白；生物信息學(xué)分析顯示,差異蛋白主要參與代謝、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)等進(jìn)程,且有多個(gè)表達(dá)異常的蛋白已有研究報(bào)道與焦慮、抑郁等情緒障礙相關(guān)。海馬蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果表明,經(jīng)銅暴露的WTCu小鼠與未經(jīng)銅暴露的WT小鼠共有9個(gè)差異表達(dá)的蛋白,其中絲氨酸消旋酶SRR及神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP經(jīng)Western blot驗(yàn)證與2D-DIGE結(jié)果一致。結(jié)論：慢性低劑量銅暴露會(huì)引起WT小鼠出現(xiàn)焦慮、抑郁癥狀,能惡化Tg小鼠的抑郁行為；慢性低劑量銅暴露使WT小鼠和Tg小鼠杏仁核蛋白相對(duì)未經(jīng)銅暴露小鼠出現(xiàn)差異表達(dá),發(fā)生差異表達(dá)的部分蛋白與神經(jīng)精神性疾病的發(fā)生密切相關(guān)；慢性低劑量銅暴露使WT小鼠海馬組織中SRR的表達(dá)上調(diào),GFAP的表達(dá)下調(diào)。
【關(guān)鍵詞】：低劑量銅 焦慮 抑郁 蛋白質(zhì)組學(xué)
【學(xué)位授予單位】：深圳大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R749
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 第1章 前言10-17
• 1.1 銅代謝與相關(guān)疾病10-11
• 1.1.1 銅代謝10
• 1.1.2 銅毒性10-11
• 1.1.3 銅代謝紊亂相關(guān)疾病11
• 1.2 情緒與腦11-12
• 1.3 情緒障礙相關(guān)的精神疾病12-13
• 1.4 蛋白質(zhì)組學(xué)13-15
• 1.5 本研究目的和意義15-17
• 第2章 材料與方法17-37
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料17-23
• 2.1.1 小鼠模型和受試物17
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑17-19
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器19-20
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)主要試劑的配制20-23
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法23-37
• 2.2.1 小鼠分組及處理23
• 2.2.2 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)23-24
• 2.2.3 高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)24
• 2.2.4 黑白箱實(shí)驗(yàn)24-25
• 2.2.5 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)25
• 2.2.6 懸尾實(shí)驗(yàn)25
• 2.2.7 小鼠組織的分離25-26
• 2.2.8 蛋白樣品準(zhǔn)備26-27
• 2.2.9 蛋白定量27-28
• 2.2.10 iTRAQ篩選慢性低劑量銅暴露小鼠杏仁核組織差異表達(dá)的蛋白28-30
• 2.2.11 2D-DIGE篩選慢性低劑量銅暴露小海馬組織差異表達(dá)的蛋白30-34
• 2.2.12 慢性低劑量銅暴露海馬組織差異蛋白的Western blot驗(yàn)證34-36
• 2.2.13 統(tǒng)計(jì)分析36
• 2.2.14 生物信息學(xué)分析36-37
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-61
• 3.1 慢性低劑量銅暴露對(duì)小鼠焦慮、抑郁行為的影響37-40
• 3.1.1 慢性低劑量銅暴露對(duì)小鼠焦慮行為的影響37-39
• 3.1.2 慢性低劑量銅暴露對(duì)小鼠抑郁行為的影響39-40
• 3.2 慢性低劑量銅暴露對(duì)小鼠杏仁核蛋白質(zhì)組的影響40-54
• 3.2.1 Tg小鼠與WT小鼠杏仁核組織差異表達(dá)蛋白40
• 3.2.2 低劑量銅暴露對(duì)WT小鼠杏仁核蛋白質(zhì)組學(xué)的影響40-41
• 3.2.3 低劑量銅暴露對(duì)Tg小鼠杏仁核蛋白質(zhì)組學(xué)的影響41
• 3.2.4 3Tg小鼠與WT小鼠杏仁核組織差異表達(dá)蛋白的生物信息學(xué)分析41-44
• 3.2.5 低劑量銅暴露引起的WTCu小鼠與WT小鼠杏仁核組織差異表達(dá)蛋白的生物信息學(xué)分析44-49
• 3.2.6 低劑量銅暴露引起的TgCu小鼠與Tg小鼠杏仁核組織差異表達(dá)蛋白的生物信息學(xué)分析49-54
• 3.3 慢性低劑量銅暴露對(duì)WT小鼠海馬蛋白質(zhì)組的影響54-61
• 3.3.1 慢性低劑量銅暴露后WT小鼠海馬組織差異表達(dá)的蛋白54-56
• 3.3.2 慢性低劑量銅暴露后WT小鼠海馬組織差異蛋白質(zhì)譜鑒定56-58
• 3.3.3 WT小鼠與WTCu小鼠海馬組織差異表達(dá)蛋白的生物信息學(xué)分析58-60
• 3.3.4 WT小鼠與WTCu小鼠海馬組織差異蛋白的進(jìn)一步驗(yàn)證60-61
• 第4章 討論61-66
• 4.1 慢性低劑量銅暴露對(duì)小鼠焦慮、抑郁行為的影響61-62
• 4.2 慢性低劑量銅暴露對(duì)小鼠杏仁核蛋白質(zhì)組的影響62-64
• 4.2.1 Tg小鼠與WT小鼠差異表達(dá)的蛋白62-63
• 4.2.2 WTCu小鼠與WT小鼠差異表達(dá)的蛋白63
• 4.2.3 TgCu小鼠與Tg小鼠差異表達(dá)的蛋白63-64
• 4.3 慢性低劑量銅暴露對(duì)WT小鼠海馬蛋白質(zhì)組的影響64-66
• 第5章 結(jié)論與展望66-68
• 5.1 結(jié)論66
• 5.2 展望66-68
• 參考文獻(xiàn)68-73
• 附錄73-114
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果114-115
• 致謝115

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王茜;張輝;劉名;張作鳳;魏子峰;孫娜;毛彤瑤;張宇新;;P38信號(hào)通路調(diào)控帕金森病小鼠黑質(zhì)NF-κB和iNOS的表達(dá)[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年08期

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本文編號(hào)：1037545